Изучение химического состава липопротеинов семян сортового и гибридного подсолнечника современной селекции при созревании семян, их послеуборочной обработке и хранении в условиях ускоренного старения. Разработка способа получения липопротеинов из семян.
Аннотация к работе
Изменение комплекса липопротеинов семян подсолнечника сортов и гибридов современной селекции при послеуборочной обработке и хранении не исследовано, что определяет актуальность их изучения с целью выявления их функционально-технологических (поверхностно-активных) свойств и возможности применения в масложировой промышленности. Впервые изучены липидные и белковые компоненты липопротеинов семян подсолнечника современной селекции и определены их изменения при созревании, послеуборочной обработке и хранении семян подсолнечника. Экспериментально подтверждена взаимосвязь между активностью гидролитических ферментов семян и поверхностно-активными свойствами их липопротеинового комплекса. Разработаны и обоснованы оптимальные условия послеуборочной обработки свежеубранных семян, подтверждена взаимосвязь качества семян, функциональных свойств и состава липидного и белкового компонентов липопротеинов. Установлено достоверное повышение поверхностно-активных свойств липопротеинов при тепловой сушке семян, а также при потере семенами жизнеспособности в результате активирования гидролитических процессов в семенах при хранении.У липопротеинов, полученных из семян гибрида Юпитер, количество белковых фракций равно 12, доминируют 4, электрофоретические подвижности которых близки, что говорит о более высокой однородности и электрофоретической подвижности белкового компонента липопротеинов гибридных семян, т.е. обуславливает их высокую способность к комплексообразованию и как следствие определяет отличие их свойств по сравнению с сортами. Изучение жирнокислотного состава липопротеинов показало в целом его близость с жирнокислотным составом масла семян. Изучение электрофоретических спектров белкового компонента показало, что на 10-й день после окончания цветения в липопротеинах семян гибрида Юпитер присутствует 14 фракций, преобладающими являются две равновеликие, существенно отличающиеся по электрофоретической подвижности и составляющие 85 % от суммы всех белков. Известные взаимопревращения олеиновой и линолевой кислот в процессе созревания семян наблюдаются и в липопротеинах (таблица 3). В результате проведенных исследований установлено, что по мере увеличения температуры сушки происходит заметное увеличение содержания липопротеинов в семенах за счет образования связей между различными формами липидов и белками, особенно денатурированными.Впервые проведено сравнительное изучение липопротеинов семян гибридов и сортов подсолнечника современной селекции при созревании, послеуборочной обработке и хранении. Разработан способ получения из семян подсолнечника препарата липопротеинов с высокими поверхностно-активными свойствами. Использование более высоких температур в процессе сушки приводит к нежелательным изменениям в белковом и липидном компонентах липопротеинов: в белковом компоненте снижается количество электрофоретических фракций и их подвижности за счет тепловой денатурации (деструкции); в липидном компоненте уменьшается содержание фосфолипидов и каротиноидов, растет содержание диацилглицеролов. Повышение температуры приводит к глубокой денатурации белковых молекул, что сопровождается снижением поверхностно-активных свойств липопротеинов. Установлено, что изменение липопротеинового комплекса семян при созревании, послеуборочной обработке и хранении коррелирует с изменениями активности гидролитических ферментов, образованием в клетках семян продуктов гидролиза и накоплением токсичных продуктов окисления, нарушающих нативную структуру биомембран клеток.
Вывод
Характеристика липопротеинов исследуемых семян подсолнечника. При исследовании липопротеинов, выделенных из семян подсолнечника, было установлено, что содержание белка в них составляет 2/3, а липидов 1/3 часть от массы липопротеина, что соответствует соотношению белок: липиды в липопротеинах высокой плотности плазмы крови.
IMG_8c05e306-0eda-49ca-87d1-4fc3cb263cd5
IMG_d83dffa0-8b77-4101-80a6-bf4dd4242c4a
Природные липопротеины составляют 1,7 - 2,1 % от общего содержания белка в исследуемых семенах. Результаты изучения электрофоретических фракций липопротеинов семян сорта Фаворит свидетельствуют о присутствии 15 белковых фракций, среди которых преобладающими являются 3 электрофоретически разнородные фракции. У липопротеинов, полученных из семян гибрида Юпитер, количество белковых фракций равно 12, доминируют 4, электрофоретические подвижности которых близки, что говорит о более высокой однородности и электрофоретической подвижности белкового компонента липопротеинов гибридных семян, т.е. обуславливает их высокую способность к комплексообразованию и как следствие определяет отличие их свойств по сравнению с сортами. Кроме того был изучен аминокислотный состав липопротеинов гибридного и сортового подсолнечника (таблица 1).
