Характеристика разработки и создания биореактора с высоким уровнем биологической защиты. Главная особенность предложения оптимальной технологии концентрирования тангенциальной ультрафильтрацией протективных антигенов Vibrio cholerae 569В серовара Инаба.
Аннотация к работе
На правах рукописи Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наукРабота выполнена в Федеральном государственном учреждении здравоохранения «Российский научно-исследовательский противочумный институт «Микроб» Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека Научные руководители: кандидат медицинских наук, доцент Официальные оппоненты: доктор биологических наук, старший научный сотрудник Дыкман Лев Абрамович доктор медицинских наук, профессор Елисеев Юрий Юрьевич Защита состоится 15 декабря 2011 г. в 12 часов на заседании диссертационного совета Д 220.061.04 при ФГБОУ ВПО «Саратовский государственный аграрный университет им. С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГБОУ ВПО «Саратовский ГАУ им.Отечественная холерная бивалентная химическая вакцина, разработанная в РОСНИПЧИ «Микроб» и содержащая основные протективные антигены Vibrio cholerae О1 классического биовара: холероген-анатоксин, а также О1 антиген сероваров Инаба и Огава не уступает по эффективности зарубежным холерным вакцинам (Кутырев и др., 2006; Щуковская и др., 2009). Таким образом, проведение исследований по разработке и конструированию экспериментального образца ферментера пригодного для глубинного управляемого, стандартизированного культивирования производственных штаммов холерного вибриона в производстве вакцины холерной бивалентной химической таблетированной является актуальной научно-практической и прикладной задачей. В 90-х годах была показана принципиальная возможность концентрирования и очистки О-антигена (О-АГ) холерного вибриона с использованием ультрафильтрации на полых волокнах (Громова и др., 1999), что позволило разработать масштабируемую технологию концентрирования одного из компонентов холерной химической таблетированной вакцины - О-АГ холерного вибриона штамма М41 серовара Огава с использованием ультрафильтрационных модулей на полых волокнах (Дятлов и др., 2001; Нижегородцев, 2003). Изучить свойства препаратов протективных антигенов холерного вибриона полученных с помощью разработанного ферментационного оборудования и по экспериментальной технологии. Впервые обоснована и разработана экспериментальная технология концентрирования протективных антигенов холерного вибриона тангенциальной ультрафильтрацией; установлено, что наиболее целесообразно проведение технологического процесса концентрирования О-АГ и ХА V. cholerae 569В серовара Инаба с использованием ультрафильтрационных мембран с НОММ, равной 50 КДА.Выращивание V. cholerae штамм М-41 серовара Огава и V. cholerae штамм 569 В серовара Инаба с целью получения протективных антигенов проводили на разработанном биореакторе и реакторе-ферментере марки Р170, установленных на аппаратурно-технологической линии производства холерной химической вакцины. система обеззараживания воздуха, выходящего из биореактора, должна иметь конденсор из нержавеющей стали и стерилизуемый паром фильтр с порогом отсечения 0,2 мкм на выходе воздуха в фильтродержателе из нержавеющей стали с комплектом необходимой арматуры и труб для процесса стерилизации; Для реализации требований биологической безопасности и обоснованных нами критериев были сконструированы и изготовлены следующие системы: аэрации, обеспечивающая подачу стерильного воздуха в культуральную среду; обеззараживания воздуха, выходящего из биореактора; подачи корригирующих растворов; пеногашения; контроля физико-химических параметров процесса культивирования; перемешивания; автоматического управления температурой, необходимой для культивирования холерных вибрионов. Процесс культивирования обеспечивают следующие, подключенные посредством трубопроводов через запорно-регулирующую арматуру сильфонного типа к штуцерам культурального сосуда системы: система подачи воздуха 11 содержащая стерилизуемые паром фильтры из нержавеющей стали предварительной и стерильной очистки (порог отсечения примесей 0,2 мкм) воздуха 12, расходомер 13; система очистки отработанного воздуха 14 содержащая конденсатосборник из нержавеющей стали 15, группу теплообменников 16, каскад стерилизуемых паром фильтров тонкой очистки из нержавеющей стали 17 (порог отсечения примесей 0,2 мкм), вакуумный насос 18; система подачи корригирующих растворов 19, включающая емкости 20 для содержания корригирующих растворов, оборудованные дыхательными фильтрами 21, перистальтические насосы 22; система контроля физико-химических параметров среды и культивирования 23 содержит, измерительную кювету 24, с размещенными в ней датчиками РН, РО2, кювету оптической плотности 25 и воздухоотделитель, насос с магнитным приводом 26; патрубок с сильфонным вентилем и гибким шлангом на конце, предназначенный для приема-выдачи среды, взятия проб, наполнения-опорожнения корпуса во время мойки; термостатирующую систему 27 включающую емкость с термонагревательными элементами 28, датчиками контроля уровня и температуры 29 и циркуляционный насос 30.