Оценка относительных частот и оптимизация методов биохимической и молекулярно-генетической диагностики наследственных болезней обмена веществ - Автореферат
Разработан алгоритм подтверждающей диагностики галактоземии тип 1 с учетом биохимических и молекулярно-генетических данных. Разработаны методы определения уровня длинноцепочечных жирных кислот в плазме крови для диагностики пероксисомных заболеваний.
Аннотация к работе
Оценить спектр и относительные частоты наиболее распространенных подклассов наследственных болезней обмена веществ (лизосомных болезней накопления, митохондриальных заболеваний, нарушений обмена аминокислот, органических кислот, дефектов митохондриального ?-окисления, пероксисомных болезней, нарушений обмена углеводов) в выборке больных из Российской Федерации и обосновать необходимость оптимизации методов их лабораторной диагностики; Впервые в России для 14 разных форм НБО (синдром Ли, атрофия зрительных нервов Лебера, синдром Альперса, галактоземия тип 1, тирозинемия тип 1, глутаровая ацидурия тип 1, недостаточность биотинидазы, недостаточность трифункционального белка, гликогеноз тип 1а, гликогеноз тип 1в, болезнь Баллера тип 2, болезнь Краббе, алькаптонурия, лейкоэнцефалопатия с поражением ствола и высоким уровнем лактата при МР-спектроскопии) показано наличие мажорных мутаций в соответствующих генах и определены их относительные частоты. Для диагностики галактоземии тип 1 был создан биочип, который позволяет определять 14 мутаций и полиморфизмов в гене GALT, для диагностики тирозинемии тип 1 - биочип, позволяющий выявлять 5 мутаций в гене FAH. Определены отрезные точки и активности галактозо-1-фосфат уридилтрансферазы (Г-1-ФУТ) в пятнах высушенной крови и цельной крови, показано, что на значение активности фермента Г-1-ФУТ существенное влияние оказывают варианты носительства галактоземии тип 1 и полиморфные варианты гена (вариант Дуарте). Для оценки нозологической структуры группы ЛБН, проведен анализ 902 случаев ЛБН, которые были диагностированы в лаборатории с 1992 - 2009гг. Характеристика относительной частоты подклассов НБО проведена на выборке из 370 пациентов, выявленных при обследовании 9875 пациентов, направленных с подозрением на НБО научно-консультативного отдела ФГБУ «МГНЦ» РАМН, отделений неврологии и эндокринологии ФГБУ «Российская детская клиническая больница» Министерства Здравоохранения РФ, Клиники нервных болезней им.В исследовании обобщен многолетний опыт работы лаборатории наследственных болезней обмена веществ ФГБУ «МГНЦ» РАМН, проведен анализ относительных частот отдельных подклассов НБО на репрезентативной выборке пациентов и определены частоты отдельных нозологических форм из подкласса ЛБН на основании учета числа новых случаев заболевания за 10-летний период. С целью совершенствования уже существующих программ массового скрининга в ходе исследования разработан алгоритм подтверждающей диагностики галактоземии тип 1, который позволяет снизить число ложноположительных результатов при проведении тестирования.Частота новых случаев заболеваний из группы лизосомных болезней накопления в европейской части России (Центральный федеральный округ) составила 5,22 на 100 000 новорожденных (1:19937), заболеваемость в расчете на 100 000 новорожденных составила: мукополисахаридоз тип I - 0,82 (95% ДИ 0,552-1,089), мукополисахаридоз тип II-0,74 (95% ДИ 0,478-1,075), болезнь Гоше-0,93 (95% ДИ 0,790-1,070), GM1-ганглиозидоз-0,58 (95% ДИ 0,117-1,052). Определены новые диагностически значимые соотношения параметров для недостаточности длинноцепочечной 3-гидрокси-ацил-КОА дегидрогеназы и среднецепочечной ацил-КОА дегидрогеназы, (С18ОН С18:1ОН С16ОН)/С0 и (С6 С8 С10:1)/(С16 С18 С18:1) соответственно, применение которых повышает чувствительность, специфичность и положительную прогностическую ценность метода тандемной масс-спектрометрии для диагностики этих заболеваний. При селективном скрининге 5205 пациентов детских психоневрологических отделений в возрасте 8 дней - 5лет на НБО методом тандемной масс-спектрометрии выявлено 119 больных (2,3%), из них с аминоацидопатиями - 39 (33%), с органическими ацидуриями - 62 (52%), с дефектами митохондриального ?-окисления - 18 (15%). При 14 НБО (синдром Ли, атрофия зрительных нервов Лебера, синдром Альперса, галактоземия тип 1, тирозинемия тип 1, глутаровая ацидурия тип 1, недостаточность биотинидазы, недостаточность трифункционального белка , гликогеноз тип 1а, гликогеноз тип 1в, болезнь Баллера тип 2, болезнь Краббе, алькаптонурия, лейкоэнцефалопатия с поражением ствола и высоким уровнем лактата при МР-спектроскопии) рекомендуется тестирование на мажорные мутации. Казанцева Л.З., Сухоруков В.С., Николаева Е.А., Захарова Е.Ю., Семячкина С.В., Тозлиян Е.В., Яблонская М.И Клинические проявления, диагностика и лечение митохондриальной миопатии с офтальмоплегией, обусловленной делецией митохондриальной ДНК // Российский вестник перинатологии и педиатрии.
