Патогенетические подходы к диагностике и лечению колоректального рака - Автореферат

Ежегодно в мире регистрируют примерно 600000 новых случаев колоректального рака (КРР) [Cancer Research, 2005], около 300000 человек умирают от этого заболевания [Cai G. et al., 2006]. Результаты международных (ICG-HNPCC) и национальных (Швеция, Финляндия, Италия, Франция) программ скрининга заболеваемости 1958-2005 гг. показали, что причиной инициации процесса канцерогенеза является взаимодействие генетически детерминированной индивидуальной реактивности организма с этиологическими факторами, к которым относятся особенности питания, малоподвижный образ жизни, сопутствующая соматическая патология (сахарный диабет, ожирение), вредные привычки (табакокурение), воспалительные заболевания кишечника, дивертикулярная болезнь толстой кишки. Обосновать включение в схему лекарственной терапии колоректального рака оценку резистентности к лекарственным препаратам опухолевых клеток с учетом их фенотипической и генотипической вариабельности. Оптимизация схем диагностики и комбинированного лечения колоректального рака позволяет индивидуализировать лечение с учетом патогенетических механизмов развития этой патологии, что будет способствовать изменению структуры первичной заболеваемости КРР, повысит эффективность лечения, снизит уровни нетрудоспособности, инвалидизации и смертности. Фоновые заболевания кишечника (полипы, дивертикулярная болезнь, воспалительные заболевания кишечника), пищевые предпочтения, длительное воздействие комплекса химических соединений производственной среды определяют уровень заболеваемости колоректальным раком в Пермском регионе.При наших исследованиях установлено, что предпочтение жирной пище среди больных 1-й группы отдавали 64 человека (94.1%), а среди больных 2 - группы предпочтение отдано пище богатой растительной клетчаткой - 40 человек (100%). Время поступление в стационар от появления первых жалоб у большинства больных с КРР составляло 6 - 7 месяцев: через 2 месяца у 10 пациентов (14.7%), 4 месяца - 20 (29.4%), 6 месяцев - 30 (44.1%), 7 месяцев - 8 (11.8%). колоректальный рак комбинированное лечение Биохимическое исследование крови выявило повышенный уровень желчных кислот в 2.9 раза чаще в сыворотке крови больных 1-й группы, чем у больных 2-й группы (соответственно 44.1% и 15%). Выявлены у 50% больных 1-й группы резко положительная и у 10% больных 2-й группы слабоположительная реакции. Исследование на протяжении 5 лет динамики содержания онкомаркеров РЭА, СА 19-9 и АФП в сыворотке крови 64 больных КРР свидетельствует о снижении их уровня до нормы через 24 месяца после окончания лечения 40 (62.5%) больных в стационаре, что свидетельствует об отсутствии метастазов и рецидивов заболевания.Полипы - 57.1%, дивертикулярная болезнь толстой кишки - 19.6%, комбинированный геморрой - 17%, язвенный колит - 2.6%, энтероколит, синдром раздраженной кишки, полипоз по - 1.9% во взаимодействии с выявленным при помощи анкетирования предпочтением пищи богатой нерафинированными жирами являются факторами, которые обуславливали развитие колоректального рака у 26.5% респодентов с наследственной предрасположенностью к онкологическим заболеваниям желудочно-кишечного тракта или органов малого таза, а также у 36.8% респондентов со стажем работы более тридцати лет в нефтеперерабатывающей, металлургической и химической промышленности. Выявленные при помощи ПЦР-RT анализа мутантный ген HMSH2 в клетках 2 больных с низко - и 2 больных с умереннодифференцированной, а также мутантный ген HMSH6 в клетках 3 больных с умереннодифференцированной аденокарциномами, определяют генетическую предрасположенность к развитию колоректального рака. Индивидуальная реактивность по результатам исследований первичных культур опухолевых клеток, которая характеризуется высокой геномной (15.7±0.9% анеуплоидных клеток) и хромосомной (11.2±0.04 клеток с хромосомными аберрациями) нестабильностями, является основанием для подбора эффективных схем воздействия противоопухолевыми препаратами на резистентные к 5-фторурацилу в комбинации с лейковорином клетки, мутантные по генам HMSH2 и HMSH6.

