Імунологічна реактивність у хворих на неспецифічний виразковий коліт з різним ступенем дисбактеріозу - Автореферат

Неспецифічний виразковий коліт (НВК) є вагомою медико-соціальною проблемою, на що вказує зростання захворюваності, безперервний рецидивуючий перебіг з прогресуючим порушенням структури і функцій слизової оболонки кишечнику, зниження якості життя та інвалідизація осіб молодого віку [Кіндратів, 2004; Белоусова, 2006; Румянцев, 2006; Комаров, Осадчук, 2008; Karlinger et al., 2000]. Порушення толерантності імунокомпетентних клітин до антигенів, які презентуються ентероцитами, веде до неконтрольованої відповіді на різні агенти, що в свою чергу зумовлює місцеве ушкодження тканин та розвиток локального запалення при неспецифічному виразковому коліті [Sartor, 2000; OHARA, Shanahan, 2008; Дранник и соавт., 2009]. Дисертацію виконано згідно з планом науково-дослідних робіт ДУ "Інститут гастроентерології АМН України" (матеріали дисертаційної роботи є фрагментом науково-дослідних робіт: "Вивчити клініко-біохімічні та морфологічні зміни у хворих на хронічні неспецифічні запальні захворювання кишок в сполученні з гепатобіліарною патологією", номер державної реєстрації 0102U000040, і "Розробити патогенетично обґрунтовані методи корекції метаболічних та імунологічних розладів у хворих на хронічні неспецифічні запальні захворювання кишок", номер державної реєстрації 0105U000084). Встановити особливості порушення ланок імунної системи залежно від ступеня дисбактеріозу кишечнику у хворих на неспецифічний виразковий коліт для поліпшення імунодіагностики та прогнозування перебігу захворювання. Вивчити стан імунної системи у хворих на неспецифічний виразковий коліт залежно від ступеня дисбактеріозу кишечнику.У першу групу ввійшли 27 пацієнтів із компенсованою формою дисбактеріозу (І ступінь дисбактеріозу), у другу групу ввійшло 22 пацієнти з субкомпенсованою формою дисбактеріозу (ІІ ступінь), третю групу склав 41 пацієнт із декомпенсованою формою дисбактеріозу (ІІІ ступінь). Встановлено підвищення рівня гемолітичних біоварів E. coli у 22,7% хворих 2-ї групи і 43,9% хворих 3-ї групи, підвищення рівня умовно-патогенних ентеробактерій (у 22,2% хворих 1-ї групи, у 27,3% і 34,2% хворих 2-ї і 3-ї груп відповідно). Зниження співвідношення CD4 /CD8 спостерігали у 18 (66,7%) хворих 1-ї групи, у 14 (63,6%) 2-ї групи, у 28 (68,3%) пацієнтів 3-ї групи. В усіх групах хворих ми спостерігали достовірне підвищення рівня циркулюючих імунних комплексів, що свідчить про високу активність запального процесу: підвищення рівня ЦІК спостерігали у 12 (44,4%) хворих 1-ї групи, у 20 (90,9%) хворих 2-ї групи; і у 32 (78,1%) хворих 3-ї групи. В усіх групах хворих спостерігали достовірно підвищені порівняно з контролем показники спонтанного НСТ-тесту, крім того, в 3-й групі вони були достовірно підвищеними порівняно з 1-ю і 2-ю групами.У дисертації зроблено теоретичні узагальнення і подано нове вирішення наукового завдання, що виявляється у визначенні особливостей порушення ланок імунної системи та імунного реагування залежно від ступеня дисбактеріозу кишечнику у хворих на неспецифічний виразковий коліт. Розроблено критерії оцінки тяжкості дисбіотичних порушень та прогнозування перебігу неспецифічного виразкового коліту. Імунологічна реактивність у хворих на неспецифічний виразковий коліт характеризується достовірним зниженням загального рівня Т-лімфоцитів і субпопуляції CD4 Т-лімфоцитів, індексу імунорегуляції CD4 /CD8 , підвищенням рівня лімфоцитів з фенотипом CD95 , ЦІК, ІЛ-4, ІЛ-8, ФНП-?, ІФН-?. У хворих з декомпенсованим дисбактеріозом виявляється достовірна активація кисневозалежного метаболізму нейтрофілів на тлі зниження їх поглинальної активності, а рівні CD3 і CD4 Т-лімфоцитів достовірно нижчі, ніж у хворих з компенсованим дисбактеріозом. У хворих на неспецифічний виразковий коліт встановлено достовірне підвищення титрів антитіл до антигенів кишечнику та перинуклеарних антинейтрофільних антитіл.

Основний зміст роботи

У дисертації зроблено теоретичні узагальнення і подано нове вирішення наукового завдання, що виявляється у визначенні особливостей порушення ланок імунної системи та імунного реагування залежно від ступеня дисбактеріозу кишечнику у хворих на неспецифічний виразковий коліт. Розроблено критерії оцінки тяжкості дисбіотичних порушень та прогнозування перебігу неспецифічного виразкового коліту.

