Клінічна картина цукрового діабету різних типів. Дослідження впливу експериментального цукрового діабету на експресію TLR2 і TLR4 адипоцитами парапанкреатичної клітковини у щурів лінії Вістар. Оцінка наслідків введення метформіну діабетичним щурам.
Аннотация к работе
Изучено влияние блокирования циклооксигеназы в условиях водно-иммобилизационного стресса на изменение показателей NO-синтазной системы, процессов липопероксидации и состояние микрофлоры в тонкой и толстой кишках. Блокирование циклооксигеназы напроксеном на фоне водно-иммобилизационного стресса сопровождалось снижением активности INOS в тонкой и толстой кишках сравнительно с показателями стресса, одновременно усиливалась активность CNOS в толстой кишке. In experiments on rats with modeled water-restrained stress it was studied the influence of nonsteroidal anti-inflammatory drugs on changes of NO-synthase system parameters, processes of lipoperoxidation and the status of microflora in small and large intestines. Cyclooxygenese blockage with naproxen prior to water-restrained stress model was accompanied by the decrease of INOS in small and large intestines with the synchronous rise of CNOS activity in the large intestine as compared with indexes in stress. Тварини були розділені на 5 експериментальних груп по 12 щурів: контрольні щури, яким одноразово внутрішньочеревно вводили 0,5 мл 0,1 М цитратного буферу (РН = 4,5) (група 1); щури з 3-тиж-невимекспериментальнимстрептозотоцин-індукованим діабетом (ЕЦД1) (група 2); щури з 3-тижневим експе-риментальнимстрептозотоцин-нікотинамід-індукованим діабетом (ЕЦД2) (група 3); щури з 3 тижневим ЕЦД1 (група 4) та ЕЦД2 (група 5), яким в/ш щоденно на про-тязі 3тижнів вводили метформін в дозі 50 мг/кг починаючи з 1 дня індукції діабету.
Список литературы
Andrews M. Effect of metformin on the - P. 423-436. streptozotocin and nicotinamide / P. expression oftumor necrosisfactor-?, Chi H. Regulation and function of Masiello,C.Broca,R. Gross et al. //J. Toll like receptors 2/4 and C reactive MTORSIGNALLING INTCELLFATEDECISIONS Diabetes.-1998.Feb.-Vol.224.-P.9. proteininobesetype-2diabeticpatients /H.Chi//J.NATREVIMMUNOL.-2012. FEUERERM.FATTREGCELLS:aliaisonbetween /M.Andrews,N.Soto,M.Arredondo/ Apr. - Vol. 325. - P. 38. the immune and metabolic systems / / Rev. Med. Chil. - 2012. - Vol. 140. - Culina S. Insulin and type 1 diabetes: M.Feuerer,L.Herrero,D.Cipolletta//J. P.1377-1382. immune connections / S. Culina, V. Nat Med.- 2009.August.15.- P.930-
Caspar-Bauguil S. Adipose tissue Brezar,R.Mallone//Eur.J.Endocrinol. 939. lymphocytes: types and roles / S. - 2013.- Vol.17. - P. 19-31. Hardie D. AMPK : a target for drugs and Caspar-Bauguil, B. Cousin, S. Bour // EXPERIMENTALNIDDM:developmentofanew natural products with effects on both J.Physiol. Biochem. - 2009.- Vol. 65. model in adult rats administered diabetes and cancer / D. Hardie // J.
124
“BIOMEDICAL AND BIOSOCIAL ANTHROPOLOGY” 2014,№22
ORIGINAL ARTICLES
Diabetes.-2013.Jul.62.-Vol.2164.- human vascular wall cells / K. Isoda, role of adipose tissue innate immune P.72. J.L. Young, A. Zirlik et al. // J. systemreceptors/V.Shvarts//J.Patol. Jacob A.Thevisceralandsubcutaneousfat Arterioscler.Thromb.Vasc.Biol.-2006. Fiziol. Eksp. Ter. - 2010. Jul-Sep. - P. changesintype1diabetes:apilotstudy Mar. 26. - Vol. 611. - P. 7. 45-51.