Клинико-эпидемиологическая характеристика больных, основные факторы риска развития колоректального рака в пермском регионе.

Заболеваемость колоректальным раком. Уровень заболеваемости КРР на 100000 населения Пермского региона за 8 лет (1999-2006 гг.) составил 18.2±0.2, что статистически значимо выше, чем в среднем по России ? 15.5±0.5, р<0.05. Заболеваемость раком ободочной кишки на 100000 населения составила 18.4±0.3, прямой кишки ? 18.1±0.3. Среди населения сельских районов по сравнению с жителями городов установлены следующие закономерности: заболеваемость раком ободочной кишки ниже, (13.2±0.3% и 21.1±0.5%, р<0.05), а раком прямой кишки выше (24.6±0.6% и 17.8±1.0%, р<0.05); выше количество случаев диагностики поздних стадий (III и IV стадий) рака ободочной и прямой кишки (соответственно 53.3±5.3%, 87.3±1.4% и 33.7±0.2% и 61.4±0.8% р<0.05).

Анализ анкетных и анамнестических данных. На этапе клинических исследований проведено анкетирование 108 пациентов: с КРР - 68 (1-я - группа), 40 - с доброкачественными образованиями толстой кишки (2-я группа). Выявлено, что развитие злокачественных заболеваний статистически значимо не зависело от географического места проживания в Пермском регионе: на юге - 17 (25%), на севере - 15 (22%), на западе - 8 (12%), на востоке - 8 (12%), в г. Перми - 20 (29%).

Среди факторов риска развития злокачественных заболеваний имеет значение продолжительность трудовой деятельности на производстве с вредными условиями труда. Количество больных со стажем более тридцати лет в отраслях промышленности с неблагоприятными условиями производства больше среди больных с КРР (25 - 36.8%), чем с доброкачественными образованиями (4 - 10%). Распределение больных по отраслям представлено на рисунке 1.

Рис.1. Количество больных колоректальным раком, имеющих стаж работы более тридцати лет в различных отраслях производства.

Высокую заболеваемость КРР в экономически развитых странах связывают с большим потреблением жиров и с меньшим потреблением клетчатки (Секачева М.И., 2006), поскольку пища, богатая жиром, в 2 раза увеличивает секрецию желчных кислот и в 11 раз повышает их содержание в толстой кишке. При наших исследованиях установлено, что предпочтение жирной пище среди больных 1-й группы отдавали 64 человека (94.1%), а среди больных 2 - группы предпочтение отдано пище богатой растительной клетчаткой - 40 человек (100%).

Предшествующие фоновые заболевания имели 35 человек (51.5%) только 1-й группы (рис.2), причем чаще полипы - 20 (57.1%).

Рис.2. Фоновые заболевания толстой кишки больных колоректальным раком.

Отягощенную наследственность (злокачественные опухоли желудочно-кишечного тракта или органов малого таза) отметили 18 человек (26.5%) только из 1-й группы.

Результаты обследования больных. Жалобы предъявляли только больные КРР. Наиболее частыми были отсутствие аппетита (58.8%), снижение массы тела (47.1%), запор (41.3%), кровянистые выделения (41.1%), реже - боли в животе (35.3%), ложные позывы, тенезмы (29.4%), слизистые выделения (23.5%), запоры, сменяющиеся поносами (20.6%). Время поступление в стационар от появления первых жалоб у большинства больных с КРР составляло 6 - 7 месяцев: через 2 месяца у 10 пациентов (14.7%), 4 месяца - 20 (29.4%), 6 месяцев - 30 (44.1%), 7 месяцев - 8 (11.8%). колоректальный рак комбинированное лечение

Анализ симптомов у больных КРР позволил определить предполагаемый отдел или сегмент поражения толстого кишечника, выбрать лабораторно-инструментальный алгоритм дальнейшего исследования.