Вывод
Основной целью настоящей работы являлись изучение относительных частот и спектра семи групп наследственных болезней обмена веществ, а также оптимизация методов их биохимической и молекулярно-генетической диагностики для усовершенствования программ массового и селективного скрининга на наследственные болезни обмена веществ. В исследовании обобщен многолетний опыт работы лаборатории наследственных болезней обмена веществ ФГБУ «МГНЦ» РАМН, проведен анализ относительных частот отдельных подклассов НБО на репрезентативной выборке пациентов и определены частоты отдельных нозологических форм из подкласса ЛБН на основании учета числа новых случаев заболевания за 10-летний период.
С целью совершенствования уже существующих программ массового скрининга в ходе исследования разработан алгоритм подтверждающей диагностики галактоземии тип 1, который позволяет снизить число ложноположительных результатов при проведении тестирования.
Проведенный селективный скрининг на НБО методом тандемной масс-спектрометрии в отделениях психоневрологии позволил определить вклад этих групп болезней в общую структуру патологии нервной системы у детей раннего возраста, доказана необходимость обследований пациентов на эти заболевания, учитывая, что некоторые из них поддаются эффективному лечению. В ходе селективного скрининга диагноз НБО подтвержден у 119 пациентов, 5 нозологических форм впервые диагностированы в практике отечественной медицины.
В работе изучена частота наиболее распространенных мутаций при 14 формах НБО и разработаны простые ДНК-тесты для их выявления.
В ближайшем будущем следует ожидать расширения программ массового тестирования на наследственные болезни обмена веществ, что невозможно проводить без создания протоколов и алгоритмов подтверждающей диагностики. Полученные результаты создают базу для оптимизации программ селективного и массового скрининга на эти заболевания.1. Определены спектр и относительные частоты 7 групп НБО в выборке российских больных (n=370) за период 2004-2009гг. Наиболее представленными группами в выборке больных, обследованных в МГНЦ РАМН, являются лизосомные болезни накопления (48%) и митохондриальные заболевания (18%). Число пациентов с нарушениями межуточного метаболизма - аминоацидопатиями (без ФКУ), органическими ацидуриями и дефектами митохондриального ?-окисления - значительно ниже, и составляет 2%, 7% и 4%, соответственно.
2. Определены спектр и относительные частоты отдельных форм болезней в группе лизосомных болезней накопления и митохондриальных болезней. Наиболее частыми в группе лизосомных болезней накопления (n= 902) являются мукополисахаридозы (42,1%) и липидозы (35%), среди нозологических форм преобладает болезнь Гоше (25%). Наиболее частыми нозологическими формами в группе митохондриальных болезней (n=176) являются атрофия зрительных нервов Лебера (35%), и синдром Ли (20%).
3. Частота новых случаев заболеваний из группы лизосомных болезней накопления в европейской части России (Центральный федеральный округ) составила 5,22 на 100 000 новорожденных (1:19937), заболеваемость в расчете на 100 000 новорожденных составила: мукополисахаридоз тип I - 0,82 (95% ДИ 0,552-1,089), мукополисахаридоз тип II -0,74 (95% ДИ 0,478-1,075), болезнь Гоше -0,93 (95% ДИ 0,790-1,070), GM1-ганглиозидоз -0,58 (95% ДИ 0,117-1,052).
