Разработка оптимальных биотехнологических режимов выращивания экспериментально-производственного вакцинного штамма EV НИИЭГ, обеспечивающих повышение его иммуногенности. Создание эффективной антигенной композиции препарата живой чумной вакцины.
Аннотация к работе
АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Разработка биотехнологических аспектов повышения иммуногенности вакцинного штамма Yersinia pestis EV НИИЭГ Работа выполнена в Государственном научном учреждении Саратовский научно-исследовательский ветеринарный институт Российской академии сельскохозяйственных наук Научные руководители: доктор медицинских наук, профессор Федорова Валентина Анатольевна кандидат биологических наук Мотин Владимир ЛеонидовичЭто связывают, как правило, с быстрой адаптацией чумных бактерий к условиям существования вне чувствительного макроорганизма и утрата так называемой «остаточной вирулентности» штамма, непосредственно обеспечивающей его иммуногенность (Салтыкова, Файбич, 1975; Анисимова с соавт., 2002; Промышленный регламент № 01897080-01-04 на производство «Вакцины чумной живой»). Задачи исследования: Разработать оптимальные биотехнологические режимы выращивания in vitro бактерий экспериментально-производственного вакцинного штамма EV НИИЭГ для увеличения выхода микробной биомассы с единицы объема среды и повышения иммуногенности в лабораторных испытаниях (в сравнительных экспериментах с применением регламентированных питательных сред). Выращивание клеток штамма EV НИИЭГ, продуцента ЖЧВ, в биотехнологических режимах с применением регламентированной среды бульон Хоттингера (БХ), дополненной ионами Са2 (2,5 ММ) в сочетании с 0,1% глюкозы или только ионами Са2 (2,5 ММ), обеспечивает больший (в 2,8-3,7 раза) выход биомассы вакцинного штамма EV НИИЭГ, чем при использовании той же среды без указанных ингредиентов. Материалы диссертационной работы были представлены на: Научно-практической конференции «Природно-очаговые ООИ на юге России, их профилактика и лабораторная диагностика», (Астрахань, 2001); Первой региональной конференции молодых ученых «Стратегия взаимодействия микроорганизмов с окружающей средой», (Саратов, 2002); III конференции молодых ученых России с международным участием «Фундаментальные науки и прогресс клинической медицины, (Москва, 2004); Всероссийской научно-практической конференции «Медицинская микробиология - XXI век», (Саратов, 2004); Научно-практической конференции, посвященной 70-летию Противочумного центра «Противочумные учреждения России и их роль в обеспечении эпидемиологического благополучия населения страны», (Москва, 2004); II конференции студентов, молодых ученых и специалистов «Современные проблемы науки и образования», (Хургада, Египет, 2005); VI межгосударственной научно-практической конференции государств-участников СНГ «Санитарная охрана территорий государств-участников Содружества Независимых Государств: проблемы биологической безопасности и противодействия биотерроризму в современных условиях», (Волгоград, 2005); Международном Вакцинном Конгрессе, (Амстердам, Нидерланды, 2007); Германо-Российском форуме по биотехнологии, (Новосибирск, 2009); Международной научно-практической конференции «Современные проблемы инфекционной патологии человека», (Минск, Беларусь, 2009); VI международной конференции «Молекулярная медицина и биобезопасность» в рамках IV Российского медицинского форума, (Москва, 2009); III Всероссийской научно-практической конференции с международным участием «Инфекции, обусловленные иерсиниями», (Санкт-Петербург, 2011). Для накопления биомассы штамма EV НИИЭГ - продуцента ЖЧВ, применяли различные биотехнологические режимы выращивания с использованием бульона Хоттингера (БХ) (РОСНИПЧИ «Микроб», Саратов) или среды RPMI («Институт полиомиелита и вирусных энцефалитов», Москва).Продемонстрирована эффективность использования биотехнологических режимов выращивания экспериментально-производственного штамма Y. pestis EV НИИЭГ с применением БХ, обогащенного ионами кальция и/или глюкозой, и синтетической среды RPMI-1640 с аналогичными добавками и без них для получения клеточного урожая вакцинного штамма EV НИИЭГ значительно (в 3,5-4,2 раза) превышающего таковой при использовании рутинных регламентированных условий культивирования на БХ без добавок. Доказана перспективность использования RPMI-1640 для имитации in vitro условий паразитирования чумного микроба in vivo, что позволяет детально исследовать особенности взаимодействия чумного микроба с макроорганизмом и выявить конкретные антигены, синтезируемые клетками вакцинного (белки с м.м.