Химическое исследование и проведение анализа на определенное вещество или группу веществ. Метод изолирования подкисленным спиртом, его современная модификация и применение для алкалоидов. Идея изолирования водой, подкисленной щавелевой кислотой.
Аннотация к работе
В зависимости от поставленной перед экспертом-химиком задачи, судебно-химическое исследование может носить общий или частный характер, т.е. анализ может быть ненаправленным (общим) или направленным (частным). При частном исследовании метод изолирования подбирается с учетом физико-химических свойств того соединения (или группы соединений), на которое производится анализ. Общий анализ включает исследование на несколько групп веществ (3 группы), подлежащих обязательному судебно-химическому исследованию, в том числе и на группу "нелетучих" ядов.Самый первый метод изолирования подкисленным спиртом, названный по имени авторов метода Стаса-Отто, применялся только для алкалоидов. В дальнейшем это метод претерпел серьезные изменения и стал использоваться не только для алкалоидов, но и для многих других ядовитых и сильнодействующих веществ, имеющих токсикологическое значение. • Упаривание объединенных спиртовых извлечений при температуре 40 - 50 0С до густого остатка, в который по каплям добавляют абсолютный этанол для коагуляции белков. • Подщелачивание оставшегося после разделения фаз водного слоя до РН 9 - 10, экстрагирование веществ сильноосновного характера (трехкратная экстракция) хлороформом, отделение органической фазы и концентрирование упариванием (фракция Б, "щелочное" извлечение). • Изолирование "нелетучих" ядов из биологического материала подкисленным спиртом (метод Стаса-Отто) проводится по следующей схеме.Макадам предложил для подкисления воды использовать щавелевую кислоту, в 1861 г. В 1942 - 1943 г.г. Степановым А.В. и Швайковой М.Д. был предложен метод изолирования алкалоидов из объектов растительного происхождения водой, подкисленной щавелевой кислотой (ускоренный метод). Схема изолирования по методу Васильевой заключается в следующем: • Настаивание измельченного объекта с водой, подкисленной щавелевой кислотой до РН = 2 - 3, в течение двух часов. Подщелачивание оставшегося после разделения фаз водного слоя раствором аммиака до РН 9 - 10, экстрагирование веществ основного характера трехкратной экстракцией хлороформом, отделение органической фазы и концентрирование упариванием (фракция Б, "щелочное" извлечение). По сравнению с изолированием подкисленным спиртом извлечение водой, подкисленной щавелевой кислотой, обладает рядом преимуществ: 1.Измельченную навеску биологического материала массой 5 г экстрагируют 10 мл ацетона в течение 10 минут, центрифугируют. Полученное извлечение сливают, операцию экстрагирования ацетоном повторяют еще 2 раза по 5 мл. К объединенному извлечению добавляют 20 мл 0,5 М. раствора хлористоводородной кислоты, перемешивают и экстрагируют гексаном дважды. Из очищенного водно-ацетонового извлечения (РН=1) эфиром экстрагируют вещества кислотного характера. Далее водно-ацетоновую фазу подщелачивают аммония гидроксидом до РН=9, добавляют 5 г натрия хлорида (высаливающий агент) и экстрагируют вещества основного характера эфиром.В подавляющем большинстве случаев они имеют в своем составе различные наполнители и добавки (сахар, соли жирных кислот, крахмал, сода, тальк и др.), либо содержат загрязнения или промежуточные и побочные продукты синтеза, содержание же наркотически активного компонента в таких препаратах очень низкое. Решение такого рода проблем возможно при применении на стадии пробоподготовки метода твердофазной экстракции, позволяющего осуществлять одновременное разделение, выделение и концентрирование целевых компонентов из биологических жидкостей и их экстрактов, лекарственных и нативных наркотических средств. Такой подход дает возможность получения веществ в чистом виде, что в дальнейшем позволяет проводить идентификацию методами ИК-, УФ - спектроскопии, ТСХ, ГЖХ, ВЭЖХ, методом хромато-масс-спектрометрии. В основе метода твердофазной экстракции лежит принцип колоночной хроматографии, который основан на специфическом взаимодействии выделяемого из биоматериала компонента с сорбентом, находящимся в небольшом патроне. Патрон - картридж имеет полиэтиленовую оболочку, внутри которой находится сорбент, упакованный между двумя пористыми фильтрами.Частный метод изолирования алкалоидов водой, подкисленной серной кислотой (по В.Ф. Метод был разработан Львовской школой судебных химиков под руководством заведующего кафедрой аналитической и токсикологической химии Львовского медицинского института проф. В 1956 - 62 г.г. целый ряд работ химиков этой школы был посвящен влиянию РН среды, природы экстрагента и присутствия в водной фазе электролита на эффективность изолирования алкалоидов из биоматериала. Схематично метод можно представить из следующих этапов: • Настаивание измельченного объекта с водой, подкисленной 20% раствором кислоты серной до РН =2-3, в течение двух часов. Разработанный вначале для алкалоидов, метод применим и для изолирования других азотсодержащих веществ основного характера (синтетических лекарственных средств).