4. Для биохимических программ селективного скрининга на НБО методом тандемной масс-спектрометрии определены референсные значения 20 аминокислот и 32 ацилкарнитинов в крови в трех возрастных группах. Определены новые диагностически значимые соотношения параметров для недостаточности длинноцепочечной 3-гидрокси-ацил-КОА дегидрогеназы и среднецепочечной ацил-КОА дегидрогеназы, (С18ОН С18:1ОН С16ОН)/С0 и (С6 С8 С10:1)/(С16 С18 С18:1) соответственно, применение которых повышает чувствительность, специфичность и положительную прогностическую ценность метода тандемной масс-спектрометрии для диагностики этих заболеваний.
5. Разработаны биохимические тесты для диагностики пероксисомных болезней, микрометоды определения глутаровой, оротовой кислот и сукцинилацетона методом высокоэффективной жидкостной хроматографии - тандемной масс-спектрометрии.
6. Для 14 разных форм НБО показано наличие мажорных мутаций, что позволяет применять простые методы ДНК-анализа (ПЦР-ПДРФ-анализ, SSCP-анализ) на первом этапе подтверждающей диагностики этих заболеваний.
7. Для диагностики галактоземии тип 1 был создан биочип, который позволяет определять 14 мутаций и полиморфизмов в гене GALT, для диагностики тирозинемии тип 1 - биочип, позволяющий выявлять 5 мутаций в гене FAH.
8. При селективном скрининге 5205 пациентов детских психоневрологических отделений в возрасте 8 дней - 5лет на НБО методом тандемной масс-спектрометрии выявлено 119 больных (2,3%), из них с аминоацидопатиями - 39 (33%), с органическими ацидуриями - 62 (52%), с дефектами митохондриального ?-окисления - 18 (15%).
9. Для массового скрининга новорожденных создан алгоритм подтверждающей диагностики галактоземии тип 1, включающий определение активности фермента и молекулярно-генетический анализ. Определены оптимальные отрезные точки активности Г-1-ФУТ для пятен крови, < 2,5 Е/ГHB (чувствительность - 100%, специфичность - 92%), для цельной крови < 1,3 Е/ГHB (чувствительность - 100%, специфичность - 100%), охарактеризован спектр мутаций у российских пациентов с галактоземией тип 1, показано преобладание мутаций Q188R (57%), K285N (15%) .
10. Проведенный анализ уровня тотальной галактозы у пациентов с классической галактоземией, галактоземией-Дуарте и вариантом Дуарте-Дуарте показал, необходимость изменения отрезной точки тотальной галактозы для снижения числа ложноположительных результатов тестирования при проведении неонатального скрининга в популяциях РФ.
Практические рекомендации
1. Для рационального планирования сети региональных и федеральных центров по диагностике и лечению НБО необходимо внедрение в практическое здравоохранение системы регистрации новых случаев заболеваний, выявленных при проведении массового и селективного скрининга.
2. Для повышения эффективности неонатального скрининга на галактоземию целесообразно внедрить в практическое здравоохранение разработанный в ходе исследования алгоритм проведения скрининга и подтверждающей диагностики с учетом биохимических и молекулярно-генетических данных.
3. На основе полученных данных рекомендуется провести определение уровней пороговых концентраций галактозы в выборке больных из всех регионов России для коррекции отрезной точки, что позволит уменьшить количество детей, нуждающихся в подтверждающей диагностике и будет способствовать снижению экономических затрат на проведение неонатального скрининга на галактоземию.
4. Рекомендуется проведение селективного скрининга на НБО больных детских психоневрологических стационаров методом тандемной масс-спектрометирии.
5. Для первого этапа лабораторной диагностики пероксисомных болезней рекомендуется определение уровня ОДЦЖК, что позволяет дифференцировать данные заболевания от других наследственных дегенеративных болезней со сходной клинической картиной
6. При 14 НБО (синдром Ли, атрофия зрительных нервов Лебера, синдром Альперса, галактоземия тип 1, тирозинемия тип 1, глутаровая ацидурия тип 1, недостаточность биотинидазы, недостаточность трифункционального белка , гликогеноз тип 1а, гликогеноз тип 1в, болезнь Баллера тип 2, болезнь Краббе, алькаптонурия, лейкоэнцефалопатия с поражением ствола и высоким уровнем лактата при МР-спектроскопии) рекомендуется тестирование на мажорные мутации. Данный метод обладает высокой диагностической значимостью и рекомендуется для первого этапа подтверждающей молекулярно-генетической диагностики этих заболеваний.
