Разработка и использование адъювантов на основе липосомальных структур и сферических аморфных наночастиц в технологии вакцинных препаратов. Методы контроля технологического процесса и стандартизации готового адъюванта. Требования к вакцинным препаратам.
Аннотация к работе
Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата фармацевтических наук Разработка и использование адъювантов на основе наночастиц в технологии вакцинных препаратовРабота выполнена в государственном бюджетном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Пермская государственная фармацевтическая академия» Министерства здравоохранения Российской Федерации Научный руководитель: доктор биологических наук Николаева Алевтина Максимовна Пермь доктор биологических наук, Раев Михаил Борисович Институт экологии и генетики микроорганизмов Уральского отделения РАН Защита состоится «19 » марта 2013 г. в 13-00 часов на заседании диссертационного совета Д 208.068.01 при ГБОУ ВПО «Пермская государственная фармацевтическая академия» Минздрава Российской Федерации по адресу: 614990, г. С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГБОУ ВПО «Пермская государственная фармацевтическая академия» Минздрава Российской Федерации по адресу: г.Стремление создать вакцины из высокоочищенных антигенов, которые в большинстве случаев обладают слабой иммуногенностью, привело к необходимости применения адъювантов, усиливающих иммунный ответ [Медуницын Н.В., 2010, Дыкман Л.А. с соавт., 2010, Manmohan S., 2007]. На стадиях экспериментальных исследований и клинических испытаний находятся вакцины, направленные на профилактику более 60-ти видов заболеваний. Следует указать, что использование адъювантов имеет и экономическую целесообразность, так как вакцины с адъювантами требуют минимального расхода антигена [S.L. Учитывая перспективность применения САНЧ в качестве носителя антигенных препаратов, представлялось целесообразным для использования в вакцинных композициях разработать технологию, обеспечивающую получение адъюванта на основе САНЧ, соответствующего требованиям, предъявляемых к препаратам для парентерального введения. Впервые по разработанной технологии получены липосомальные формы вакцинных препаратов: лиофилизированный дифтерийно-столбнячный анатоксин и жидкая вакцина против гепатита В, отвечающие требованиям к препаратам, вводимым парентерально, по показателям безопасности и эффективности.Иммуногенную активность компонентов ЛДС-М вакцины по показателю выживаемости устанавливали по резистентности иммунизированных морских свинок (масса 300±50 г) к дифтерийному тест-токсину и по резистентности иммунизированных белых мышей (масса 17±1 г) к столбнячному тест-токсину. Иммуногенную активность липосомальных вакцин и вакцин на основе САНЧ по индуцированию специфических антител определяли в опытах на морских свинках и белых мышах. Третья глава посвящена разработке технологии получения липосомальных композиций, отвечающих требованиям к вакцинным препаратам по показателям стерильности, пирогенности, токсичности на модели дифтерийного, столбнячного анатоксинов и поверхностного антигена вируса гепатита В. Первоначально в исследованиях при оценке качества лецитина - исходного сырья для конструирования липосомальных вакцин, по показателю пирогенности и индекса окисления, который характеризует стабильность липидных мембран, нами было показано, что липидная субстанция по показателю пирогенности соответствует фармакопейным требованиям к парентеральным препаратам и по индексу окисления (0,160±0,003) соответствует нормам, предъявляемым к фосфолипидам при получении липосомальных лекарственных форм. липосомальный аморфный наночастица вакцинный Поэтому при отработке способа получения ЛДС-М вакцины за основу был выбран метод дегидратации/регидратации.С использованием метода дегидратации/регидратации и последующей ультразвуковой обработки разработана технология получения лиофилизированной комбинированной липосомальной вакцины против дифтерии и столбняка и жидкой липосомальной моновакцины против гепатита В со средним размером частиц 120-170 нм и эффективностью включения антигенов не менее 75 %. Липосомальные вакцины, полученные по разработанной технологии, по показателям специфической активности, пирогенности, стерильности, токсичности полностью отвечали требованиям, предъявляемым к вакцинным препаратам. Липосомальная дифтерийно-столбнячная вакцина и липосомальная вакцина против гепатита В в опытах на животных проявили иммуногенные свойства, сопоставимые с аналогичными адсорбированными на геле гидроксида алюминия коммерческими вакцинами.