Результаты лабораторных исследований. Общеклиническое исследование крови показало, что больные 1-ой группы имели токсико-анемический (41.1%) синдром, повышенное СОЭ (63.2%), гипохромную и гипорегенераторную анемии (41.1%), лейкоцитоз, изменение лейкоцитарной формулы со сдвигом влево (41.1%), лимфопению (38.2%), эхиноцитоз, анизоцитоз и пойкилоцитоз эритроцитов (соответственно 35.3%, 29.4%, 29.4%). Патологические сдвиги показателей эритроцитарного ростка костного мозга вызваны влиянием продуктов метаболизма клеток опухоли на регулирующие системы организма. Повышение СОЭ выявлено у 2 пациентов (5%) 2-ой группы.

Биохимическое исследование крови выявило повышенный уровень желчных кислот в 2.9 раза чаще в сыворотке крови больных 1-й группы, чем у больных 2-й группы (соответственно 44.1% и 15%). Гипопротеинемия наблюдалась у 58.8% больных КРР.

Исследование системы гемостаза показало развитие гиперкоагуляционного синдрома с продуктами деградации фибриногена на фоне отсутствия тромбозов у 35.3% больных.

Исследование кала на скрытую кровь. Выявлены у 50% больных 1-й группы резко положительная и у 10% больных 2-й группы слабоположительная реакции. По нашим исследованиям ценность этого скринингового метода составляет 31.5%, что соответствует литературным данным [Назаренко Г.И. и др., 2000].

Онкомаркеры СА 19-9 (12.7±0.09 МЕ/мл) и РЭА (5.2±0.4 нг/мл) в сыворотке крови 64 (94.1%) больных 1-й группы до операции превышали нормальное содержание (РЭА - 0-2.5 нг/мл, АФП - 0-13.0 нг/мл, СА 19-9 - 0-30.0 МЕ/мл). Повышение содержания ?-фетопротеина до 24.8 нг/мл обнаружено в сыворотке крови 5-и (7.4%) больных, что свидетельствует о низкой информативности этого онкомаркера в диагностике первичной опухоли толстого кишечника. Содержание онкомаркеров в пределах физиологической нормы выявлено во 2-й группе больных.

Инструментальные исследования. Методы по уровню информативности результатов исследования располагаются в следующей последовательности: колоноскопия - в 58.3%, ирригоскопия - в 51.9%, сигмоскопия - 35.3% и ректороманоскопия - в 35.3%.

Лечение. После установления клинического диагноза пациентам с новообразованиями толстого кишечника выполнялись хирургические вмешательства: при КРР - различные варианты резекций толстой кишки с формированием плоской забрюшинной колостомы, при полипах - эндоскопическая эксцизия. Больным с аденокарциномой проводилось химиотерапевтическое лечение из пяти курсов в режиме Мейо (5-фторурацил - 425 мг/м2 и лейковорин - 20 мг/м2 в течение 5-и дней, каждые 4-5 недель). Пациентам с плоскоклеточным раком проводилось химиолучевое лечение: сочетание химиотерапии и дистанционной мегавольтной ?-терапии прямой кишки и клетчатки малого таза (разовая очаговая доза 2-2.5 Гр, суммарная 40-50 Гр).

Оценка отдаленных результатов лечения больных колоректальным раком.

Исследование на протяжении 5 лет динамики содержания онкомаркеров РЭА, СА 19-9 и АФП в сыворотке крови 64 больных КРР свидетельствует о снижении их уровня до нормы через 24 месяца после окончания лечения 40 (62.5%) больных в стационаре, что свидетельствует об отсутствии метастазов и рецидивов заболевания. Сохранение высокой концентрации онкомаркеров в течение периода наблюдения (РЭА - 12.2±0.7, СА19-9 - 49.0±2.4, АФП - 4.6±0.6) выявлено у 28 (43.8%) больных, что подтверждало наличие генерализации онкологического процесса. Возрастание содержания онкомаркеров, изменение их соотношения в течение 6-12 месяцев после лечения 11 (17.2%) больных относили к прогностически неблагоприятным признакам. Рецидивы заболевания возникали в срок от 2-х до 5-и лет, чаще на 4-м году наблюдения. В группе больных, получавших комбинированное лечение, они возникали реже, чем в группе больных, получавших только хирургическое лечение (соответственно 71.4% и 53.6%, р<0.05). Метастазы возникали в срок от 6-ти месяцев до 4-х лет (чаще на 3-м году наблюдения) реже у больных 1б подгруппы, чем у больных 1а подгруппы (соответственно 11.8% и 23.3%, р<0.05). Фактическая пятилетняя выживаемость пациентов после комбинированного лечения составила 76.5% (26 из 34 пациентов живы). Смерть восьми пациентов возникла через 4 года после операции в результате прогрессирования заболевания. Фактическая пятилетняя выживаемость после хирургического лечения составила 63% (19 из 30 пациентов живы). Показатели 5-летней выживаемости у пациентов получавших комбинированное лечение статистически значимо выше, чем у пациентов получавших только хирургическое лечение (р<0.05).