7. Включить в стандарты подготовки врачей разных специальностей (генетиков, неврологов, педиатров) в учреждениях высшего и последипломного медицинского образования информацию о новых методах диагностики НБО.
РАБОТЫ, ОПУБЛИКОВАННЫЕ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ
Статьи, опубликованные в изданиях, рекомендованных ВАК МОН РФ.
1. Мальберг С.А, Маслова О.И., Шередярова Т.Ч., Захарова Е.Ю., Метященко Е.П., Сурсолова П. А. Синдром Кернс-Сейра // Журнал неврологии и психиатрии им.С.С.Корсакова. 1997. Т. 97, №8. С. 53-57.
2. Краснопольская К.Д, Захарова Е.Ю., Современные достижения в диагностике и профилактике митохондриальных болезней // Журнал неврологии и психиатрии им. С.С.Корсакова. 1998. №8. С.49-51, 3. Яхно Н.Н., Нечкина Н.П., Помытко Н.П., Усачева Е.Л., Захарова Е.Ю., Воскобоева Е.Ю., Покровская А.Я. Случай синдрома MELAS // Неврологический журнал. 1998. №5. С. 14- 20.
4. Краснопольская К.Д., Петрухин А.С., Захарова Е.Ю., Покровская А.Я., А.С.Петрухин. Клинический полиморфизм митохондриальных болезней при недостаточности цитохром С оксидазы // Неврологический журнал. 1999. №1. С. 11-16.
5. Краснопольская К.Д., Букина Т.М., Ахунов В.С., Евдокименков В.Н., Захарова Е.Ю., Покровская А.Я., Воскобоева Е.Ю., Шехтер О.В., Тишканина С.В., Мытникова Е.А., Погорелов А.Г. Программа диагностики и профилактики наследственных болезней обмена клеточных органелл // Вестник РАМН. 1999. №11. С. 16-22.
7. Казанцева Л.З., Сухоруков В.С., Николаева Е.А., Захарова Е.Ю., Семячкина С.В., Тозлиян Е.В., Яблонская М.И Клинические проявления, диагностика и лечение митохондриальной миопатии с офтальмоплегией, обусловленной делецией митохондриальной ДНК // Российский вестник перинатологии и педиатрии. 2002. № 2. С. 22-26.
8. Захарова Е.Ю., Руденская Г.Е., Карлова И.З., Адарчева Л.С., Михайлова Е.Н.. Наследственная атрофия зрительных нервов Лебера: ДНК-диагностика и клинико-генетические сопоставления в 12 семьях // Журнал неврологии и психиатрии им. С.С.Корсакова. 2003. № 7. С. 44-50.
9. Воскобоева Е.Ю., Захарова Е.Ю., Байдакова Г.В., Диагностика наследственной галактоземии типа I // Медицинская генетика. 2003. Т. 2, № 10. С. 407-408.
10. Новиков П.В., Семячкина А.Н., Курбатов М.Б., Улас В.Ю., Захарова Е.Ю., Букина А.М. Ганглиозидоз II типа (Синдром Дерри) у детей // Российский вестник перинатологии и педиатрии. 2003. № 6. С. 46-50.
11. Михайлова С.В., Захарова Е.Ю., Букина А.М., Ильина Е.С., Покровская А.Я., Федонюк И.Д., Бембеева Р.Ц., Петрухин А.С. «Случай лейкодистрофии Канавана Ван Богарта-Бертрана» // Журнал неврологии и психиатрии им. Корсакова. 2004. №4. С. 49-55.
13. Руденская Г.Е., Захарова Е.Ю., Адарчева Л.С., Михайлова Е.Н., Карлова И.З. Наследственная атрофия зрительных нервов Лебера: неврологические и другие внеглазные проявления // Журнал неврологии и психиатрии им.С.С.Корсакова. 2004. № 2. С. 38-42.
14. Е. М. Орлова, А. М. Букина, Е. Ю. Захарова, Э. С. Кузнецова, В. А. Петеркова Критерии диагностики аутоиммунного полигландулярного синдрома 1-го типа // Российский вестник перинатологии и педиатрии. 2005. №5. С. 12-15.
