Методические рекомендации к определению и выведению гемограммы у животных - Методичка

Методические рекомендации к определению и выведению гемограммы у сельскохозяйственных и лабораторных животных при патологиях. При подготовке настоящих рекомендаций был использован опыт работы… РЕЦЕНЗЕНТ: В.А.Ермолаев, доктор ветеринарных наук, профессор Рекомендовано к изданию методической комиссией факультета ветеринарной медицины Протокол № от 2005 г. Ульяновская государственная сельскохозяйственная академия, 2005 г МЕТОДИКА ПРИГОТОВЛЕНИЯ МАЗКОВ КРОВИ ДЛЯ ИССЛЕДОВАНИЯ А. ВЗЯТИЕ КРОВИ И ПОЛУЧЕНИЕ МАЗКА Циркулирующая в сосудистой системе кровь представляет более или менее равномерную взвесь в плазме форменных элементов: эритроцитов, лейко­цитов и кровяных пластинок (у птиц, рептилий и амфибий - тромбоцитов). Абсолютное количество и соотношение отдельных групп клеток в крови раз­личных видов животных неодинаковы. Несколько меньше видовые колеба­ния количества белых кровяных телец: в 1 мм 3 крови млекопитающих содержится от 5 до 15 тыс. лейкоцитов. Значительно колеблется при этом и соотношение отдельных форм белой крови (табл.1,2). 43,9 Почки 103,8 Мышцы сердца 61,7 Надпочечники 73,8 Костный мозг 128,29 Vena mesent. 89,0 Vena. femoralis 62,4 Art. mesent. 84,4 Аrt . femoralis 69,9 Vena cava caud. 4.9 Vena. renalis 60,5 Если принять среднее количество лейкоцитов в 1 мм3 крови из ушной вены за 100%, то в крови из сосудов дру­гих органов содержится: Поэтому важно брать кровь для анализа всегда из одного и того же сосуда или группы сосудов. Таблица 2 Состав белой крови свиней Кровь Базофилы Эозино-филы Нейтрофилы Лимфо-циты Моноциты Юные Палочко ядерные. Место взятия крови тщательно выстригается и если нужно, промывается водой с мылом, затем спир­том (или спиртом с эфиром). Рекомендуется тщатель­но растирать место взятия крови ваткой со спиртом и эфиром, что вызывает местную гиперемию и вместе с тем помогает избежать случайных колебаний лей­коцитарной формулы, связанных с некоторым застоем крови в мелких венах уха. Особенно следует иметь в виду возможное избирательное скопление в них эозинофилов. Прокол тканей для получения крови лучше всего производить иглой Франка, но можно употреблять и обыкновенную иглу или специальное перо для уколов. По крайней мере, одно ребро таких стёкол должно быть уже ширины того пред­метного стекла, на котором приготовляют мазок. ОСНОВНОЙ МЕТОД ОКРАСКИ ПО РОМАНОВСКОМУ Посредством окраски препарата наиболее отчетливо выявляется тончайшая структура, как ядра, так и цитоплазмы. Принцип современных методов окраски мазков крови открыт в 1891 г. Д. Л. Романовским и заключается в избирательном поглощении (химическом и коллоидальнохимическом) веществами клетки трёх красящих веществ - азура метиленовой синьки и эозина. Цитоплазма молодых клеток, от­носительно богатая нуклеиновыми кислотами (нуклеотидами), также, хотя и в меньшей степени, базофильна. В лабораторной практике чаще всего пользуются следующими способами окраски по методу Романовского. Окраска раствором Гимза Краска Гимза, применяемая при окраске по ме­тоду Романовского, представляет собой комбинацию метилен-азура (азур II) и эозина (В, жёлтого). Для приготовления рабочего раствора краски употребляется дважды дистиллированная вода. Азур II - смесь в равных частях красок: азур I (диметилтиониохлорид) и метиленовой синьки. В постарев­шем растворе исходной краски Гимза метиленовая синька часто плохо окрашивает цитоплазму лимфоцитов (нет чисто голубого цвета). Во избежание осадков, которые невозможно отмыть, можно стёкла укладывать мазками вниз, на стеклянные палочки, лежащие в чашке Петри, так, чтобы краска покрывала мазки полностью (способ академика Н. Д. Стражеско). По этому методу плохо окрашиваются псевдоэозинофилы (палочкозернистые гранулоциты) крови сель­скохозяйственных птиц. В случае приготовления основного раствора с аце­тоном особенно хорошо выявляется зернистость структура ядер кровяные пластинки. • Описание цветов дано, с некоторыми небольшими изменением, по А. II. Крюкову. Окраска: эритроциты зелёные; ядра лейкоцитов фиолетово-синие; базофильная зернистость вишнё­вая; эозинофильная зернистость изумрудно-зелёная; нейтрофильная зернистость серая; у кровепаразитов ядро красное, а цитоплазма синяя. На хорошо промытое (подщелочённой водой, затем спиртом с эфиром) предметное стекло наносят 2 крупные капли крови. Эта способность приобретает первостепенное биологическое значение в случае проникновения в организм патогенных мик­робов: пожирание их лейкоцитами - фагоци­тоз (Мечников, 1882-1893) - составляет важней­шее средство борьбы организма с инфекцией. Эозинофилы имеют очень большое клиническое значение. При роже свиней и при многих инвазиях (особенно гельминтозах) наблюдается рез­кое увеличение эозинофилов (эозинофилия), доходя­щее у крупного рогатого скота до 40%. У не­которых животных (мыши, крысы и кошки) эерни-стость выражена очень слабо, но, однако, вопреки отрицанию Максимова, несомненно есть. У коровы, овцы, лошади и морской свинки (по Максимову) эти зёрна амфооксифильны, т. е. имеют большее сродство к кислым краскам; у к