1. Імунологічна реактивність у хворих на неспецифічний виразковий коліт характеризується достовірним зниженням загального рівня Т-лімфоцитів і субпопуляції CD4 Т-лімфоцитів, індексу імунорегуляції CD4 /CD8 , підвищенням рівня лімфоцитів з фенотипом CD95 , ЦІК, ІЛ-4, ІЛ-8, ФНП-?, ІФН-?.

2. Встановлена залежність змін імунітету від ступеня дисбактеріозу. У хворих з декомпенсованим дисбактеріозом виявляється достовірна активація кисневозалежного метаболізму нейтрофілів на тлі зниження їх поглинальної активності, а рівні CD3 і CD4 Т-лімфоцитів достовірно нижчі, ніж у хворих з компенсованим дисбактеріозом.

3. У хворих на неспецифічний виразковий коліт встановлено достовірне підвищення титрів антитіл до антигенів кишечнику та перинуклеарних антинейтрофільних антитіл. Наявність антитіл до антигенів кишечнику більш характерна для хворих з субкомпенсованим дисбактеріозом, а перинуклеарних антинейтрофільних антитіл - для хворих з декомпенсованим дисбактеріозом, що вказує на посилення деструктивних процесів.

4. Встановлено достовірне підвищення спонтанної продукції ІЛ-4, ІЛ-8, ФНП-?, ІФН-? мононуклеарними клітинами in vitro. Підвищений рівень продукції ІЛ-8 і ФНП-? у відповідь на індукцію ліпополісахаридом Escherichia coli в групах з субкомпенсованим і декомпенсованим дисбактеріозом свідчить про сенсибілізацію імунокомпетентних клітин до ліпополісахаридів грамнегативних бактерій.

5. Встановлено, що під впливом комплексу аутоцитокінів in vitro пригнічується ріст, знижується адгезивність і підвищується чутливість до антибіотичних препаратів представників умовно-патогенної мікрофлори.

6. Зниження поглинальної активності нейтрофілів до аутоштаму Escherichia coli порівняно з музейною культурою Escherichia coli О55: К59 3912/41 у 2 - 4 рази свідчить про середній ступінь дисбіотичних порушень, більш ніж у 4 рази - вказує на тяжкий ступінь дисбіотичних порушень, ризик поглиблення дисбактеріозу.

7. Рівень ІЛ-8, вищий, ніж 135 пг/мл, та ФНП-?, вищий, ніж 35 пг/мл, у сироватці крові хворих на неспецифічний виразковий коліт вказує на виражене напруження імунітету та несприятливий перебіг захворювання.

ПРАКТИЧНІ РЕКОМЕНДАЦІЇ

1. Визначення поглинальної активності нейтрофілів до аутоштаму Escherichia coli порівняно з музейною культурою Escherichia coli О55: К59 3912/41 дозволяє оцінити ступінь тяжкості дисбіотичних порушень кишечнику та прогнозувати ризик їх поглиблення.

2. Для оцінки напруження імунітету та прогнозування перебігу захворювання у хворих на неспецифічний виразковий коліт доцільно визначати рівень ІЛ-8 та ФНП-? у сироватці крові.

3. Комплексне дослідження фагоцитарної активності нейтрофільних гранулоцитів периферичної крові та рівня прозапальних цитокінів ІЛ-8 та ФНП-? у сироватці крові рекомендується використовувати як критерії прогнозування ризику поглиблення дисбактеріозу кишечнику та перебігу неспецифічного виразкового коліту.

1. Дослідження впливу аутоцитокінів на мікрофлору товстої кишки хворих на неспецифічний виразковий коліт / С.Ю. Єгорова, К.Г. Гаркава, В. Є. Кудрявцева, Л.В. Тропко // Вісник проблем біології і медицини. - 2008. - Вип.4. - С.62-66.

2. Єгорова С.Ю. Імунологічна реактивність у хворих на неспецифічний виразковий коліт в залежності від стану мікробіоценозу товстої кишки / С.Ю. Єгорова, В. Є. Кудрявцева, Л.В. Тропко // Одеський медичний журнал. - 2009. - № 1. - С.61-63.

3. Єгорова С.Ю. Роль імунних порушень у хворих на неспецифічний виразковий коліт / С.Ю. Єгорова, В. Є. Кудрявцева // Вісник Дніпропетровського університету. Біологія. Екологія. - 2009. - Вип.17. - № 1. - С.65-69.

4. Гаркава К.Г. Оцінка факторів неспецифічного захисту імунної системи у хворих на неспецифічний виразковий коліт / К.Г. Гаркава, С.Ю. Єгорова, В. Є. Кудрявцева // Вісник проблем біології і медицини. - 2009. - Вип.3. - С.59-62.

5. Єгорова С.Ю. Індивідуальні зміни цитокінового статусу в залежності від стану мікробіоценозу товстої кишки хворих на неспецифічний виразковий коліт / С.Ю. Єгорова, К.Г. Гаркава, В. Є. Кудрявцева // Медична хімія. - 2010. - Т.12, № 1. - С.105-108.