Подходы к лечению больных колоректальным раком.

Патоморфологическая характеристика опухолевых тканей. Результаты изучения гистологических форм опухоли больных КРР и варианты проведенного лечения представлены в таблице 2.

Таблица 2. Вид лечения и гистологическая форма опухоли у больных с колоректальным раком

Гистологические формы опухолей Количество больных, получивших лечение хирургическое комбинированное

I. Аденокарциномы.

Высокодифференцированная - атипичные эпителиальные клетки формируют комплексы и поля. Инфильтраты, некрозы. Полиморфизм клеточного ядра. 4 2

Умереннодифференцированная - диффузный рост. Криброзные структуры, атипичные митозы, ядрышки в клетках. Опухоль прорастает в сосуды. 20 25

Низкодифференцированная - некрозы. Инвазивный рост. Атипичные клетки, митозы. Полиморфизм клеточного ядра. 2 3

Слизистая - элементы слизистого рака. Криброзные и солидные структуры в плотной волокнистой ткани. 2 2

Перстневидно-клеточный рак. Перстневидные клетки и полости со слизью. Инфильтрирующий рост, инвазия в мышечную стенку. Инфильтраты. 2 2

II. Плоскоклеточный рак. 0 4

Всего 30 38

Путем случайной выборки из 68 больных КРР отобран биопсийный материал у 10 больных с аденокорциномами низко - (НД ? 3), умеренно - (УД ? 6), высодифференцированными (ВД ? 1), которым в дальнейшем проводилось комбинированное лечение. Из биопсийного материала получены первичные культуры клеток.

Характеристика первичных культур клеток. В первичных культурах клеток аденокарцином по сравнению с культурами нормальных эпителиальных клеток больше количество анеуплоидных клеток (соответственно от 2.8±0.2% до 15.2±0.2%, SD 0.36 и 1.87, 1.6±0.04%, SD 0.7, p<0.05), клеток с хромосомными аберрациями (соответственно от 5.7±0.9 до 15.1±3.7%, SD 2.4 и 9.8, и 0.2±0.002%, SD 0.007, p<0.05). Выявлено, что статистически не значимы уровни митотического индекса в культурах клеток, полученных из биоптатов аденокарцином и нормальных эпителиальных тканей (соответственно от 25.5±2.0% до 41.7±7.3, SD 4.5 и 17.9 и 22.3±0.3%, SD 0.6).

Изучение количества клеток с хромосомными аберрациями, анеуплоидных, пролиферирующих и колониеобразующих клеток в первичных культурах. Отсутствует корреляционная зависимость уровня клеток с хромосомными аберрациями (2.1±0.01%) и уровня митотического индекса (5.2±0.02%, r=0.2, p>0.05) в первичных культурах клеток ВД аденокарциномы. Корреляционная зависимость уровня клеток с хромосомными аберрациями (2.9±0.1%) и митотического индекса (36.6±0.2%, r=0.5, p<0.05) обнаружена в культурах клеток, полученных из УД аденокарцином. Максимальный коэффициент корреляции между уровнем клеток с хромосомными аберрациями (5.6±0.02%) и митотическим индексом (20.8±0.2%, r=0.9, p<0.05) характерен для культур клеток НД аденокарцином. Основными типами хромосомных аберраций в опухолевых клетках являются дицентрические хромосомы (0.57±0.03%), парные и непарные хроматидные делеции (0.71±0.01%), количество которых в нормальных эпителиальных клетках соответственно 0.01±0.001% и 0.02±0.004% (рис.3 А, Б).

