Особливості функціонування редуктаз мікросом печінки лабораторних щурів, стан субстратного забезпечення мікросомальних редуктаз при стресі, визначення концентрації окислених та відновлених пiридiнових коферментiв в печінці та корекція вікових порушень.
Аннотация к работе
ХАРКІВСЬКИЙ НАЦІОНАЛЬНИЙ УНІВЕРСИТЕТ ІМ. В.Н. АВТОРЕФЕРАТ дисертації на здобуття наукового ступеня кандидата біологічних наук«Редуктазна активність мікросом печінки при стресі у дорослих та старих щурів». Вивчали вікові особливості зміни редуктазної активності мікросом печінки щурів під час імобілізаційного стресу. Встановлено, що імобілізація дорослих тварин не супроводжується суттєвою зміною редуктазної активності мікросом. При імобілізації старих щурів відбувається часткове зниження редуктазної активності мікросом, зменшується відновність пулу НАДФ та вміст НАДН у печінці у порівнянні з його рівнем у дорослих імобілізованих щурів.Беручи до уваги те, що при стресі відбувається стимуляція процесів катаболізму [Селье Г., 1960], що супроводжується посиленням розпаду макромолекул та накопиченням ендогенних токсинів в організмі [Меерсон Ф.З., 1984], це набуває суттєвого значення у віковому зниженні резистентності організму до стресу. Підтвердженням того служать відомості про зміну активності цитохрому Р450 та швидкості його біосинтезу в печінці при стресі [Деев Л.И. и др., 1986; Парамонова Г.И., 1994; Парамонова Г.И. и др., 1996; Чекман И.С. и др., 1996; Ando M. et al., 1997; Konstanidi M. et al, 2000, 2001]. Разом з тим детальне вивчення цього питання відкриває перспективи у пізнанні молекулярних механізмів вікового зниження резистентності до стресу та розробці нових підходів до фармакологічної корекції стійкості організму до стресу при старінні. Встановити особливості функціонування мікросомальних редуктаз на основі оцінки їх активності в реакціях відновлення різних акцепторів електронів (2,6-дихлорфеноліндофенол, нітротетразолієвий синій, феррицианід калію, цитохром с) в печінці у дорослих та старих щурів при імобілізаційному стресі. Охарактеризувати стан субстратного забезпечення мікросомальних редуктаз при стресі у дорослих та старих щурів шляхом визначення концентрації окислених та відновлених піридінових коферментів в печінці.Проведені дослідження показали, що при старінні виникало зниження редуктазної активності мікросом в присутності тих акцепторів електронів, з якими вони проявляють низьку каталітичну активність - 2,6-дихлорфеноліндофенол i нітротетразолієвий синій [Карякин А.В., Арчаков А.И., 1985]. У старих щурів при стресі знижувалася НАДН та НАДФН-залежна редуктазна активність в присутності тих акцепторів електронів, які з більшою швидкістю відновлювалися редуктазами (феррицианід калія, цитохром с), та збільшувалося співвідношення НАДН та НАДФН-залежних редуктазних активностей на користь НАДН-залежної. Це проявляється в частковому зниженні редуктазної активності мікросомальних фракцій в реакціях з акцепторами електронів, які відновлюються повільно, а також в зменшенні прояву регуляторного ефекту на редуктазну активність окремих регуляторів (додецилсульфату натрія, перекису водню). Разом з тим, незважаючи на збереження високої ферментативної НАДФН:2,6-дихлорфеноліндофенол та НАДН:нітротетразолієвий синій редуктазної активності, є підстави припустити, що in situ в печінці старих щурів при стресі все таки відбувається обмеження каталітичних властивостей цих ферментів. Беручи до уваги те, що рівень субстратного забезпечення ферментів може суттєво впливати на активність мікросомальних редуктаз, у досліджених груп тварин було проведено вивчення стану пулу піридінових коферментів в печінці (табл.2).Імобілізаційний стресс супроводжується виникненням залежних від віку особливостей у редуктазній активності мікросом печінки. У старих тварин при стресі відбувається обмеження НАДН-залежної редуктазної активності мікросом печінки при відновленні феррицианіду калію, цитохрому с, а також НАДФН-залежної редуктазної активності при відновленні феррицианіду калію. Формування комплексу подібних зсувів з боку редуктазної активності мікросом сприяє обмеженню швидкості окислювально-відновлювальних процесів у гідроксилазних ланцюгах печінки у старих щурів при стресі. У дорослих тварин імобілізаційний стрес супроводжується зменшенням ефекту додецилсульфату натрія, перекису водню та сечовини на НАДН:2,6-дихлорфеноліндофенол редуктазну активність мікросом. Відмінності у проявленні дії додецилсульфату натрія, перекису водню та сечовини на НАДН:2,6-дихлорфеноліндофенол редуктазну активність мікросом печінки дорослих та старих щурів при імобілізації відображає існування вікових особливостей зміни структури та характеру взаємодії редуктаз з мікросомальними мембранами при стресі.