Сравнительный генетический анализ вакцинных штаммов вируса краснухи и современных штаммов и изолятов вируса. Расчет возможных филогенетических изменений вируса краснухи в период вакцинопрофилактики инфекции. Чувствительность ряда диплоидных линий клеток.
Аннотация к работе
Штамм «Орлов - Д» для получения живой аттенуированной вакцины против краснухи Диссертации на соискание ученой степени доктора медицинских наукРабота выполнена в ФГУН «Санкт-Петербургский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии имени Пастера» Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека Научный консультант: Доктор медицинских наук, член-корреспондент РАМН Доктор медицинских наук, профессор, академик РАМН Защита состоится «19» июня 2009 года в 10 часов на заседании диссертационного совета Д 001.026.01 при Институте полиомиелита и вирусных энцефалитов им. С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГУ Института полиомиелита и вирусных энцефалитов им.Оценить чувствительность ряда диплоидных линий клеток к вирусу краснухи и получить вариант исходного вируса краснухи, адаптированный к диплоидной культуре клеток «М-22» (штамм «Орлов-Д»). Впервые проведена сравнительная генетическая характеристика штаммов «Орлов-Д» и Wistar RA27/3 и установлены различия между штаммами в высоко консервативной области белка Е1, отвечающей за поливалентную иммуногенную активность вируса. Практическая значимость: Получение нового аттенуированного штамма для живой вакцины против краснухи и разработка способа получения вакцины на технологичном тканевом субстрате создает реальные предпосылки для получения вакцины против краснухи на основе эндемичного для России штамма вируса, что будет способствовать совершенствованию профилактики краснухи и СВК на территории Российской Федерации. Вакцинный штамм вируса краснухи «Орлов-В» идентифицирован как вирус генотипа 2с, эндемичный для территории РФ, и генетически более близок к циркулирующим на территории России изолятам вируса краснухи, чем вакцинный штамм Wistar RA27/3. Выбор диплоидной линии клеток фибробластов кожно-мышечного лоскута эмбриона человека «М-22» для получения штамма «Орлов-Д» обусловлен чувствительностью указанной культуры клеток к вакцинному штамму вируса краснухи, аналогичной чувствительности клеточной культуры ППК, использованной для аттенуации штамма «Орлов», а также наличием банка посевных клеток «М-22», рекомендованных ГИСК им.Вакцинный штамм вируса краснухи «Орлов-В» идентифицирован как вирус генотипа 2с, эндемичный для территории РФ, и генетически более близок к циркулирующим на территории России изолятам вируса краснухи, чем вакцинный штамм Wistar RA27/3. Report, 2005] был проведен филогенетический анализ 13 изолятов вируса краснухи, идентифицированных на территории Пермского края в период с 1999 по 2005 гг. SLM17Perm-1999, SLM11Perm-2000, SLM13Perm-2000, SLM14Perm-2000, SLM16Perm-2000, SLM12Perm-2003, SLM3Perm-2003, SLM7Perm-2002, SLM8Perm-2002, SLM5Perm-2004, SLM9Perm-2004, SLM6Perm-2005, SLM15Perm-2005, а также упомянутых выше вакцинных штаммов вируса краснухи. По результатам исследования все изоляты вируса краснухи, выделенные на территории Пермского края, а также вакцинный штамм «Орлов-В» и 4 российские штамма, выделенные в период 1967 - 1997 гг., отнесены к генотипу 2с (рис. Эти показатели свидетельствуют о более тесном генетическом родстве современных изолятов вируса, выделенных на территории Западного Урала, российских изолятов более раннего периода выделения с вакцинным штаммов «Орлов-В», чем со штаммом Wistar RA 27/3. Выбор диплоидной линии клеток фибробластов кожно-мышечного лоскута эмбриона человека «М-22» для получения штамма «Орлов-Д» обусловлен чувствительностью указанной культуры клеток к вакцинному штамму вируса краснухи, аналогичной чувствительности клеточной культуры ППК, использованной для аттенуации штамма «Орлов», а также наличием банка посевных клеток «М-22», рекомендованных ГИСК им.Сравнительный филогенетический анализ современных изолятов вируса краснухи, циркулирующих на территории Пермского края, вакцинных штаммов «Орлов-В», Wistar RA27/3 и четырех штаммов вируса краснухи, выделенных на других территориях России в 1967-97 г.г. показал, что российские штаммы относятся к одной генетической группе и идентифицированы как вирусы генотипа 2с; вакцинный штамм Wistar RA27/3 относится к вирусам Rubella 1 генетической линии. Установлено более тесное генетическое родство между российскими изолятами и штаммом «Орлов-В» по отношению к штамму Wistar RA27/3: индекс генетической близости составляет 0,74 и 0,99, соответственно. Массовая иммунизация против краснухи детей 1-2 года жизни, проведенная на территории Пермского края вакциной Rudivax (действующее начало - вакцинный штамм Wistar RA27/3) оказала влияние на биологический фактор эпидемического процесса. Чувствительность диплоидной линии клеток кожно-мышечного лоскута эмбриона человека «М-22» к вакцинному штамму «Орлов-В» соответствует чувствительности первичной культуры клеток ППК, к которой адаптирован указанный штамм. Проведением одного дополнительного пассажа штамма «Орлов-В» в диплоидной линии клеток «М-22» получен аттенуированный штамм вируса краснухи «Орлов-Д».