6. Пат.41829 UA, МПК G01N 33/48 G01N 33/53. Спосіб визначення напруження імунітету / Єгорова С.Ю., Кудрявцева В. Є., Тропко Л.В., Бойко Т.Й., Челкан В.В., Гаркава К. Г.; заявник та патентовласник Інститут гастроентерології АМН України. - № u 2009 00095; заявл.05.01.09; опубл.10.06.09, Бюл. № 11.

7. Пат.43741 UA, МПК G01N 33/53. Спосіб прогнозування дисбіотичних порушень / Єгорова С.Ю., Кудрявцева В. Є., Гаркава К.Г., Тропко Л.В., Челкан В. В.; заявник та патентовласник Інститут гастроентерології АМН України. - № u 2009 03834; заявл.21.04.09; опубл.25.08.09, Бюл. № 16.

8. Взаємозвязок дисбіотичних порушень мікробіоценозу товстої кишки і показників гуморального імунітету та рівня прозапальних цитокінів у хворих на неспецифічний виразковий коліт / С.Ю. Єгорова, В. Є. Кудрявцева, Л.В. Тропко, К.Г. Гаркава // Гастроентерологія: Міжвідомчий збірник. - Дніпропетровськ, 2008. - Вип.40. - С.76-81.

9. Єгорова С.Ю. Продукція цитокінів та стан мікробіоценозу товстої кишки у хворих на неспецифічний виразковий коліт / С.Ю. Єгорова // Гастроентерологія: Міжвідомчий збірник. - Дніпропетровськ, 2009. - Вип.42. - С.94-99.

10. Кудрявцева В. Є. Рівень прозапальних цитокінів та кисневозалежна бактерицидна система нейтрофілів периферичної крові у хворих на неспецифічний виразковий коліт // В. Є. Кудрявцева, С.Ю. Єгорова, О.М. Татарчук // Матеріали всеукраїнської науково-практичної конференції "Сучасні питання фізіології та медицини” - Дніпропетровськ, 2007. - С.55.

11. Єгорова С.Ю. Фагоцитарна активність нейтрофілів у хворих на неспецифічний виразковий коліт // С.Ю. Єгорова, В. Є. Кудрявцева // Матеріали V медико-фармацевтичної конференції студентів та молодих вчених. - Чернівці, 2008. - С.71.

12. Стан клітинного імунітету та дисбіотичні порушення мікробіоценозу товстої кишки у хворих на неспецифічний виразковий коліт / С.Ю. Єгорова, В. Є. Кудрявцева, Л.В. Тропко, К.Г. Гаркава // Матеріали X Всеукраїнської наукової конференціїї "Актуальные вопросы клинической и лабораторной иммунологии, аллергологии и иммунореабилитации” - Київ, 2008. - С.130.

13. Єгорова С.Ю. Цитокіновий статус хворих на неспецифічний виразковий коліт / С.Ю. Єгорова, В. Є. Кудрявцева // Матеріали Всеукраїнської наукової конференції з міжнародною участю "Актуальні проблеми сучасної біохімії та клітинної біології” - Дніпропетровськ, 2008. - С.41.

14. Особенности цитокиновой регуляции у больных с воспалительными заболеваниями кишечника / Т.И. Бойко, Е.В. Сорочан, С.Ю. Егорова, М.В. Стойкевич // Материалы XIV Российской гастроэнтерологической недели - Москва, 2008. - С.56.

15. Вплив комплексу природних цитокінів на клінічні штами мікроорганізмів в експерименті in vitro / С.Ю. Єгорова, В. Є. Кудрявцева, Л.В. Тропко, К.Г. Гаркава // Матеріали V національного Конгресу патофізіологів України "Сучасні проблеми патофізіології: від молекулярно-генетичних до інтегративних аспектів” - Запоріжжя, 2008. - С.36.

16. Єгорова С.Ю. Вплив комплексу аутоцитокінів на адгезивні властивості лактобацил / С.Ю. Єгорова, К.Г. Гаркава, В. Є. Кудрявцева // Матеріали ХІ української науково-практичної конференції "Современные аспекты эпидемиологии, иммунопатогенеза, иммунодиагностики, иммунотерапии хламидиоза и инфекций TORCH-комплекса" - Київ, 2008. - С.101.

17. Егорова С.Ю. Особенности отклонений уровня провоспалительных цитокинов в зависимости от состояния кишечной микрофлоры у больных неспецифическим язвенным колитом / С.Ю. Егорова, В.Е. Кудрявцева, Е.Г. Гаркавая // Материалы IX съезда НОГР - Москва, 2009. - С. 197-198.

18. Єгорова С.Ю. Особливості реакції фагоцитозу у хворих на неспецифічний виразковий коліт // Матеріали конференції студентів та молодих вчених - Тернопіль, 2009. - C.185.