Таблица 1 - Аминокислотный состав липопротеинов семян гибридов и сортов подсолнечника
Содержание аминокислот, %Юпитер (липопротеины)Фаворит (липопротеины)Запасные белки семян
Аргинин6,710,68,2
Лизин0,70,23,6
Фенилаланин0,71,83,7
Гистидин8,77,02,0
Лейцин7,28,17,1
Метионин6,69,62,0
Валин3,33,55,3
Пролин6,38,75,7
Треонин11,915,63,7
Триптофан0,60,2-
Серин3,74,34,9
Аланин11,19,14,5
Глицин9,212,26,2
Цистин1,7-2,3
Аспарагиновая к-та1,8-10,7
Глютаминовая к-та20,49,321,4
Из полученных данных видно, что в белковом компоненте липопротеинов как сортов, так и гибридов преобладают метионин, аланин, треонин, гистидин и глицин. По сравнению с запасными белками белковый компонент липопротеинов отличается более высоким содержанием незаменимых аминокислот - метионина, треонина, гистидина, а также заменимых - аланина и глицина. В липопротеинах сорта Фаворит аминокислота треонин имеет наибольшую концентрацию среди всех незаменимых аминокислот - 15,6 %. Кроме того, белки входящие в состав липопротеинов как сортовых, так и гибридных семян отличаются более высоким содержанием пролина, аргинина и глютаминовой кислоты. В целом аминокислотный состав липопротеинов характеризует их высокую биологическую ценность наряду с запасными белками семян.
Из полученных нами данных следует, что практически половина (7 из 16) аминокислот исследуемых липопротеинов подсолнечника - гидрофобные (аланин, лейцин, метионин, пролин, валин, фенилаланин и триптофан). В липопротеинах гибрида Юпитер содержание полярных аминокислот - 26,5 %, а «заряженных» - 37,7 %, что соответствует процентному содержанию данных групп аминокислот в запасных белках семян подсолнечника. Такой аминокислотный состав липопротеинов свидетельствует о гидрофильно - гидрофобных функциях структурных компонентов, благодаря чему происходит легкое встраивание белка в фосфолипидный бислой мембран клеток семян.
Липидный комплекс исследуемых липопротеинов семян подсолнечника включает следующие группы липидов: триацилглицеролы - 57,76 %, фосфолипиды - 23,61 %, жирные кислоты - 2,08 %, стеролы - 2,81 %, диацилглицеролы - 3,11 %, каротиноиды - 4,67%, углеводороды - 5,84 % и неидентифицированные липиды - 0,12 %.
Изучение жирнокислотного состава липопротеинов показало в целом его близость с жирнокислотным составом масла семян. Исследование проводили на семенах гибрида Юпитер, полученные данные представлены в таблице 2.
Таблица 2 - Жирнокислотный состав масла семян подсолнечника гибрида Юпитер и липидного компонента их липопротеинов
Название жирной кислотыСодержание жирных кислот, %
В маслеВ липопротеинах
Пальмитиновая7,07,3
Стеариновая3,72,0
Олеиновая23,039,5
Линолевая64,647,7
Линоленовая0,32,2
Арахиновая0,40,3
Эйкозеновая0,40,5
Бегеновая0,60,5
Как следует, из данных таблицы 2, в составе липидного компонента липопротеинов преобладают ненасыщенные жирные кислоты - олеиновая и линолевая - 39,5 и 47,7 %, а также содержится отсутствующая в запасных липидах линоленовая кислота, относительная доля которой составляет 2 %. Высокое суммарное содержание ненасыщенных жирных кислот (90,2 %) в составе липопротеинов обеспечивает подвижность жидкокристаллической структуры фазового состояния биомембран клетки, необходимой для выполнения липопротеинами метаболических функций в клетке.
Результаты исследования аминокислотного и жирнокислотного состава липопротеинов семян подсолнечника позволил предположить наличие у них высоких поверхностно-активных свойств. Для изучения поверхностно-активных свойств липопротеинов и их влияния на формирование структуры водно-жировых эмульсий были исследованы их жироудерживающая (ЖУС) и жироэмульгирующая (ЖЭС) способности (рисунок 3).
IMG_0c8d15b2-7977-4071-9f16-1da733adf620
Из рисунка 3 видно, что максимальные значения ЖУС и ЖЭС имеют липопротеины семян гибрида Авангард, а наименьшие - семян сорта Бородинский. У гибрида Юпитер, сортов Фаворит и Флагман величины ЖУС липопротеинов находятся в пределах 42-49 %, а значения величин ЖЭС колеблются в интервале 53 - 55 %. Как известно, растительные белки обладают высокими эмульгирующими и жиросвязывающими способностями и используются в составе белково-жировых эмульсий, на основе которых готовят майонезы, приправы и соусы.