А Б

Рис.3. Хромосомные аберрации в опухолевых клетках.

Стрелкой указаны дицентрик и парные хроматидные делеции (А), непарная хроматидная делеция (Б). Увеличение ?1000.

Рис.4. Количество клеток с хромосомными аберрациями, полиплоидных и пролиферирующих клеток в культурах клеток, полученных из аденокарцином и обработанных противоопухолевыми препаратами (%) низко - (НД), умеренно - (УД) и высокодифференцированных (ВД)

* - р < 0.05 по отношению к монопрепарату.

Реактивность опухолевых эпителиальных клеток к химиотерапевтическим препаратам в условиях in vitro. Максимальное снижение митотического индекса, количества анеуплоидных и клеток с хромосомными аберрациями свидетельствует о высокой чувствительности к антиканцерогенным препаратам первичных культур, полученных из ВД аденокарциномы (рис.4 А-Г). Анеуплоидные клетки в первичных культурах, полученные из НД или УД аденокарцином, чувствительны к цисплатину, лейковорину и 5-фторурацилу (рис.4 А, В, Г). Максимально эффективное влияние на геномную стабильность и деление клеток всех подгрупп культур клеток аденокарцином оказала комбинация 5-фторурацила с лейковорином (рис.4 Ж). Резистентность к цисплатину, 5-фторурацилу и к комбинациям препаратов с лейковорином проявилась в повышении в 1.4-1.8 раза количества клеток с хромосомными аберрациями в культурах клеток УД аденокарцином.

Влияние противоопухолевых препаратов на колониеобразующую активность и динамику роста опухолевых клеток. Колониеобразующую активность клеток НД аденокарцином стимулируют 5-фторурацил, цисплатин, лейковорин, томудекс. Все терапевтические препараты, кроме лейковорина и томудекса не влияют на колониеобразующую активность клеток УД аденокарцином (табл.3).

Таблица 3. Колониеобразующая активность опухолевых клеток больных колоректальным раком

Химическое соединение Степень дифференциации аденокарцином низкая умеренная высокая

1а 2 9 3 4 5 6 7 10 8

Н2О 2.3 1.2 0 0.1 0 0 0.01 0 0 0.003

5-фторурацил 2.8 0.06* 0.001* 0.02* 0 0 0 0 0.01* 0

Цисплатин 3.4 2.4 0 0.15 0.001* 0 0.19* 0 0 0.01*

Томудекс 1.9 0.82 0 0 0 0 0 0 0 0

Лейковорин 0.98* 0.01* 0.0001* 0 0 0 0.02 0 0 0.008*

5-фторурацил лейковорин 1.3* 0.018* 0.0002* 0 0 0 0 0 0 0

Цисплатин лейковорин 0.92* 1.1 0 0 0 0 0.00011* 0 0

Томудекс лейковорин 0.83* 2.3* 0.021* 0 0 0 0 0 0 0.0078* а - пациенты "1", "2", "3", "4", "5", "6", "7", "8", "9", "10".

* - р < 0.05 по отношению к деионизированной воде

Лейковорин ингибирует колониеобразующую активность клеток, полученных из УД аденокарцином. Цисплатин и лейковорин стимулирует клониеобразующую активность клеток, полученных из ВД аденокарциномы.

А Б В

Г Д Ж Рис.5. Влияние лекарственных препаратов и их комбинаций на динамику роста культур клеток, полученных из аденокарцином

А, Г - низкодифференцированных, Б, Д - умереннодифференцированных, В, Ж - высокодифференцированных.

