Изучение метода получения моноклональных антител путем слияния клеток мышиной миеломы с В-лимфоцитами. Основные среды, употребляемые при получении гибридов. Приготовление отдельных компонентов сред для культивирования. Процесс клонирования гибридом.
Аннотация к работе
В основе такой способности лежит наличие большого разнообразия клонов лимфоцитов, каждый из которых вырабатывает антитела одного типа с узкой специфичностью. Открытие в 1975 году Д. Келером и С. Мильштейном способа получения моноклональных антител решило эту задачу. Основу иммунологической реактивности организма составляет сложный комплекс иммунологических реакций, осуществляющий развитие клеточного и гуморального иммунитета. В 1970 голу появились первые сообщения о получении мышиных гибридом путем слияния миеломных клеток, вырабатывающих различные типы нормальных и вариантных молекул иммуноглобулинов. Процесс получения моноклональных антител был изобретен в 1975 году Жоржем Келером и Сезаром Мильштейном, за что в 1984 году они получили Нобелевскую премию по физиологии. Среды для культивирования 2.1 Описание основных сред для культивирования Основными средами, употребляемыми при получении гибридом, являются среда RPMI 1640 и среда Игла в модификации Дульбекко. Аминокислотный и витаминный состав среды Игла в модификации Дульбекко[3] Компонент Содержание в питательной среде, мг/л Компонент Содержание в питательной среде, мг/л Аминокислоты L-триптофан 16,0 L-аргинин-HCl 84,0 L-тирозин 72,0 L-цистин 48,0 L-валин 94,0 L-глютамин 584,0 Витамины L-глицин 30,0 L-гистидин-HCl•H2O 42,0 D-Ca-пантотенат 4,0 L-изолейцин 105,0 Холинхлорид 4,0 L-лейцин 105,0 Фолиевая кислота 4,0 L-лизин-HCl 146,0 i-инозитол 7,2 L-метионин 30,0 Никотинамид 4,0 L-фенилаланин 66,0 Пиридоксаль-HCl 4,0 L-серин 42,0 Рибофлавин 0,4 L-треонин 95,0 Тиамин-HCl 4,0 Среда RPMI 1640. Агентом, ускоряющим слияние клеток, является полиэтиленгликоль (ПЭГ).