Особливості природної резистентності корів голштинської породи різного фізіологічного стану за впливу біологічно активних речовин (прополісу та гідрогумату) - Автореферат
Вивчення імунобіологічного статусу високопродуктивних корів різного фізіологічного стану та обґрунтування питань профілактики післяродового гнійно-катарального ендометриту при застосуванні коровам голштинської породи імуномодуляторів у сухостійний період.
Аннотация к работе
Проведені дослідження були складовою частиною тематичного плану кафедри нормальної і патологічної фізіології сільськогосподарських тварин Дніпропетровського державного аграрного університету "Використання фітопрепаратів і похідних гумусової природи для лікування післяродових захворювань та відновлення репродуктивної функції у корів голштинської породи", номер державної реєстрації 0101U004234, згідно комплексної програми фундаментальних і прикладних досліджень щодо наукового забезпечення розвитку галузей агропромислового комплексу України “Розробка біологічних основ підвищення резистентності та адаптаційної здатності організму тварин ”, шифр 14.02. Виявлені специфічні зміни імунологічних показників (зниження кількості Т-загальних і Т-активних лімфоцитів, В-лімфоцитів на фоні зростання рівня “0”-лімфоцитів) організму високопродуктивних голштинських корів впродовж дородового періоду можуть використовуватися як прогностичні тести для проведення профілактичних заходів щодо ендометриту у тварин. Були використані різні варіанти застосування препаратів, а саме: - у сухостійний період (за 4 - 5 тижнів до отелення) коровам першої групи вводили прополіс внутрішньомязово (у вигляді 10%-вого масляного розчину в кількості 8 мл одноразово на добу, тричі, через кожні 4 доби); другій групі - сумісно застосували прополіс внутрішньомязово (у вигляді 10%-вого масляного розчину, який вводили в кількості 4 мл одноразово на добу, тричі, через кожні 4 доби) разом з пероральним введенням гідрогумату (у вигляді 10%-вого водного розчину в дозі 50 мг/кг одноразово на добу щодобово впродовж 21 доби); у післяродовий період (починаючи на другу добу після отелення) тваринам третьої дослідної групи вводили прополіс внутрішньоматково (у вигляді 10%-вої водної емульсії в кількості 8 мл одноразово на добу впродовж 3 діб); четвертій групі - сумісно застосовували прополіс внутрішньоматково (у вигляді 10%-вої водної емульсії в кількості 4 мл одноразово на добу впродовж 3 діб) разом з пероральним введенням гідрогумату (у вигляді 10%-вого водного розчину в дозі 50 мг/кг одноразово на добу впродовж 6 діб). (1979), кількість Т-хелперів (ТФР) - методом розеткоутворення за Shohat, Joshua (1992), число Т-клітин з переважно супресорною активністю (ТФЧ) - шляхом віднімання числа теофілінрезистентних Т-клітин (ТФР) від загального числа Т-лімфоцитів, імунорегуляторний індекс (ІРІ) розраховували як співвідношення ТФР/ТФЧ, число О-клітин підраховували відніманням від 100% суми загальної кількості Т-лімфоцитів та В-лімфоцитів, кількість В-лімфоцитів - методом комплементарного розеткоутворення за методом А.М.У дисертаційній роботі наведене теоретичне узагальнення і нове вирішення наукового завдання, що полягає у вивченні особливостей біохімічного, гематологічного і імунологічного статусу високопродуктивних корів різного фізіологічного стану та обґрунтуванні питань профілактики післяродового гнійно-катарального ендометриту при застосуванні коровам голштинської породи імуномодуляторів: прополісу та прополісу разом з гідрогуматом у сухостійний та ранній післяродовий періоди. У динаміці сухостійного періоду у корів голштинської породи знижуються показники білкового обміну, одночасно підвищуються імунологічні показники: збільшується кількість В-лімфоцитів з 14,3% до 18,4% (р<0,01), при зменшенні кількості Т-супресорів з 11,0% до 9,3% (р<0,05), зростають вміст імуноглобуліну М на 8,3% (р<0,05) і лізоцимна активність з 7,5% до 8,7% (р<0,05). У корів старших вікових груп (особливо у корів шостої вагітності) спостерігається пригнічення імунної відповіді - зменшення кількості Т-хелперів у 1,78 рази (р<0,05) на фоні зростання Т-супресорів у 2,40 рази (р<0,01). Застосування з профілактичною метою прополісу в дородовий період призводить до збільшення основних показників імунобіологічної реактивності-вмісту ?-глобулінів (у 1,42 рази, р<0,05), каротину (в 1,97 рази, р<0,01), лейкоцитів (у 1,39 рази, р<0,05), лімфоцитів (у 1,47 рази, р<0,01). Застосування прополісу разом з гідрогуматом в ранній післяродовий період сприяло зростанню вмісту глобулінів (у 1,37 рази, р<0,01) за рахунок ?-глобулінів (у 1,42 рази, р<0,01), ?-глобулінів (у 1,68 рази, р<0,01), ?-глобулінів (у 1,25 рази, р<0,05), каротину (в 1,38 рази, р<0,05), кількості лімфоцитів за рахунок Т-загальних лімфоцитів, особливо Т-хелперів і Т-активних лімфоцитів на фоні збільшення “0”-лімфоцитів, імуноглобулінів G і М та бактерицидної активності.