15. Михайлова С.В., Петрухин А.С., Захарова Е.Ю., Дунаевская Г.Н., Букина Т.М., Холин А.А., Миронов М.Б. , Волкова Э.Ю. Случай поздне-инфантильной формы GM-2 ганглиозидоза // Неврологический журнал. 2005. №1. C. 22-27.
17. Байдакова Г.В., Букина А.М., Гончаров В.М., Шехтер О.В., Букина Т.М., Покровская А.Я., Захарова Е.Ю., Михайлова С.В., Федонюк И.Д., Колпакчи Л.М., Семыкина Л.И., Ильина Е.С. Диагностика наследственных болезней обмена веществ на основе сочетания методов тандемной масс-спектрометрии и энзимодиагностики // Медицинская генетика. 2005. №1. С.28-33.
18. Мазанкова Л.Н., Солониченко В.Г., Попова М.В., Куликова М.А., Котлукова Н.П., Захарова Е.Ю., Букина Т.М., Жарова Е.Л., Сорока С.Г. Трудности диагностики болезни Помпе у детей грудного возраста // Педиатрия. 2005. №6. С.89-92.
19. Михайлова С.В., Захарова Е.Ю., Петрухин А.С., Колпакчи Л.М., Букина Т. М., Ильина Е.С., Ахунов В.С. Дисмиелинизирующие заболевания нервной системы у детей. Болезнь Краббе. Три «маски» одной нозологической формы // Неврологический журнал. 2005. №5. С.13-17.
20. Повалко Н.Б., Захарова Е.Ю., РУДЕНСКАЯГ.Е. Мутации МТДНК при атрофии зрительных нервов Лебера в российских семьях // Медицинская генетика. 2006. № 8. С. 24-29.
25. Семячкина А.Н., Новиков П.В., Воскобоева Е.Ю., Захарова Е.Ю., Букина Т.М. Мукополисахаридозы у детей // Российский вестник перинатологии и педиатрии. 2007. № 4. С.22-29.
26. Михайлова С.В., Захарова Е.Ю., Банин А.В., Волкова Г.И., Брюсова И.Б., Бобылова М.Ю., Рассказчикова И.В Байдакова Г.В., Петрухин А.С., Шехтер О.В., Ильина Е.С. Глутаровая ацидурия тип 1: клиника, диагностика и лечение // Журнал неврологии и психиатрии им. С.С.Корсакова. 2007. № 10. С.4-12.
28. Захарова Е.Ю. Лечение лизосомных болезней накопления // Вопросы гематологии/онкологии и иммунопатологии в педиатрии. 2008. Т.7, №4. С. 27-33.
29. Руденская Г.Е., Захарова Е.Ю., Букина Т.М., Волкова Э.Ю., Козлов А.С. Болезнь Нимана-Пика, тип С (ювенильный дистонический липидоз) // Журнал неврологии и психиатрии им. С.С.Корсакова. 2008. № 5. С. 76-79.
30. Руденская Г.Е., Захарова Е.Ю. , Михайлова С.В. Наследственные болезни ЦНС: новое в диагностике и медико-генетическом консультировании // Медицинская генетика. 2008. № 11. С. 28-39.
31. Николаева Е.А., Шулякова И.В., Цыганкова П.Г., Байдакова Г.В., Захарова Е.Ю., Белоусова Е.Д. Симптоматическая эпилепсия как проявление дефицита ацил-КОА дегидрогеназы жирных кислот с очень длинной углеродной цепью // Российский вестник перинатологии и педиатрии. 2008. №.3. С. 87.
32. Серебреникова Т.Е., Фоминых Л.Д. Байдакова Г.В., Захарова Е.Ю., Покровская А.Я., Сорокина Т.В., Кочкина Н.А., Случай острой формы тирозинемии 1-го типа у новорожденного ребенка // Педиатрия. 2008. №4. С.148-150.
34. Михайлова С.В., Захарова Е.Ю., Банин А.В., Демушкина А.А., Петрухин А.С.. Клинические проявления и молекулярно-генетическая диагностика лейкоэнцефалопатии с преимущественным поражением ствола мозга, спинного мозга и повышенным лактатом у детей // Журнал неврологии и психиатрии им. С.С. Корсакова. 2009. №9. С. 16-22.
35. Харламов Д.А., Сухоруков В.С., Захарова Е.Ю., Ильина Е.С., Михайлова С.В., Лузин А.В., Цыганкова П.Г., Балина Е.А. Подострая некротизирующая энцефаломиопатия // Российский вестник перинатологии и педиатрии. 2009. № 6. С.58-63.