/A.Jacob,B.Adams-Huet,P.Raskin/ MTOR, linking metabolism and immunity SZKUDELSKIT.Streptozotocin-nicotinamide-/J.Diabetes.Obes.Metab.-2006.Sep. / X. Xu, L. Ye, K. Araki et al. // J. induced diabetes in the rat. 8. -Vol. 524. - P. 30. SEMINIMMUNOL. - 2012. Dec. - Vol. Characteristics of the experimental
JIALALI.Toll-likereceptorstatusinobesityand 429. - P. 35. model / T. Szkudelski // J. Exp. Biol. metabolic syndrome: a translational POWELLJ.D.Regulationofimmuneresponses Med. (Maywood). - 2012. May. - Vol. perspective/I.Jialal,H.Kaur,S.Devaraj by MTOR / J.D. Powell, K.N. Pollizzi, 481. - P. 90.
// J. Clin. Endocrinol. Metab. - 2014. E.B. Heikamp et al. // Annu. Rev. TLR4 links innate immunity and fatty acid-Jan. - Vol. 99. - P. 39-48. Immunol. - 2012. - P. 30, 39-68. induced insulin resistance / H. Shi, Jin C. Innate immune receptors: key Procaccini C. Obesity and susceptibility to M.V. Kokoeva, K. Inouye et al. // J. regulators of metabolic disease autoimmune diseases/ C. Procaccini, Clin.Invest.-2006.Nov.- Vol.3015.-progression / C. Jin, J. Henao-Mejia, F.Carbone,M.Galgani//J.EXPERTREV. P. 25.
R.Flavell//J.CELLMETAB.-2013.Jun. Clin. Immunol. - 2011. May. - Vol. Toll-like receptor 2/4 links tofreefatty acid- Vol. 873. - P. 82. 287. - P. 94. induced inflammation and ?-cell dys-
Kaminski D. Adaptive immunity and RUSSOG.L.AMP-activatedproteinkinase:a function / J. Yin, Y. Peng, J. Wu et al. / adiposetissuebiology/D.Kaminski,T. targetforolddrugsagainstdiabetesand /J.Leukoc.Biol.-2014.Jan.-P.47-52. Randall // J.TRENDSIMMUNOL.- 2010. cancer / G.L. Russo, M. Russo, P. Tsukumo D. Loss-of-function mutation in Octob.31.-P.384-390. Ungaro // J. Biochem. Pharmacol. - Toll-likereceptor4preventsdiet-induced KOENENT.Theinflammasomeandcaspase- 2013. Aug. - Vol. 339. - P. 50. obesity and insulin resistance / D. 1 activation: a new mechanism SABERIM.Hematopoieticcell-specificdeletion Tsukumo, M. Carvalho-Filho, J. underlying increased inflammatory oftoll-likereceptor4ameliorateshepatic Carvalheira//J.Diabetes.-2007.Aug. activityinhumanvisceraladiposetissue andadiposetissueinsulinresistancein - Vol. 1986. - P. 98.
/ T.Koenen,R.Stienstra, L.van Tits// high-fat-fedmice/M.Saberi,N.Woods, WAICKMANA.T.MTORMETABOLISM,andthe J. Endocrinology. - 2011. Oct. - Vol. C. de Luca // J. Cell Metab. - 2009. regulation of T-cell differentiation and 3769. - P. 78. Nov.- Vol.419.- P. 29. function / A.T. Waickman, J.D. Powell
Kopp A. Innate immunity and adipocyte Sch?ffler A. Innate immunity and adipose // J. Immunol. Rev. - 2012. Sep. - P. function: ligand-specific activation of tissue biology / A. Sch?ffler, J. 43-58.