Динамика роста опухолевых клеток, обработанных препаратами in vitro, имеет индивидуальные особенности (рис.5). Клетки первичных культур, полученных из НД аденокарцином, не чувствительны к цитотоксическому действию лекарственных препаратов. Исключением является высокая чувствительность к томудексу клеток, полученных из УД и ВД аденокарцином (рис.5 Б, В). Максимально чувствительными к цитотоксическому действию противоопухолевых препаратов являются клетки, полученные из ВД аденокарцином. Экспериментально выявлено, что комбинации противоопухолевых препаратов эффективнее подавляют развитие опухолевых клеток (рис.5 Г-Ж).

Таким образом, клетки первичных культур, полученные из аденокарцином с разной степенью дифференциации, различаются по чувствительности к лекарственным препаратам разных групп химических соединений. Гипермутагенез и снижение чувствительности клеток к цитостатическому действию противоопухолевых препаратов являются признаками мутаторного фенотипа клеток.

Оценка экспрессии генов репарации ошибочно спаренных оснований системы. Одной из причин развития КРР является появление клеток с мутаторным фенотипом, который возникает в результате соматических мутаций в генах системы репарации ошибочно спаренных оснований [Genschel et al., 1998]. В клетках, мутантных по гену HMSH6, высокая экспрессия белка Msh3, а в клетках, мутантных по гену HMSH2, не экспрессируются белки Msh3 и Msh6 [Drummond et al., 1997]. Анализ продуктов ПЦР реакции свидетельствует о присутствии мутаций в генах HMSH6 (два пациента с УД и один пациент с ВД аденокарциномами) и HMSH2 (четыре пациента с УД аденокарциномой) (рис.6). В качестве контроля в анализе использованы праймеры к гену, продуктом которого является ?-актин.

Рис.6. Мутация в генах HMSH6 и HMSH2 больных колоректальным раком.

Экспрессия генов А - HMSH3 в опухолевых клетках, мутантных по гену HMSH6 - пациенты "4" и "6" с УД и "10" пациент с ВД аденокарциномами; Б - HMSH6 в опухолевых клетках, мутантных по гену HMSH2 - "2", "5", "7" и "9" пациенты с УД аденокарциномами.

Таким образом, высокая пролиферативная активность, геномная нестабильность, низкая чувствительность к противоопухолевым препаратам опухолевых клеток являются показателями отсутствия аллелей дикого типа HMSH2 и HMSH6 в соматических клетках.

Сопоставление результатов цитогенетического тестирования опухолевых клеток с данными клинических исследований.

Клетки, мутантные по гену HMSH6 (пациенты "4", "6" и "10") или HMSH2 (пациенты "5", "7" и "9"), по уровню колониеобразования и скорости деления чувствительны к действию ТД в комбинации с ЛВ. Клетки пациентов "6", "10" и "5", "7" чувствительны к действию ЦП в комбинации с ЛВ. Эти комбинации препаратов ингибируют хромосомную, геномную нестабильность, пролиферативную и колониеобразующую активности только в клетках MSH6. Максимальное ингибирование деления клеток и колониеобразующей активности ЦП выявлено в культурах клеток аденокарциномы пациента "2". Чувствительность к 5-фторурацилу клеток HMSH2 ранжирована по изменению значений R: "2" = "5" > "7" > "9". Колониеобразующая активность клеток аденокарцином пациентов "2", "7" и "9", но не "5", ингибируется действием 5-ФУ. Клетки HMSH6 больных "4", "6" и "10" не чувствительны к комбинации 5-ФУ с ЛВ, а в ответе клеток HMSH2 на действие препаратов отсутствует линейная зависимость между мутагенезом, пролиферативной активностью и чувствительностью к препаратам.

Солитарные метастазы образовались в печени пациентов "1", "9", "10" через 3 года и пациентов "4", "5", "6" через 5 лет после комбинированного лечения. Опухолевые клетки этих больных по двум тестам имели наименьшую чувствительность к 5-ФУ в комбинации с ЛВ. Множественные метастазы обнаружены в печени и забрюшинных лимфатических узлах пациента "7". Лекарственный гепатит, а не рецидив заболевания, вызвал повышение до 42.4 МЕ/мл содержания онкомаркера СА19-9 в организме пациентов "3" и "8", клетки которых имели максимальную чувствительность к 5-ФУ. Результаты работы показали, что тестирование первичных культур опухолевых клеток помогает скорректировать химиотерапию онкологических больных, повысить ее эффективность, снизить или исключить осложнения, вызванные токсическим действием лекарственных препаратов.

