Разработка способа выделения эффективных бактериоцинов из культуральной жидкости, идентификация новых антибиотических комплексов. Метод получения новых гибридных штаммов L. lactis subsp. lactis с помощью метода клеточной инженерии - слияния протопластов.
Аннотация к работе
Антимикробный эффект молочнокислых бактерий человечество использовало в той или иной форме в течение столетий для продления срока годности пищевых продуктов за счет образования молочной кислоты с сопутствующим понижением РН, а также биологически активных веществ, обладающих бактерицидным действием на специфические группы микроорганизмов, включая и патогенные формы. Ведущее место в объяснении явления антагонизма молочнокислых бактерий отводится специфическим антибиотическим веществам белковой природы - бактериоцинам. Наиболее изученным и разрешенным для применения в качестве биологического консерванта является бактериоцин низин, единственный из антибиотиков с 1998 года имеющий «GRAS» (Generally Recognized As Safe) ctatyc, т.е. признанный Европейским парламентом как безопасный. Экспертный комитет по пищевым добавкам FAO/WHO (Пищевая и Сельскохозяйственная Организация ООН / Всемирная Организация Здравоохранения) рекомендовал использование низина в качестве консерванта для пищевых продуктов (код Е234). В настоящее время ученые многих лабораторий мира изучают пути и способы направленного синтеза бактериоцинов для создания биологическим путем различных модификаций уже известных бактериоцинов, но с более ценными свойствами или же пытаются получить новые природные сбалансированные бактериоциногенные комплексы, безопасные для использования в качестве биоконсервантов.Из коровьего и кобыльего молока, из лечебно-профилактических национальных продуктов смешанного молочнокислого и спиртового брожений курунги и Doogh разных территориальных зон выделены и отобраны наиболее перспективные бактериоцинобразующие природные штаммы мезофильных лактококков: штамм 119х с низинсинтезирующей активностью 3700 МЕ/мл (а.с № I55I744) и штамм 194 с активностью 3600 МЕ/мл, синтезирующий антибиотический комплекс широкого антимикробного, включая и фунгицидное действие, что является неизвестным свойством для этих лактококков. Штаммы идентифицированы как Lactococcus lactis subsp. lactis. Оптимизирован синтез бактериоцинов новыми штаммами лактококков при изменении состава среды и контроля РН: выход бактериоцинов был увеличен в 1,8-1,9 раза и составил для природного штамма 194 - 6400 МЕ/мл, а для гибридного штамма F-116 - 8200 МЕ/мл. Разработаны методы выделения и очистки новых бактериоцинов, синтезируемых штаммами L. lactis subsp. lactis разного происхождения, проведена их идентификация. Установлено, что антибиотический комплекс, синтезируемый гибридным штаммом F-116, представляет собой смесь биологически активных компонентов, относящихся к различным классам органических соединений: низина, а также веществ группы алкилароматических кетонов с широким спектром антибактериального действия.