Сравнение темновых и фотогемолитических эффектов производных ДП (дейтеро-порфирина), определение прочности связывания данных соединений с мембраной эритроцита. Определение влияния фотопродуктов протопорфирина IX на Т-клеточный иммунный ответ in vivo.
Аннотация к работе
«Скрининг гемолитической и иммуносупрессорной активности фотосенсибилизаторов порфиринового ряда» 03.00.02 - биофизика кандидата биологических наук Работа выполнена в Государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Российский государственный медицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию». Научный консультант: Доктор биологических наук, профессор Потапенко А.Я. Защита состоится «19» февраля 2007 г. в 14.00 часов на заседании диссертационного совета К 208.072.05 при Российском государственном медицинском университете, по адресу:117997, г.Глубина супрессии определялась дозой облучения ППІХ .Впервые обнаружено, что супрессорный эффект предоблученного ППІХ обусловлен действием его фотопродуктов ФПП1 и ФПП2 в количестве 2,5 нг/кг веса животных. Чаще всего, гемолиз, вызываемый ФС, развивается по коллоидно-осмотическому механизму и зависимость скорости гемолиза V от дозы облучения D может быть описана уравнением вида: V=V0 ADB, где V0 - скорость темнового гемолиза, D - доза облучения, a - коэффициент, характеризующий фотогемолитическую эффективность красителя, b - показатель степени при дозе облучения. 1 приведены кривая гемолиза (А) и дозовая зависимость скорости гемолиза (Б), сенсибилизированного производным ДП5. Производное ДП4 с оксогруппой в боковом заместителе имеет большую фотогемолитическую эффективность по сравнению с производным ДП5, имеющим ОН-группу в том же положении и производным ДП3 с двумя оксогруппами. При расчете доли ФС, прочно связанного с мембраной эритроцита, были использованы выражение для интенсивности света, поглощенного связанным красителем в присутствии экранирующей примеси [Владимиров, Потапенко, 2006],квадратичные зависимости скорости гемолиза от дозы облучения и концентрации ФС [Pooler, 1985; Grossweiner, 1999].Все исследованные производные ДП увеличивают скорость темнового гемолиза не более чем в 7,3 раза, по сравнению со скоростью спонтанного гемолиза эритроцитов. Важную роль играет структура самих заместителей: производное ДП4 с оксогруппой в боковом заместителе имеет большую фотогемолитическую эффективность по сравнению с производным ДП5, имеющим ОН-группу в том же положении и производным ДП3 с двумя оксогруппами. Разработана методика оценки прочности связывания ФС с мембранами эритроцитов, основанная на сравнении скоростей фотосенсибилизированного гемолиза в отмытой и не отмытой от ФС суспензиях эритроцитов. Значения коэффициента прочности связывания с мембраной (?), определенные для ДП5 и ДП2 составили 0,86 и 0,61, соответственно, что коррелирует со значениями их коэффициентов распределения в системе октанол/буфер. Фотогемолитические эффективности фотопротопорфирина 1 (ФПП1) и фотопротопорфирина 2 (ФПП2) превышают фотогемолитическую эффективность ППІХ в 5 и 9 раз, соответственно.