Проведенное клинико-экспериментальное исследование общепатологических закономерностей развития колоректального рака позволило разработать комплексную схему диагностики и лечения заболевания с учетом индивидуальных фенотипических характеристик опухолевых клеток (рис.7).

Рис.7. Схема диагностики и лечения колоректального рака1. Заболеваемость колоректальным раком 18.2±0.2 в Пермском регионе выше, чем 15.5±0.5 в среднем по Российской Федерации. Полипы - 57.1%, дивертикулярная болезнь толстой кишки - 19.6%, комбинированный геморрой - 17%, язвенный колит - 2.6%, энтероколит, синдром раздраженной кишки, полипоз по - 1.9% во взаимодействии с выявленным при помощи анкетирования предпочтением пищи богатой нерафинированными жирами являются факторами, которые обуславливали развитие колоректального рака у 26.5% респодентов с наследственной предрасположенностью к онкологическим заболеваниям желудочно-кишечного тракта или органов малого таза, а также у 36.8% респондентов со стажем работы более тридцати лет в нефтеперерабатывающей, металлургической и химической промышленности.

2. Выявленные при помощи ПЦР-RT анализа мутантный ген HMSH2 в клетках 2 больных с низко - и 2 больных с умереннодифференцированной, а также мутантный ген HMSH6 в клетках 3 больных с умереннодифференцированной аденокарциномами, определяют генетическую предрасположенность к развитию колоректального рака.

3. Индивидуальная реактивность по результатам исследований первичных культур опухолевых клеток, которая характеризуется высокой геномной (15.7±0.9% анеуплоидных клеток) и хромосомной (11.2±0.04 клеток с хромосомными аберрациями) нестабильностями, является основанием для подбора эффективных схем воздействия противоопухолевыми препаратами на резистентные к 5-фторурацилу в комбинации с лейковорином клетки, мутантные по генам HMSH2 и HMSH6.

4. Разработана схема верификации и лечения неопластического поражения толстой кишки, которая включает: ? оценку рискометрических параметров развития неопластического поражения толстой кишки;

? скрининговые тесты диагностики рака (тесты "Гемоквант", "Гемоселект"), позволяющие оптимизировать идентификацию бластом толстого кишечника;

? инструментальные методы, в том числе эндоректальная эхография прямой кишки, позволяющая определить степень распространения неоплазмы по слоям кишечной стенки;

? культивирование клеток эпителия толстой кишки, позволяющее оптимизировать терапию с учетом генотипических и фенотипических характеристик клеток.

5. Практические рекомендации

1. Для определения тактики и оценки эффективности лечения КРР целесообразно применять культивирование опухолевых клеток с определением чувствительности к различным лекарственным средствам.

2. Патогенетические аспекты колоректального рака следует учитывать при профилактике этой патологии, внедряя скрининговые обследования по выявлению предопухолевых заболеваний кишечника, прежде всего полипов толстой кишки, и их своевременное удаление. Необходимо активное лечение воспалительных заболеваний, толстой кишки, при которых высок риск развития опухоли.

3. Следует широко информировать население об этиологических факторах развития КРР и мерах по снижению вероятности заболеваемости: отказ от курения, уменьшение или полный отказ от приема алкоголя, уменьшение приема жирной пищи и продуктов, содержащих большое количество клетчатки, регулярная физическая активность, контроль массы тела, прием пробиотиков, профилактические обследования.

1. Жижин Н.К. Рак ободочной и прямой кишки / Н.К. Жижин / Сборник статей по материалам Всерос. науч. конф. им Н.И. Пирогова. - Томск, 2002. - С.126.

2. Жижин Н.К. Рентгенодиагностика "малых раков" толстой и прямой кишки / Н.К. Жижин / 76-я итоговая студенческая научная конф., Тез. докл. - Пермь, 2003. - С.14

3. Жижин Н.К. Отношение онкологических больных к различным методам лечения / Н.К. Жижин / 76-я итоговая студенческая научная конф., Тез. докл. - Пермь, 2003. - С.14.