36. Руденская Г.Е., Захарова Е.Ю., Карпин С.Л., Учаев Д.А. Миоклонус-эпилепсия Лафоры. Описание наблюдения // Журнал неврологии и психиатрии им. С.С. Корсакова. 2010. №3. С. 11-16.
37. Цыганкова П.Г., Михайлова С.В., Захарова Е.Ю., Пичкур Н.А., Ильина Е.С., Николаева Е.А., Руденская Г.Е., Дадали Е.Л., Колпакчи Л.М., Федонюк И.Д., Матющенко Г.Н. Синдром Ли, обусловленный мутациями в гене SURF1: клинические и молекулярно-генетические особенности // Журнал неврологии и психиатрии им. С.С. Корсакова. 2010. №1. С. 25-32.
38. Семячкина А.Н., Воскобоева Е.Ю., Букина Т.М., Новикова И.М., Воинова В.Ю., Захарова Е.Ю., Новиков П.В. Множественная сульфатазная недостаточность у детей // Российский вестник перинатологии и педиатрии. - 2010. №3. С. 31-36.
39. Панкратова Е.В., Воскобоева Е.Ю., Байдакова Г.В., Захарова Е.Ю. Создание тест-системы для определения мутаций в генах фумарилацетоацетат гидролазы и альфа-1-антитрипсина // Медицинская генетика. 2010. №3. С. 34-42.
40. Панкратова Е.В., Степченко А.Г., Воскобоева Е.Ю., Захарова Е.Ю., Чудинов А.В., Георгиева С.Г. Создание тест-системы для определения мутаций в гене галактозо-1-фосфат-уридил трансферазы, обуславливающих развитие галактоземии тип I // Медицинская генетика. 2010. №1. С. 22-28.
42. Михайлова С.В., Захарова Е.Ю., Букина Т.М., Савин Д.А., Пилия С.В., Петрухин А.С., Болезнь Ниманна-Пика тип С. Клинические примеры // Педиатрическая фармакология. 2010. № 5. С. 48-53.
43. Г.Е. Руденская Т. М. Букина, Е. Ю. Захарова Болезнь Нимана-Пика, тип С: взрослая форма с преобладанием психических расстройств // Журнал неврологии и психиатрии им. С.С. Корсакова. 2011. №7. С.71-75.
Методические рекомендации
44. Гинтер Е.К., Захарова Е.Ю., Воскобоева Е.Ю., Байдакова Г.В. «Галактоземия: неонатальный скрининг, диагностика и лечение» //N354-ПД.626, Методические рекомендации: Министерство здравоохранения и социального развития Российской Федерации .2006. 18с.
Патент
45. Биочип для определения мутаций в гене галактоза-1-фосфат-уридил трансферазы, вызывающих поражение печени у новорожденных детей № 2423521 от 27.10.2009. (Соавторы: Воскобоева Е.Ю., Панкратова Е.В., Степченко А.Г., Наседкина Т.В., Чудинов А. В., Георгиева С. Г.)
Публикации в других изданиях и монографиях
46. Winchester B., Bali D., Bodamer O.A., Caillaud C., Christensen E., Cooper A., Cupler E., Deschauer M., Fumic K., Jackson M., Kishnani P., Lacerda L., Ledvinova J., Lugowska A., Lukacs Z., Maire I., Mandel H, Mengel E, Muller-Felber W, Piraud M, Reuser A, Rupar T, Sinigerska I, Szlago M, Verheijen F, van Diggelen OP, Wuyts B, Zakharova E, Keutzer J. Methods for a prompt and reliable laboratory diagnosis of Pompe disease: report from an international consensus meeting // Mol Genet Metab. 2008. V 93. P.275-281.
47. Parvaneh N, Teimourian S, Jacomelli G, Badalzadeh M, Bertelli M, Zakharova E, Tabatabaei P, Parvaneh L, Pourakbari B, Yeganeh M, Tamizifar B, Mamishi S, Micheli V. Novel mutations of NP in two patients with purine nucleoside phosphorylase deficiency //Clin Biochem. 2008. V.41. P.350-352
48. Lavrov AY, Ilyna ES, Zakharova EY, Boukina AM, Tishkanina SV.The first three Russian cases of classical, late-infantile, neuronal ceroid lipofuscinosis //Eur J Paediatr Neurol. 2002. V.6. P.161-164.