Вывод
1. У дисертаційній роботі наведене теоретичне узагальнення і нове вирішення наукового завдання, що полягає у вивченні особливостей біохімічного, гематологічного і імунологічного статусу високопродуктивних корів різного фізіологічного стану та обґрунтуванні питань профілактики післяродового гнійно-катарального ендометриту при застосуванні коровам голштинської породи імуномодуляторів: прополісу та прополісу разом з гідрогуматом у сухостійний та ранній післяродовий періоди.
2. У динаміці сухостійного періоду у корів голштинської породи знижуються показники білкового обміну, одночасно підвищуються імунологічні показники: збільшується кількість В-лімфоцитів з 14,3% до 18,4% (р<0,01), при зменшенні кількості Т-супресорів з 11,0% до 9,3% (р<0,05), зростають вміст імуноглобуліну М на 8,3% (р<0,05) і лізоцимна активність з 7,5% до 8,7% (р<0,05).
3. Імунологічний статус голштинських корів змінюється з віком, при цьому з другої до четвертої тільності спостерігається зниження біохімічних і імунологічних показників: загального білка за рахунок глобулінової фракції, кількості В-лімфоцитів, імуноглобулінів G і М. У корів старших вікових груп (особливо у корів шостої вагітності) спостерігається пригнічення імунної відповіді - зменшення кількості Т-хелперів у 1,78 рази (р<0,05) на фоні зростання Т-супресорів у 2,40 рази (р<0,01).
4. Виявлені сезонні коливання показників біохімічного, гематологічного і імунологічного статусу глибокотільних корів голштинської породи. В зимово-весняний період спостерігали зниження, порівняно з літнім періодом, вмісту глобулінів (за рахунок a-, b- та g-глобулінів), каротину, кількості Т- і В-лімфоцитів та бактерицидної активності сироватки крові. Погіршення фізіологічного стану та резистентності сприяло зростанню рівня захворюваності на ендометрит в зимово-весняний період у 1,30 рази (р<0,05).
5. Гострий гнійно-катаральний ендометрит обумовлює суттєві зміни морфо-біохімічного складу крові та всіх досліджених ланок природної резистентності. У хворих корів спостерігається статистично вірогідне зменшення порівняно зі здоровими вмісту альбумінів (у 1,18 рази, р<0,05) на фоні збільшення усього спектру глобулінів (у 1,20 рази, р<0,01), кислотної ємності (у 1,32 рази, р<0,01). Зниження імунобіологічної реактивності організму хворих корів порівняно зі здоровими характеризується зменшенням кількості Т-загальних лімфоцитів на фоні збільшенням “0”-лімфоцитів, зниженням бактерицидної активності сироватки крові.
6. Корови, які після родів захворіли на ендометрит, в дородовий період на фоні клінічного благополуччя за рядом імунологічних показників мали суттєві відмінності, що дозволяє провести раннє виявлення (за місяць до отелення) схильних до ендометриту корів і враховувати при складанні плану профілактичних заходів проти післяродових захворювань.
7. Застосування з профілактичною метою прополісу в дородовий період призводить до збільшення основних показників імунобіологічної реактивності -вмісту ?-глобулінів (у 1,42 рази, р<0,05), каротину (в 1,97 рази, р<0,01), лейкоцитів (у 1,39 рази, р<0,05), лімфоцитів (у 1,47 рази, р<0,01). Імуномодулююча дія прополісу на фактори клітинної та гуморальної ланок імунітету виявлялася у збільшенні кількості Т-загальних лімфоцитів (у 1,54 рази, р<0,01), В-лімфоцитів (у 1,21 рази, р<0,05), вмісту імуноглобуліну G і М (в 1,15, р<0,05 і 1,22 рази, р<0,01) та бактерицидної активності сироватки крові (в 1,95 рази, р<0,01).