MULTIPLETOLL-likereceptorsmodulates Sch?lmerich // J. Trends Immunol. - WATANABEY.Activationandregulationofthe cytokine, adipokine, and chemokine 2010. Jun. - Vol. 228. - P. 35. patternrecognitionreceptorsinobesity-secretion in adipocytes / A. Kopp, C. Short-term treatment with metformin induced adipose tissue inflammation Buechler,M.Neumeier//J.Obesity.- suppresses toll like receptors (TLRS) and insulin resistance / Y. Watanabe, 2009. Apr. 17. - Vol. 648. - P. 56. activity in isoproterenol-induced Y. Nagai, K. Takatsu // J. Nutrients. -
MATARESEG.ATTHECROSSROADOFTCELLS,adipose myocardial infarction in rat: are AMPK 2013.Sep. - Vol. 3757.- P. 78. tissue, and diabetes / G. Matarese, C. and TLRS connected? / H. Soraya, S. Yang K. MTOR and metabolic pathways in Procaccini, V. De Rosa // J. Immunol Farajnia, S. Khani et al. // J. T cell quiescence and functional Rev.- 2012.Sep. - Vol.116.- P. 34. INTIMMUNOPHARMACOL. - 2012. Dec. - activation / K. Yang, H. Chi // J.
Metformin inhibits proinflammatory Vol. 785.- P. 91. SEMINIMMUNOL. - 2012. Dec. - Vol. responsesandnuclearfactor-KAPPABIN Shvarts V. Physiological and pathological 421. - P. 8.
ОСОБЕННОСТИ ЭКСПРЕССИИ TLR2 И АДИПОЦИТАМИ ПАРАПАНКРЕАТИЧЕСКОЙ КЛЕТЧАТКИ ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМ САХАРНОМ ДИАБЕТЕ
Резюме. Исследовано влияние экспериментального сахарного диабета на экспрессию TLR2 и TLR4 адипоцитами парапанкреатической клетчатки у крыс линии Вистар. Установлено, что развитие ЕСД увеличивало количество TLR2 - и TLR4 -адипоцитов и преимущественно повышало плотность TLR2 - и TLR4 - рецепторов на их мембране. Введением метформина диабетическим крысам снижали общее количество TLR2 -адипоцитов на 16 % (ЕСД1) - 22 % (ЕСД2), TLR4 -адипоцитов на 36 % (ЕСД1), сопровождались уменьшением плотности TLR2 - и TLR4 - рецепторов на поверхности жировых клеток. Ключевые слова: экспериментальный сахарный диабет, адипоцит, TLR2, TLR4.
THE PECULIARITIES OF THE EXPRESSION OF TLR2 AND TLR4 ADIPOCYTES OF PARAPANCREATIC CONNECTIVE TISSUE OF EXPERIMENTAL DIABETES MELLITUS
Summary. It is researched the influence of experimental diabetes mellitus on the expression of TLR2 and TLR4 by adipocytes of parapancreatic fibrous in the rats of Wistar line. It is detected that the development of EDM increased the number of TLR2 - and TLR4 -adipocytes and increased the density TLR2 - and TLR4 - receptors on their membran. The introduction of metformin to the diabetic rats reduced the general number of TLR2 - adipocytes in 16 % (EDM1) - 22 % (EDM2), TLR4 - adipocytes in 36 % (EDM1) accompanied by the decrease of the density TLR2 - and TLR4 - receptors of the surface of adipose cells.
Камишний Олександр Михайлович - д.мед.н., доцент, зав. каф. мікробіології, вірусології і імунології ЗДМУ; 38 0612 34-26-31; alexkamyshny@yandex.ru
Коновалова Ольга Олександрівна - магістр по лабораторній діагностиці, ст. лаб. каф. мікробіології, вірусології і імунології ЗДМУ; 38 0612 34-26-31
Камишна Вікторія Анатоліївна - к.мед.н., ст. викладач каф. анатомії людини з курсом оперативної хірургії і топографічної анатомії ЗДМУ; 38 0612 34-25-31
Вінницький національний медичний університет імені М.І. Пирогова, кафедра хірургії медичного факультету №2 (вул. Пирогова, 56, м. Вінниця, Україна, 21018)
ВTRIALШНЬОКЛІТИННИЙ РОЗВИТОК ЗБУДНИКА ТУБЕРКУЛЬОЗУ В СИСТЕМІ КРОВІ
Резюме. Туберкульоз на сьогодні є актуальною медико-соціальною проблемою не тільки в Україні, а й в усьому світі. Новий методдіагностики базується назастосуваннімікроскопіїмазкакровітавиявлення в системікрові стадій розвитку збудникатуберкульозу,ав разінеобхідностіпроводяться бактеріологічнідослідження кровізвикористаннямсередовища ВЛАКОН,наякомурістколонійможнаотриматиза2-Здоби.Метоюнашихдосліджень булоудосконалення експрес-методу виявлення збудника туберкульозу в системікровіз використанням цифровоїмікроскопії. Дослідження проведенона50 кроляхпороди Шиншила.Вдосліднугрупувідібрано40кролів,в якихвикликанаекспериментальнамодель туберкульозу. Вконтрольнувідібрано10кролів,якимнічогоневводилось.Проводиласьцифровасвітловамікроскопія зразків крові.При мікроскопії мазка в різні періоди зараження у полі зору мікроскопу з"являлись різні агенти стадій розвитку мікобактерії у виглядіартроспор,молекутів,коків,паличок,зеброподібнихстебел.Молекутзбудникатуберкульозув еритроцитіпочинає розвиватися,утворюючикокоподібніформивсерединіеритроцита,асамеритроцитзбільшується,набираючиокруглоїфор-ми.Проникнення веритроцитмолекутаможепризвестидоутворення гігантськихеритроцитіввсерединіякихрозвивається коковиднаформазбудникатуберкульозу.