Полученные данные свидетельствуют о том, что липопротеины гибридов и сортов семян подсолнечника, обладая высокой биологической ценностью и значительными эмульгирующими способностями, могут использоваться при производстве пищевых продуктов эмульсионной природы.
Изменение состава липопротеинов в процессе созревания семян подсолнечника. В процессе созревания семян происходит накопление не только основных запасных веществ - жирного масла и белка, но и увеличивается массовая доля структурных липопротеинов.
Изучение электрофоретических спектров белкового компонента показало, что на 10-й день после окончания цветения в липопротеинах семян гибрида Юпитер присутствует 14 фракций, преобладающими являются две равновеликие, существенно отличающиеся по электрофоретической подвижности и составляющие 85 % от суммы всех белков. Белки липопротеинов семян, достигших уборочной спелости, имеют 17 электрофоретических фракций, количество основных фракций, увеличивается до 4 - х и на их долю приходится 92 % белка липопротеинов.
Таким образом, при созревании семян в составе липопротеинов появляются белки, имеющие близкие значения электрофоретической подвижности, что свидетельствует о росте однородности белкового компонента.
При созревании семян характер изменений жирнокислотного состава липидной части липопротеинов коррелирует с метаболическими процессами в запасных сферосомах. Известные взаимопревращения олеиновой и линолевой кислот в процессе созревания семян наблюдаются и в липопротеинах (таблица 3).
Таблица 3 - Изменение жирнокислотного состава липидного компонента липопротеинов в процессе созревания
Название жирной кислотыСодержание жирных кислот в липопротеинах, %
День после окончания цветения
10223758
Пальмитиновая8,98,78,57,3
Стеариновая2,82,82,92,0
Олеиновая43,642,742,239,5
Линолевая40,642,142,947,7
Линоленовая2,72,52,32,2
Арахиновая0,30,30,30,3
Эйкозеновая0,60,50,50,5
Бегеновая0,50,40,40,5
Так при созревании семян подсолнечника в липопротеинах происходит снижение содержания олеиновой, пальмитиновой, стеариновой и линоленовой кислот, одновременно с этим увеличивается массовая доля линолевой.
Подтверждением нативности и стабильности липопротеиновых комплексов биомембран клеток семян является высокий уровень активности ферментов. Изменение активностей кислой и щелочной липаз (рисунок 4) в процессе созревания семян подчиняется общей закономерности - увеличивается активность ферментов - синтетаз, что способствует накоплению запасных липидов.
IMG_d25d3f85-0851-4957-8c63-a2679088cf86
Характеристика липопротеинов семян подсолнечника подвергнутых тепловой сушке. Свежеубранные семена подсолнечника были подвергнуты тепловой сушке. Изменение электрофоретических фракций белкового компонента липопротеинов семян после сушки представлены в таблице 4.
Как следует из таблицы 4, тепловая сушка семян приводит к глубоким изменениям электрофоретического состава белкового компонента липопротеинов. Количество белковых фракций изза тепловой денатурации уменьшилось с 17 до 4.
Прослеживается четкая зависимость глубины денатурации от температуры сушки. При относительно низких температурах сушки (60ОС и 90ОС) наблюдается равномерный выход фракций, начиная с 5 по 20-ю минуты электрофореза. Это свидетельствует о варьировании размеров и величины подвижностей фрагментов белковых молекул липопротеинов. Высокотемпературная сушка при 120ОС характеризуется снижением числа фракций до 4, причем, основные фракции появляются, с 19-й минуты анализа. В тоже время эти фракции в сумме составляют 83,34 % общей массы белка, что свидетельствует о глубокой денатурации белковых глобул липопротеинов.
Под влиянием повышенных температур происходит изменение атакуемости и вязкости белкового компонента липопротеинов в результате объединения белковых фракций в крупные агрегаты. В теории тепловой сушки масличных семян этот процесс, по предположению В.П. Ржехина, получил название «электрофоретической гомогенизации» и характеризует изменения в глобулинах запасных белков подсолнечника.
При тепловой сушке семян происходят изменения в групповом и жирнокислотном составе липидного компонента липопротеинов (таблицы 5, 6).