8. Застосування прополісу разом з гідрогуматом в ранній післяродовий період сприяло зростанню вмісту глобулінів (у 1,37 рази, р<0,01) за рахунок ?-глобулінів (у 1,42 рази, р<0,01), ?-глобулінів (у 1,68 рази, р<0,01), ?-глобулінів (у 1,25 рази, р<0,05), каротину (в 1,38 рази, р<0,05), кількості лімфоцитів за рахунок Т-загальних лімфоцитів, особливо Т-хелперів і Т-активних лімфоцитів на фоні збільшення “0”-лімфоцитів, імуноглобулінів G і М та бактерицидної активності.
9. При застосуванні прополісу з метою підвищення резистентності та профілактики післяродових ускладнень у глибокотільних корів, а також сумісному застосуванні прополісу та гідрогумату економічна ефективність на гривню витрат становить відповідно 10,89 грн. та 5,58 грн.
ПРОПОЗИЦІЇ ВИРОБНИЦТВУ
1. При плановому проведенні акушерсько-гінекологічної диспансеризації маточного поголівя високопродуктивних голштинських корів одночасно з морфо-біохімічними дослідженнями крові пропонується проводити і імунологічні дослідження показників клітинної та гуморальної ланок імунітету. Зниження Т- і В-лімфоцитів і їх субпопуляцій (на 10-15%), зростання “0”-лімфоцитів (до 50%) та зниження вмісту імуноглобулінів G (на 7-10%) використовувати як прогностичний тест для виявлення корів, схильних до ендометриту, та своєчасного проведення профілактичних заходів.
2. Для дородової профілактичної терапії корів, схильних до захворювання на гострий гнійно-катаральний ендометрит, рекомендуємо застосовувати прополіс у вигляді 10%-вого масляного розчину внутрішньомязово у кількості 8 мл одноразово на добу, тричі, з інтервалом у чотири доби, а в ранній післяродовий період (на другий день після родів) - сумісне застосування прополісу у вигляді 10%-вої емульсії в кількості 4 мл одноразово на добу впродовж 3 діб внутрішньоматково разом з пероральним введенням 10%-вого водного розчину гідрогумату в дозі 50 мг/кг одноразово на добу впродовж 6 діб.
3. Одержані результати досліджень пропонуємо використовувати в навчальних програмах для студентів вищих навчальних закладів ветеринарного та біологічного профілю з курсу „Фізіологія тварин”, „Ветеринарна імунологія”, „Фармакологія”.
Список литературы
1. Дуда Ю. В. Сезонна динаміка імунологічних показників крові корів голштинської породи //Науковий вісник Львів. держ. акад. вет. медицини ім. С.З. Гжицького. - Львів, 2003. - Вип.5 (№4). - С. 46-49.
2. Грибан В.Г., Дуда Ю.В., Сєдих Н.Й Імунний стан корів в сухостійний період //Наук.-техн. бюлетень Ін-ту біол. тварин УААН. - Львів, 2004. - Вип.5 (№3). - С. 264-267. (Дисертантом проведені лабораторні дослідження, аналіз одержаних результатів, підготовлено статтю до друку).
3. Грибан В.Г., Дуда Ю.В., Сєдих Н.Й. Показники імунного стану у корів при профілактичному застосуванні прополісу та гідрогумату у ранній післяродовий період //Науковий вісник НАУ. - К., 2004. - Вип.78. - С. 59-63. (Дисертантом проведено лабораторні дослідження крові корів, узагальнення одержаних результатів, написання статті).
4. Грибан В.Г., Дуда Ю.В., Сєдих Н.Й.Вплив прополісу та гідрогумату на показники імунного стану корів у сухостійний період //Науковий вісник Львів. держ. акад. вет. медицини ім. С.З. Гжицького. - Львів, 2004. - Вип.6 (№3). - Ч.1. - С. 75-81. (Дисертантом проведені лабораторні дослідження, аналіз одержаних результатів, підготовлено статтю до друку).
5. Короленко Л.С., Грибан В.Г., Степченко Л.М., Касьян С.С., Баранченко В.О., Сєдих Н.Й., Чумак В.О., Масюк Д.М., Крива О.А., Сухіна Н.В., Сухін В.М., Гаращук М.І., Дуда Ю.В., Єфімов В.Г., Ракитянський В.М., Лосєва Є.О., Скорик М.В., Жорина Л.В., Сагайдак Л.П. Рекомендації по використанню біологічно активних речовин гумусової природи та продуктів бджільництва в тваринництві та птахівництві. - Дніпропетровськ, 2004. - 13 с. (Дисертантом написано два розділи, систематизовано матеріали).