Туберкульоз на сьогодні є актуальною медико-соціальною проблемою не тільки в Україні, а й в усьому світі. Щорічно у світі виявляється від 7 до 10 млн. хворих на туберкульоз осіб, помирає 2,5 - 3 млн. Загальна кількість хворих становить 50 - 60 млн. Туберкульоз займає перше місце в структурі смертності від інфекційних та паразитарних хвороб [Толстанов, 2001; Колос та ін., 2006]. Під впливом антибактеріальної терапії, яка проводиться у хворих на туберкульоз, мікобактерія туберкульозу (МБТ) із типових форм трансформуються в інші, в тому числі в ті, які фільтруються. Ці морфологічні форми з новими біологічними властивостями зберігають вірулентність, вони спроможні затримати одужання хворогоабо ж спричинити рецидив захворювання. Дослідники дотримуються думки про те, що існуючі методи мікроскопічноїдіагностики малоефективні внаслідок ол-ігобацилярності патологічного матеріалу, а наявність у хворих клінічних ознак туберкульозу при негативних бактеріоскопії та посіві вимагає допоміжних методів дослідження для виявлення змінених форм збудника [Мельниктаін.,2006].Новий методдіагностики базується на застосуванні мікроскопії мазка крові та виявлення в системі крові стадій розвитку збудника туберкульозу, а в разі необхідності проводяться бактеріологічні дослідження крові з використанням середовища ВЛАКОН, на якому ріст колоній можна отримати за 2 - 3 доби [Власенко, Багрий, 2001].
Метою наших досліджень було удосконалення експ-
126
рес-методу виявлення збудника туберкульозу в системі крові з використанням цифрової мікроскопії.
Матеріали та методи
Дослідження проведено на 50 кролях породи Шиншила, відібраних у трьох місячному віці і розподілених на дві групи (контрольну і дослідну). В дослідну групу відібрано 40 кролів, в яких викликанаекспериментальна модель туберкульозу з внутрішньоперитоніальним введенням в масляному розчині біокультур Mycobacterium bovis в дозі 0,1 мг/мл, при якій зберігається можливість для персистенції мікобактерій. В контрольну відібрано 10 кролів,якимнічогоневводилось.Досліди проведенізгідно наказу від 01.03.2012 р Міністерства освіти і науки, молоді і спорту України №249 "Про затвердження порядку проведення науковими установами дослідів, експериментів натваринах".Контрольних і дослідних тварин утримували в клітках, догляд і годівля були аналогічними, за тваринами постійно проводився моніторинг. З вушної вени кролів обох груп набиралась кров через 10 днів від початку зараження,120днів відпочаткуексперименту.Проводилась цифровасвітловамікроскопія нативних нефарбованих зразків крові (роздавлена крапля) з використанням системи світлових фільтрів для кращої візуалізації та зразки крові фіксувались, окрашувались по Ро-мановському-Гімзе. Мікроскопія проводилась на біологічному мікроскопі Konus Biorex-3 з цифровою фотокамерою DCM 500 з розрішенням 5 Мп., зб. x1000.