Порушення імунної системи та мікробіоценозу кишечнику у дітей, хворих на ентероколіт та їх корекція пробіотиками - Автореферат

КИЇВСЬКИЙ НАЦІОНАЛЬНИЙ УНІВЕРСИТЕТ імені ТАРАСА ШЕВЧЕНКАРобота виконана в ДУ «Інститут педіатрії, акушерства і гінекології АМН України». Науковий керівник : доктор медичних наук, професор АМН України», завідувач лабораторії нейроімунології. Богомольця МОЗ України, головний науковий співробітник лабораторії імунології; Захист відбудеться "_26___" ___січня__________2010 р. о ____16 00___годині на засіданні спеціалізованої вченої ради Д 26.001.14 Київського національного університета імені Тараса Шевченка за адресою: м.В останні роки зявилося багато публікацій, що свідчать про наявність паралелей між порушеннями мікробіоценозу кишечнику і дисбалансом імунної системи, які можуть бути однією з ведучих причин, що визначають сучасні особливості перебігу ентероколіту у дітей раннього віку [Kimoto H. et al., 2004; Воєводин Д.А. та інш., 2005; Macpherson Особливо значні зміни відбуваються в імунній системі слизових оболонок кишечнику, в так званій мукозній імунній системі (MALT - mucosa associated lymphoid tissue), яка відіграє провідну роль у функціонуванні місцевого імунітету як в нормі, так і патології слизових оболонок [Wiedermann U., 2005; Чернушенко Е.Ф., 2007]. Для розвитку та становлення цієї системи, після народження дитини важливе значення має нормальна мікрофлора кишечнику, яка є джерелом непатогенних антигенів (антигенним стимулом), які стимулюють формування імунної системи слизових оболонок, розвиток імунних реакцій. Дослідити відновлення показників стану імунітету у хворих дітей та ефективність застосування пробіотичних препаратів в залежності від урахування індивідуальної чутливості умовно-патогенної мікрофлори кишечнику до пробіотиків, та розробити методику визначення індивідуальної чутливості умовно-патогенних мікроорганізмів, виділених з кишечнику дітей, хворих на ентероколіт до пробіотичних препаратів. Предмет дослідження - показники системного та місцевого імунітету, порушення мікробіоценозу кишечнику та їх динаміка в ході лікування пробіотиками, зміни в показниках імунної системи та біоценозу кишечнику в залежності від активності інгібуючого впливу копрофільтратів на ріст нормальної мікрофлори, що входить до складу пробіотиків.Для досягнення мети та розвязання завдань, поставлених в роботі, проведено імунологічне та мікробіологічне обстеження 118 дітей, хворих на ентероколіт, які знаходились на стаціонарному лікуванні у відділенні проблем харчування та соматичних захворювань дітей раннього віку ДУ «Інституту педіатрії, акушерства і гінекології АМН України», та у інфекційному відділенні дитячої клінічної лікарні №1 (м. Діти, хворі на ентероколіт одержували базисний комплекс терапії, що включав застосування кишкових антисептиків широкого спектру дії, антибіотиків, фаготерапію, ферментотерапію та пробіотикотерапію. 60-ти дітям, хворим на ентероколіт пробіотичні препарати призначались без урахування індивідуальної чутливості умовно-патогенної мікрофлори до пробіотиків. 58-ми дітям пробіотичні препарати призначались після визначення індивідуальної чутливості умовно-патогенної мікрофлори кишечника до цих препаратів. Ступінь порушень біоценозу кишечнику у дітей оцінювали згідно методичним рекомендаціям «Диагностика и лечение дисбактериозов кишечника» Москва 1991год, «Дисбактериоз кишечника» Москва, 1998, Бережний В.В.Імунний статус у дітей хворих на ентероколіт характеризується лімфопенією, дисбалансом Т - хелперів та Т - цитотоксичних лімфоцитів, зменшенням рівня CD25 лімфоцитів, а також високим вмістом CD95 лімфоцитів, що свідчить про їх високу апоптичну готовність, та вказує на розвиток селективної імунної недостатності в організмі при ентероколіті. У дітей, що хворіють на ентероколіт спостерігаються суттєві порушення в мукозальному гуморальному імунітеті кишечнику, а саме в системі секреторного IGA, рівень якого в копрофільтратах хворих вірогідно нижче (на фоні високого рівня IGG і особливо IGM) в порівнянні із здоровими дітьми. У дітей з ентероколітом концентрація SIGA в копрофільтратах знижується відповідно ступеня порушень мікроекології кишечнику: у дітей з ІІІ ступенем важкості, рівень даного імуноглобуліну вірогідно нижче, ніж у дітей з ІІ ступенем важкості дисбіозу кишечнику, а концентрація IGM та IGG підвищується паралельно зі зростанням мікробного навантаження в кишечнику. У дітей, хворих на ентероколіт в залежності від ступеня дисбіотичних порушень виявляється збільшення концентрації про - та протизапальних цитокінів, серед яких найбільш суттєво підвищується вміст IL-6 та IL-8. Урахування індивідуальної чутливості також позитивно впливає на показники мікробіоценозу кишечнику, що проявляється у зниженні показників обсіменіння кишечнику умовно - патогенними ентеробактеріями, стафілококами та грибами роду Candida у 75,8 % хворих, а також у підвищенні рівня заселення кишечнику представниками нормальної мікрофлори.

