Изучение методов разделения пигментов с помощью бумажной хроматографии и определения их концентрации. Характеристика способов получения вытяжки пигментов, спектрофотометрирования, нанесения пигментов на бумагу, эллюции пигментов с бумажного носителя.
Аннотация к работе
Все фотосинтезирующие органы в зеленых растениях и фотосинтезирующих микроорганизмах содержат ксантофиллы В этих органах происходит перенос поглощенной ксантофиллом световой энергии на хлорофилл или подобную ему систему. Каротиноиды - пигменты, которые содержатся в растениях, устойчивых к пониженным температурам. В доказательство того, что каротиноиды присутствуют в листьях постоянно наравне с хлорофиллом, послужит следующий пример: к спиртовой вытяжке хлорофилла прилить бензина 1:1, взболтать смесь и дать отстояться, смесь расслоится. Оранжево-красный цвет растениям дает пигмент каротин, желтую - ксантофилл. Получение вытяжки пигментов - отцентрифугировали культуру водорослей, объемом 150 мл, при 5 тыс/об в минуту, осадок аккуратно перенесли в ступку, добавили немного песка и растворителя (смесь спирта и ацетона 3:1) и тщательно растерли до гомогенизированного состояния.При этом значения содержания пигмента хлорофилла а получилось больше в методе бумажной хроматографии (Ха = 0,225мг/г) в то время как спектрофотометрический метод определил (Fa = 0,18мг/г); значения содержания пигмента хлорофилла в оказались больше при спектрофотометрическом методе(Fв = 1,35мг/г), а при бумажной хроматографии (Хв = 0,05мг/г).
Вывод
В данной работе были использованы 2 метода определения и количественного подсчета пигментов: спектрофотометрический и бумажная хроматография (была использована одномерная хроматограмма). При этом значения содержания пигмента хлорофилла а получилось больше в методе бумажной хроматографии (Ха = 0,225мг/г) в то время как спектрофотометрический метод определил (Fa = 0,18мг/г); значения содержания пигмента хлорофилла в оказались больше при спектрофотометрическом методе(Fв = 1,35мг/г), а при бумажной хроматографии (Хв = 0,05мг/г). Значения по каротиноидам получились меньше при спектрофотометрии (Fkap = -0,34мг/г),при бумажной же хроматографии мы получили (Хкар = 0,06мг/г).Это может быть объяснено тем фактом, что метод бумажной хроматографии более точен.
Также в данной работе был использован колориметрический метод. На основе этого метода был построен график зависимости оптической плотности от концентраций хлорофиллов а, в и каротиноидов.
Список литературы
1.Гудвин Т., Сравнительная биохимия каротиноидов, пер. с английского, М., 1954.
2.Тимирязев К.А., Солнце, жизнь и хлорофилл, Избр. Соч., т.1, М., 1948.