В процессе тепловой обработки в семенах существенно снизилось количество фосфолипидов и возросло количество свободных жирных кислот, кроме того возросла доля неидентифицированных липидов за счет образования окисленных форм каротиноидов и углеводородов. Как видно из таблицы 6 содержание отдельных ненасыщенных кислот по мере роста температуры сушки изменяется, возрастает относительное содержание олеиновой кислоты, несколько снижается доля линолевой.
В результате проведенных исследований установлено, что по мере увеличения температуры сушки происходит заметное увеличение содержания липопротеинов в семенах за счет образования связей между различными формами липидов и белками, особенно денатурированными. Извлечение липидов семян с возрастанием доли липопротеинов снижается.
При тепловой сушке изменяются поверхностно-активные свойства липопротеинов по сравнению со свежеубранными семенами (рисунок 5).
Таблица 4 - Изменение электрофоретических фракций белкового компонента липопротеинов семян после сушки
Доля электрофоретической фракции и температура сушки Номер белковой зоны
1234567891011
60ОСДоля фракции от общего количества, %8,31-8,9735,3110,32-9,0311,28-16,68-
90ОСДоля фракции от общего количества, %6,921,160,1413,6012,8642,98-4,1718,17--
120ОСДоля фракции от общего количества, %--12,40---4,26--21,7161,63
Таблица 5 - Изменение группового состава липидного компонента липопротеинов семян, в процессе их тепловой сушки
Группы липидов, % от общей суммы липидовТемпература сушки, ОС
До сушки60 ОС90 ОС120 ОС
Фосфолипиды23,6110,6110,318,72
Каротиноиды4,671,311,171,68
Стеролы2,812,652,903,07
Диацилглицеролы3,115,976,519,60
Жирные кислоты2,0813,3711,057,74
Триацилглицеролы57,7656,7657,6758,15
Неидентифицированные липиды0,123,976,377,16
Углеводороды5,845,294,023,88
Таблица 6 - Изменение жирнокислотного состава липидного компонента липопротеинов в процессе сушки семян
Название жирной кислотыСодержание жирных кислот в липопротеинах, %
До сушки семян60 ОС90 ОС120 ОС
Пальмитиновая7,37,47,57,8
Стеариновая2,01,91,71,6
Олеиновая39,540,141,542,2
Линолевая47,747,547,246,5
Линоленовая2,21,81,00,8
Арахиновая0,30,30,20,2
Эйкозеновая0,50,50,40,4
Бегеновая0,50,50,50,5
IMG_5ca3dd24-5fc0-4ed2-8772-63e3f0e1dfa3
Высокая температура приводит к разворачиванию белковых глобул, с увеличением их реакционной способности, что ведет к росту поверхностно-активных свойств липопротеинов. Однако, рост ЖУС и ЖЭС наблюдается в основном при более мягких режимах сушки (t = 60ОС), повышение температуры до 120 ОС вызывает глубокую денатурацию белковых молекул, что приводит к снижению поверхностно-активных свойств липопротеинов.
Изменение липопротеинов семян подсолнечника при ускоренном старении. Семена подсолнечника, заложенные на ускоренное старение, полностью потеряли жизнеспособность после 18 недель хранения. Результаты изменения электрофоретического состава белкового компонента липопротеинов после ускоренного старения семян представлены в таблице 7.
Таблица 7 - Изменение электрофоретических фракций белкового компонента липопротеинов семян после старения*
Номер белковой зоныДоля электрофоретической фракции липопротеинов от общего количества, %
До старенияПосле старения
13,00-
21,553,38
332,57-
46,69-
511,58-
619,92-
723,6680,44
8-5,83
9-5,99
10-2,02
* В таблице приведены фракции, превышающие по массовой доле 1 %
Изменения, происходящие в белковом комплексе липопротеинов семян подсолнечника при хранении в условиях ускоренного старения, свидетельствуют о процессах деструкции, которые характеризуется сближением электрофоретических зон, укрупнением белковых глобул и снижением их подвижности.
Одновременно с белковым компонентом липопротеинов изучали изменения их липидного компонента. Изменения группового состава липидов липопротеинов при ускоренном старении семян, аналогичны изменениям состава липидного компонента при тепловой сушке. Данные исследования жирнокислотного состава липопротеинов после ускоренного старения семян представлены в таблице 8.
Таблица 8 - Изменение жирнокислотного состава липидного компонента липопротеинов после ускоренного старения семян
Жирная кислотаСодержание жирных кислот в липопротеинах, %
Исходных семянПосле старения
Пальмитиновая7,38,6
Стеариновая2,02,9
Олеиновая39,540,2
Линолевая47,746,6
Линоленовая2,20,3
Арахиновая0,30,6
Эйкозеновая0,50,1
Бегеновая0,50,7
Из полученных данных видно, что в процессе хранения семян в условиях ускоренного старения, в липидном компоненте липопротеинов снижается содержание ненасыщенных жирных кислот (линолевой и линоленовой) за счет окисления липидов, что свидетельствует о разрушающих процессах, происходящих в мембранах.