ОСНОВНИЙ ЗМІСТ РОБОТИ

1. Імунний статус у дітей хворих на ентероколіт характеризується лімфопенією, дисбалансом Т - хелперів та Т - цитотоксичних лімфоцитів, зменшенням рівня CD25 лімфоцитів, а також високим вмістом CD95 лімфоцитів, що свідчить про їх високу апоптичну готовність, та вказує на розвиток селективної імунної недостатності в організмі при ентероколіті.

2. У дітей, що хворіють на ентероколіт спостерігаються суттєві порушення в мукозальному гуморальному імунітеті кишечнику, а саме в системі секреторного IGA, рівень якого в копрофільтратах хворих вірогідно нижче (на фоні високого рівня IGG і особливо IGM) в порівнянні із здоровими дітьми.

3.. Встановлена залежність змін місцевого гуморального імунітету від ступеня дисбіотичних порушень. У дітей з ентероколітом концентрація SIGA в копрофільтратах знижується відповідно ступеня порушень мікроекології кишечнику: у дітей з ІІІ ступенем важкості, рівень даного імуноглобуліну вірогідно нижче, ніж у дітей з ІІ ступенем важкості дисбіозу кишечнику, а концентрація IGM та IGG підвищується паралельно зі зростанням мікробного навантаження в кишечнику.

4. У дітей, хворих на ентероколіт в залежності від ступеня дисбіотичних порушень виявляється збільшення концентрації про - та протизапальних цитокінів, серед яких найбільш суттєво підвищується вміст IL-6 та IL-8.

5. Призначення пробіотикотерапії сприяє відновленню Т - клітинної ланки імунітету, що проявляється у збільшенні в крові рівня CD3 та CD4 та зниженні концентрації CD8 лімфоцитів та лімфоцитів, які експресують FAS рецептор апоптозу, а також нормалізації фагоцитарної активності нейтрофілів.

6. Встановлено вірогідне підвищення рівня IGA в сироватці крові та секреторного IGA в копрофільтратах у дітей після пробіотикотерапії, що свідчить про позитивний вплив лікування.

7. Застосування пробіотиків з урахуванням індивідуальної чутливості умовно-патогенної мікрофлори до пробіотичних препаратів дає більш ефективний коригуючий вплив на показники місцевого імунітету, а саме на рівень окремих імуноглобулінів. Урахування індивідуальної чутливості також позитивно впливає на показники мікробіоценозу кишечнику, що проявляється у зниженні показників обсіменіння кишечнику умовно - патогенними ентеробактеріями, стафілококами та грибами роду Candida у 75,8 % хворих, а також у підвищенні рівня заселення кишечнику представниками нормальної мікрофлори.

8. Для більш повного відновлення системних, місцевих імунних показників та мікробіоценозу кишечнику у дітей, хворих на ентероколіт доцільно проводити визначення індивідуальної чутливості умовно-патогенної мікрофлори до пробіотиків, а також вивчення чутливості пробіотичних препаратів до дії копрофільтратів.

ПРАКТИЧНІ РЕКОМЕНДАЦІЇ

1. Для впровадження в клінічну практику рекомендується в якості критеріїв прогнозування перебігу ентероколіту використовувати показники комплексного імунологічного та бактеріологічного обстеження хворих, зокрема співставлення ступеня дисбіозу кишечнику з показниками змін субпопуляційного складу лімфоцитів.

2. Доцільно включати в комплексну терапію ентероколітів пробіотичні препарати, дія яких спрямована не тільки на корекцію змін мікроекології кишечнику, а і на показники місцевого та системного імунітету.

3. Визначення чутливості умовно-патогенних мікроорганізмів кишечнику дітей до пробіотиків дозволяє індивідуально підібрати той чи інший лікарський засіб, який найбільше пригнічує умовно - патогенну мікрофлору даного хворого і, тим самим, підвищити ефективність лікування та скоротити його тривалість.

4. Визначення інгібуючих властивостей копрофільтратів по відношенню до представників нормальної мікрофлори, що входять до складу пробіотиків, дозволяє індивідуалізовано підібрати пробіотичний препарат, який дозволить зберегти життєдіяльність нормальної мікрофлори пробіотиків в кишечнику та реалізувати її корисні властивості.

1. Пономарева И.Г. Частота высеваемости энтерококков из кишечника новорожденных и детей раннего возраста / И.Г Пономарева, Е.М Лукьянова., Ю.Г. Антипкин, Т.А. Лисяная, С.Ю. Крищук // Журнал «Здоровье женщины». - 2005. - № 3 (23) .- С. 172-174.