6. Грибан В.Г., Дуда Ю.В., Сєдих Н.Й. Сезонні відмінності біохімічних показників крові у глибокотільних корів голштинської породи //Тр. междунар. наук.-практичн. конф. “І.М.Сєченов и одеська школа фізіологів”. - Одеса, 2004. - С. 127-129.
7. Дуда Ю.В., Седых А.И., Юткина И.В., Седых Н.И. Активность трансаминаз и показатели белкового обмена у сухостойных коров разного возраста //Тр. междунар. наук.-практичн. конф. “Актуальные проблемы ветеринарной медицины и зоотехнии”. - Витебск, 2004. - С. 18-19.
Дуда Ю.В. Особливості природної резистентності корів голштинської породи різного фізіологічного стану за впливу біологічно активних речовин (прополісу та гідрогумату) - Рукопис.
Дисертація на здобуття наукового ступеня кандидата ветеринарних наук за спеціальністю 03.00.13 - фізіологія людини і тварин. Національний аграрний університет, Київ, 2005.
Дисертація присвячена вивченню імунобіологічного статусу високопродуктивних корів різного фізіологічного стану та обґрунтуванню питань профілактики післяродового гнійно-катарального ендометриту при застосуванні коровам голштинської породи імуномодуляторів: прополісу та прополісу разом з гідрогуматом у сухостійний та ранній післяродовий періоди.
В роботі показано, що в динаміці сухостійного періоду у корів голштинської породи знижуються показники білкового обміну, одночасно зростають імунологічні показники. Виявлено сезонні і вікові коливання показників біохімічного, гематологічного і імунологічного статусу глибокотільних корів; сезонний мінімум спостерігався в зимово-весняний періоди, віковий - з другої по четверту та на шостій тільностей.
Зясовано, що у корів, хворих на ендометрит, і у глибокотільних корів, схильних до нього, спостерігається зниження імунобіологічної реактивності організму.
Установлено, що застосування з профілактичною метою імуномодулятору прополісу в дородовий період, а сумісне застосування прополісу з гідрогуматом в ранній післяродовий період призводять до покращення показників білкового обміну, клітинного та гуморального імунітету і неспецифічної резистентності.
Результатами досліджень доведено, що імунологічні обстеження глибокотільних корів дозволяють провести раннє виявлення схильних до ендометриту тварин, а розроблені схеми профілактики - знизити частоту післяродових ускладнень.
Дуда Ю.В. Особенности естественной резистентности коров голштинской породи различного физиологического состояния под влиянием биологически активных веществ (прополиса и гидрогумата) - Рукопись.
Диссертация на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук по специальности 03.00.13 - физиология человека и животных. Национальный аграрный университет, Киев, 2005.
Диссертация посвящена изучению особенностей биохимического, гематологического и иммунобиологического статуса высокопродуктивных коров различного физиологического состояния и обоснованию вопросов профилактики послеродового гнойно-катарального эндометрита при введении коровам голштинской породы иммуномодуляторов: прополиса и прополиса вместе с гидрогуматом в сухостойный и ранний послеродовой периоды.
В работе показано, что в динамике сухостоя у коров голштинской породы снижаются показатели белкового обмена: содержание общего белка на 6,5% (р<0,05), глобулинов на 15,8% (р<0,05), g-глобулинов на 19,5% (р<0,01), одновременно повышаются иммунологические показатели: увеличивается количество В-лимфоцитов с 14,3% до 18,4% (р<0,01), содержание иммуноглобулина М на 8,3% (р<0,05), лизоцимная активность с 7,5% до 8,7% (р<0,05) приуменьшении количества Т-супрессоров с 11,0% до 9,3% (р<0,05).
Выявленные сезонные и возрастные колебания показателей биохимического, гематологического и иммунологического статуса глубокостельных коров. При этом со второй по четвертую стельности наблюдается снижение биохимических и иммунологических показателей: общего белку за счет глобулиновых фракций, количества В-лимфоцитов, иммуноглобулинов G и М. У коров старших возрастных групп (особенно у коров шестой беременности) наблюдается угнетение иммунного ответа - уменьшение количества Т-хелперов в 1,78 раза (р<0,05) на фоне роста Т-супрессоров (в 2,40 раза, р<0,01). В зимне-весенний период наблюдали низкие, относительно летнего периода, показатели содержания глобулинов (за счет a-, b- и g-глобулинов), каротина, Т- и В-лимфоцитов и бактерицидной активности.