4. Жижин Н.К. Рак ободочной и прямой кишки / Н.К. Жижин / 76-я итоговая студенческая научная конф., Тез. докл. - Пермь, 2003. - С.52.

5. Жижин Н.К. Колоректальный рак: диагностика и лечение / Н.К. Жижин / Сб. статей по матер. Междунар.62-й итоговой науч. студенческой конф. им.Н.И. Пирогова. - Томск, 2003. - С.106.

6. Жижин Н.К. Возможности лучевых методов исследования в распознавании колоректального рака / Н.К. Жижин / Студенческая медицинская наука 2004, Матер. Межрег. студенческой науч. конф. с междунар. участием. - Воронеж, 2004. - С.76-78.

7. Жижин Н.К. Верхнекамье: радиация и онкология / Н.К. Жижин, Б.В. Тестов/ Экология и научно-технический прогресс, Матер. второй Междунар. науч. - практич. конф. студентов, аспирантов и молодых ученых. - Пермь, 2004. - С.171-172.

8. Жижин Н.К. Лучевая терапия рака прямой кишки / Н.К. Жижин / IV Всерос. универ. науч. - практич. конф. молодых ученых и студентов по медицине, сб. матер. - Тула, 2005. - С.45-46.

9. Жижин Н.К. Экологические и генетические предпосылки для развития колоректального рака / Н.К. Жижин / IV Всерос. универ. науч. - практич. конф. молодых ученых и студентов по медицине, сб. матер. - Тула, 2005. - С. 199-200.

10. Жижин Н.К. Цитогенетические аспекты развития колоректального рака / Н.К. Жижин, О.Б. Пьянкова / Матер. межрег. межвуз. науч. студенческой конф. - Пермь, Ижевск, 2005. - С.60-62.

11. Жижин Н.К. Экологические и генетические аспекты развития колоректального рака / Н.К. Жижин, Н.В. Голясная, Е.С. Патлусова / Экология человека. - 2005. № 8, - С.7-12.

12. Жижин Н.К. Алгоритм диагностики колоректального рака / Н.К. Жижин, О.И. Кондратова / Матер. юбилейной межрег. межвуз. науч. студенческой конф., посвященной 75-летию Пермской государственной медицинской академии и 90-летию высшего медицинского образования на западном Урале. - Пермь, Ижевск, 2006. - С.132-134.

13. Жижин Н.К. Эндоректальная ультразвуковая эхография в диагностике рака прямой кишки / Н.К. Жижин / Матер. юбилейной межрег. межвуз. науч. студенческой конф., посвященной 75-летию Пермской государственной медицинской академии и 90-летию высшего медицинского образования на западном Урале. - Пермь, Ижевск, 2006. - С.134-135.

14. Жижин Н.К. Оценка эффективности химиотерапевтического действия алкилирующего соединения при колоректальном раке / Н.К. Жижин / Матер. XV науч. конф., Актуальные проблемы патофизиологии. - Санкт - Петербург, 2009 - С.40-41.

15. Жижин Н.К. Новые патогенетические подходы в диагностике химиорезистентности при колоректальном раке / Н.К. Жижин/ Матер. XVI науч. конф., Актуальные проблемы патофизиологии. - Санкт - Петербург, 2010 - С.63-64.

16. Жижин Н.К. Молекулярно-генетические аспекты развития колоректального рака / И.М. Зайончковская, Ю.Г. Саркисян, Н.В. Голясная, Н.К. Жижин / Медицинский вестник МВД. - 2011. - №1 (50). - С.28-32.

17. Жижин Н.К. Влияние противоопухолевых препаратов на первичные культуры клеток больных колоректальным раком / И.М. Зайончковская, В.А. Черешнев, Ю.Г. Саркисян, Н.В. Голясная, Н.К. Жижин / Медицинский вестник МВД. - 2011. - №2 (50). - С.21-27.

Размещено на .ru