2. Пономарева И.Г. Лактувит: опыт применения при функциональных запорах у детей раннего возраста / О.Г. Шадрин, С.В Дюкарева., В.К. Тищенко, Пономарева И.Г. // Мистецтво лікування. - 2005.- № 10 (26).- С. 88-89.

3. Пономарьова І.Г. Дисбіоз кишечнику та його корекція при гастроентерологічних захворюваннях дітей раннього віку / О.Г. Шадрін, О.М. Муквіч, Т.О. Лісяна, І.Г. Пономарьова // Роль пробіотиків в охороні здоровя матері та дитини: [зб. наук, праць / наук. ред. акад. НАН та АМН України, проф. О.М. Лукянова]. - Київ, 2006. - С. 37-42.

4. Пономарьова І.Г. Вплив мультипробіотика «Апібакт» на показники місцевого імунітету у дітей з ентероколітами / І.Г. Пономарьова // Матеріали науково - практичної конференції з імунології та алергології .- Квітень 2006 року. - Київ. - Імунологія та алергологія. - 2006.-№ 2 .- С.116.

5. Пономарьова І.Г. Вплив пробіотика «Апібакт» на мікроекологію кишечнику дітей раннього віку з ентероколітом / І.Г.Пономарьова, С.Ю. Крищук, О.І.Матяшова // Науково - практична конференція з пошуку та розробки нових профілактичних і лікувальних протимікробних засобів, антисептиків, дезінфектантів та пробіотиків. - 20 - 21 листопада 2006 року. - Харків. - Аннали Мечниковского института. - 2006. - С. 152-153.

6. Пономарьова І.Г. Особливості показників імунореактивності та бактеріального обсіменіння кишечника у дітей з ентероколітом / Т.О. Лісяна, І.Г. Пономарьова // Науково-практична конференція «Актуальные вопросы клинической и лабораторной иммунологии, аллерглогии и иммунореабилитации». - 25-26 квітня 2007 року. - Київ. - Імунологія та алергологія . - 2007.-№ 2.- С. 97.

7. Пономарьова І.Г. Стан мікробіоценозу кишечника, ротоглотки та ротової порожнини у дітей раннього віку з ентероколітом / Т.О. Лісяна, І.Г. Пономарьова, О.А Ковальчук // Сучасна гастроентерологія. - 2007.- № 3. - С. 26-31.

8. Пат. №22556 UA МПК (2006) G01N 33/483 A61K 35/74 (2007.01) Спосіб визначення індивідуальної чутливості умовно-патогенних мікроорганізмів до пробіотичних препаратів методом дифузії в агар /Лісяна Т.О., Лісяний М.І., Пономарьова І.Г.; заявник та патентовласник Інститут педіатрії, акушерства і гінекології АМН України.-№ u 2006 12533; заявл. 28.11.06; опубл. 25.04.07. Бюл. №5.

9. Пат.№22557 UA,МПК (2006) G01N 33/483 A61K 35/74 (2007.01) Спосіб визначення інгібуючої активності копрофільтратів по відношенню до представників нормальної мікрофлори, що входять до складу пробіотиків / Лісяна Т.О., Лісяний М.І., Пономарьова І.Г.; заявник та патентовласник Інститут педіатрії, акушерства і гінекології АМН України.-№ u 2006 12535; заявл. 28.11.06; опубл. 25.04.07 Бюл. № 5.

10. Пат. №80 934 UA , МПК (2006) С12Q 1/02 C12Q 1/18 G01N 33/59. Спосіб визначення індивідуальної чутливості умовно - патогенних мікроорганізмів до пробіотичного препарату / Лісяна Т.О., Лісяний М.І., Пономарьова І.Г.; заявник та патентовласник Інститут педіатрії, акушерства і гінекології АМН України.-№ а 2006 12536;заявл.28.11.06; опубл. 12.11.07. Бюл. № 18.

11. Пат. №80 933 UA , МПК (2006) С12Q 1/02 C12Q 1/18 G01N 33/53. Спосіб визначення інгібуючої активності копрофільтратів по відношенню до представників нормальної мікрофлори, що входить до складу пробіотиків / Лісяна Т.О., Лісяний М.І., Пономарьова І.Г.; заявник та патентовласник Інститут педіатрії, акушерства і гінекології АМН України.-№ а 2006 12534; заявл. 28.11.06; опубл. 12.11.07. Бюл. № 18.

12. Пономарьова І.Г.Стан показників системного імунітету у дітей раннього віку з ентероколітом в залежності від інгібуючого впливу копрофільтратів на ріст нормальної мікрофлори / І.Г. Пономарьова, Т.О. Лісяна // ІІ національний конгрес з імунології, алергології та імунореабілітації на тему «Сучасні досягнення клінічної імунології та алергології».- 19-23 жовтня 2007 року. - Миргород. - Імунологія та алергологія. - 2007. - № 3. - С. 123-124.

13. Пономарьова І.Г. Стан системного та місцевого імунітету та показники біоценозу кишечника у дітей, хворих на ентероколіт після курсу пробіотикотерапії / І.Г. Пономарьова // Імунологія та алергологія. - 2009. - № 1. - С. 96-100.