Выяснено, что у коров, больных острым гнойно-катаральным эндометритом, наблюдается снижение иммунобиологической реактивности организма, что характеризуется уменьшением количества Т-лимфоцитов (до 55,50% против 60,69%, р<0,05) за счет всех субпопуляций, увеличением “0”-лимфоцитов (до 23,33% против 17,93%, р<0,01), а также снижением бактерицидной активности (до 42,62% против 53,04%, р<0,01). В дородовый период у коров, которые после родов заболели на эндометрит (предрасположенные к заболеванию), наблюдались существенные отличия ряда иммунологических показателей от таковых у здоровых животных: ниже количество Т-лимфоцитов (до 58,78% против 62,27%, р<0,05), В-лимфоцитов (до 21,13% против 23,83%, р<0,05), Т-активных лимфоцитов (до 45,61% против 52,07%, р<0,05) при росте “0”-лимфоцитов (до 20,09 против 13,90%, р<0,01).
Установлено, что применение с профилактической целью прополиса в дородовый период приводит к увеличению содержания общего белка (в 1,08 раза, р<0,05), ?-глобулинов (в 1,42 раза, р<0,05), каротина (в 1,97 раза, р<0,01), количества эритроцитов (в 1,24 раза, р<0,01), гемоглобина (в 1,17 раза, р<0,05), лейкоцитов (в 1,39 раза, р<0,05), лимфоцитов (в 1,47 раза, р<0,01). Иммуномодулирующее действие прополиса на факторы клеточного и гуморального звена иммунитета проявилось в увеличении количества Т-общих лимфоцитов (в 1,54 раза, р<0,01) за счет всех популяций (особенно Т-хелперов и Т-активных в 1,80 раза, р<0,01), В-лимфоцитов (в 1,21 раза, р<0,05), иммуноглобулинов G и М (в 1,15 раза, р<0,05 и 1,22 раза, р<0,01 соответственно) и бактерицидной активности (в 1,95 раза, р<0,01).
Доказано, что совместное применение прополиса вместе с гидрогуматом в ранний послеродовой период приводит к увеличению содержания глобулинов (в 1,37 раза, р<0,01) за счет ?- глобулинов (в 1,42 раза, р<0,01), ?- глобулинов (в 1,68 раза, р<0,01), ?- глобулинов (в 1,25 раза, р<0,05), каротина (в 1,38 раза, р<0,05), общего кальция (в 1,23 раза), неорганического фосфора (в 1,24 раза), количества лимфоцитов за счет Т-общих лимфоцитов, особенно Т-хелперов и Т-активных лимфоцитов на фоне увеличения “0”-лимфоцитов, иммуноглобулинов G и М и бактерицидной активности.
Выяснено, что экономическая эффективность на гривну затрат при введении прополиса сухостойным коровам, а также совместном применении прополиса и гидрогумата в ранний послеродовой период составляет 10,89 грн. и 5,58 грн. соответственно.
Результатами исследований доказано, что иммунологическое обследование глубокостельных коров позволяет провести раннее выявление склонных к эндометриту животных, а разработанные схемы иммунопрофилактики - снизить частоту послеродовых осложнений.
Duda Y.V. The features of natural resistance of Golstein breed cows in different physiology state with an influence of biologically active matters (propolis and hydrohumate) - Manuscript.
Thesis for the obtaining the Doctor of Philosophy scientific degree on speciality 03.00.13 - human and animal physiology. National Agricultural University, Kyiv, 2005.
Dissertation is devoted to the study of immunobiological status of the cows inclined to postnatal sharp festering-catarrhal endometritis development, its correction under act of biologically active matters (propolis and hydrohumate) and development of charts of their application for the prophylaxis of postnatal complications. It is shown in thesis, that in the dynamics of dry period at the measles of Golstein breed indexes of protein metabolism go down, at the same time immunological indexes rise. Seasonal and age-old index changes of biochemical, hematological and immunological status of pregnant cows are exposed; a seasonal minimum was observed in a winter-spring period; age-old - from the second to fourth and on sixth pregnancy.
It is founded out, that cows which are sick on endometritis, and pregnant cows, which are inclined to it, there is the decline of organism immunobiological reactivity.
It was also founded out, that application with a prophylactic purpose of immunomodulator propolis in a prenatal period, and compatible application of propolis with hydrohumate in an early postnatal period is brought to the indexes improvement of protein metabolism, cellular and humoral immunity and unspecific resistance.
It was proved by the results of researches, that the immunological inspections of pregnant cows allow to conduct the early exposure of endometritis inclined animals, and the developed charts of immunoprophylaxis could prevent the development of postnatal complications.
Keywords: pregnant cow, indexes of cellular and humoral immunity, postnatal endometritis, prophylaxis, immunomodulator, propolis, hydrohumate.