49. Orlova EM, Bukina AM, Kuznetsova ES, Kareva MA, Zakharova EU, Autoimmune polyglandular syndrome type 1 in Russian patients: clinical variants and autoimmune regulator mutations //Horm Res Paediatr. 2010. V.73. P.449-457
50. Povalko N., Zakharova E., Rudenskaya G., Akita Y., Hirata K., Toyojiro M., Koga Y. A new sequence variant in mitochondral DNA associated with high penetrance of Russian Leber hereditary optic neuropathy // Mitochondrion. 2005. V.5. P. 194-199.
52. Tsygankova P.G., Zakharova E.Yu., Mikhaylova S.V., Fedonyuk I.D., Il’ina E.S,Pichkur N.A. The molecular findings in a series of Leigh syndrome patients with Surf1 gene mutations in Russia // J.Inherit. Metab.Dis. 2007. V. 30. P.77
53. Mikhaylova S.V, Zakharova E.Y., Tsygankova P.G.., Kolpakhi L.M., Ilina E.S., Petrukhin A.S Clinical spectrum of Alpers syndrome associated with mutations of the mitochondrial polymerase ?gene // J.Inherit. Metab.Dis. 2007. V.30. P.79
54. Mikhaylova S.V., Zakharova E.Y, Baidakova G.V., Shehter O.V., Ilina E.S Clinical outcome of glutaric aciduria type I in Russia. // J.Inherit. Metab.Dis. 2007. V. 30. P.38
55. Voskoboeva EY, Baydakova GV, Denisenkova EV, Denisenkov AI, Zakharova EY A newborn screening and diagnostics of galactosemia type I in Russia. // J.Inherit. Metab.Dis. 2007. V. 30. P.8
57. Захарова Е.Ю., Михайлова С.В. Нарушения обмена углеводов. В кн. Педиатрия. Национальное руководство. / Под ред. А.А. Баранова. М.: «ГЭОТАР-Медиа». 2009. Т. 2. С. 408-432.
58. Захарова Е.Ю., Михайлова С.В., Воскобоева Е.Ю. Мукополисахаридозы. В кн. Педиатрия. Национальное руководство. / Под ред. А.А. Баранова. М.: «ГЭОТАР-Медиа». 2009. Т. 2. С. 432-449.
59. Петрухин А.С., Михайлова С.В., Захарова Е.Ю. Наследственные заболевания нервной системы. В кн. Неврология. Национальное руководство / Под ред. Е.И. Гусева, А.Н. Коновалова, В.И. Скворцовой, А.Б. Гехт. М.: «ГЭОТАР-Медиа». 2009. С. 871-908.
60. Михайлова С.В., Захарова Е.Ю., Петрухин А.С. Нейрометаболические заболевания у детей и подростков. Диагностика и подходы к лечению / М: Литера, 2011. 356 с.
61. Захарова Е.Ю., Михайлова С.В. Принципы лечения наследственных болезней. В кн. Наследственные болезни: национальное руководство. Под ред. Н.П. Бочкова, Е.К. Гинтера, В.П. Пузырева. М.: «ГЭОТАР-Медиа». С. 726-741.
62. Захарова Е.Ю., Немцова М.В., Цыганкова П.Г. Митохондриальное наследование и митохондриальные болезни. В кн. Наследственные болезни: национальное руководство. Под ред. Н.П. Бочкова, Е.К. Гинтера, В.П. Пузырева. М.: «ГЭОТАР-Медиа». С. 499-510 .
63. Бочков Н.П., Лавров А.В., Захарова Е.Ю. Биохимические и молекулярно-генетические методы диагностики наследственных болезней. В кн. Наследственные болезни: национальное руководство. Под ред. Н.П. Бочкова, Е.К. Гинтера, В.П. Пузырева. М.: «ГЭОТАР-Медиа». 2012. С. 436-452 .
64. Захарова Е.Ю., Воскобоева Е.Ю., Байдакова Г.В., Шехтер О.В., Букина Т.М., Букина А.М. Наследственные болезни обмена веществ. В кн. Клиническая лабораторная диагностика: Национальное руководство / Под ред. В.В. Долгова. М.: «ГЭОТАР-Медиа», 2012. Т.1. С. 719-735.