С целью выявления взаимосвязи между изменениями компонентного состава липопротеинов и активности ферментов в семенах при хранении (в условиях ускоренного старения) определяли активность гидролитических ферментов (таблицы 9 - 10).
Таблица 9 - Изменение активности кислой липазы при хранении семян
Гибрид/сортКислая липаза, см3 0,1н КОН/ 10 г семян за 1 час
Продолжительность хранения, недели
0369121518
Авангард13,5013,4213,0012,8212,5511,1810,48
Юпитер10,479,838,738,027,516,906,39
Бородинский20,0018,1517,8617,2117,0016,8616,47
Фаворит10,009,789,138,926,816,565,99
Флагман15,7014,4513,5412,3711,0910,7510,18
Таблица 10 - Изменение активности щелочной липазы при хранении семян
Гибрид/сортЩелочная липаза, см3 0,1н КОН/ 10 г семян за 1 час
Продолжительность хранения, недели
0369121518
Авангард3,703,974,124,644,985,145,70
Юпитер2,202,943,283,763,984,094,30
Бородинский4,194,875,356,477,288,399,19
Фаворит5,595,766,146,586,947,117,79
Флагман2,102,923,464,084,765,075,69
Полученные результаты подтверждают известные закономерности - снижение активности кислой липазы коррелирует с возрастанием щелочной, хотя снижение активности кислой липазы всегда более существенно по сравнению с одновременным ростом щелочной.
Изменение активности липаз предположительно можно объяснить процессом гидролиза запасных белков, протекающим под действием протеолитических ферментов и приводящим к накоплению пептидов, пептонов и свободных аминокислот, и как следствие к росту РН. В результате в цитоплазме клеток создается оптимум для действия щелочной липазы. Для подтверждения этого предположения и выяснения роли протеолитических ферментов в изменении характера работы липаз в семенах нами были проведены исследования активности протеолитических ферментов семян в процессе их хранения (таблица 11).
Таблица 11 - Изменение активности протеолитических ферментов при ускоренном старении семян
Анализ полученных данных (таблицы 9, 10, 11) показывает высокую корреляцию между активностью всех изученных ферментов - кислых и щелочных липаз и протеолитических ферментов, и подтверждает наше предположение о характере их взаимодействия.
Процессы старения оказывают влияние и на поверхностно-активные свойства семян подсолнечника, в частности, на их жироудерживающую (ЖУС) и жироэмульгирующую (ЖЭС) способности (таблица 12).
Таблица 12 - Изменение ЖУС и ЖЭС липопротеинов семян после ускоренного старения
Гибрид/сортДо старения семян После старения семян
ЖУС, %ЖЭС, %ЖУС, %ЖЭС, %
Авангард55,8060,9462,0769,02
Юпитер48,9155,3859,7866,56
Бородинский33,6951,8059,9160,05
Фаворит44,7654,8958,9663,32
Флагман42, 0453,4854,6461,72
Как следует из полученных данных, в процессе ускоренного старения семян, происходит повышение ЖУС и ЖЭС липопротеинов. Это обусловлено процессом деструкции молекул белка, в результате чего происходит разворачивание белковых глобул, сопровождающееся увеличением их гидрофобной поверхности, что приводит к росту ЖУС и ЖЭС липопротеинов.
Применение липопротеинов в пищевых продуктах. Учитывая высокую жироудерживающую и жироэмульгирующую способности подсолнечных липопротеинов, нами было обосновано их применение в хлебопекарной промышленности при производстве хлебобулочных изделий, а также в масложировой промышленности при производстве майонезов. Проведенные исследования показали возможность и эффективность применения липопротеинов вместо традиционных эмульгаторов в хлебопечении, что улучшило реологические свойства клейковины теста и позволило получить готовый продукт высокого качества. Одновременно, замена яичного порошка подсолнечными липопротеинами позволяет получить майонез, не содержащий холестерина. Стендовая апробация применения липопротеинов показала, что по жироудерживающей и жироэмульгирующей способности подсолнечные липопротеины превышают аналогичные показатели яичного порошка, и позволяют получать пищевые функциональные продукты по себестоимости сравнимой с себестоимостью традиционного майонеза.1. Впервые проведено сравнительное изучение липопротеинов семян гибридов и сортов подсолнечника современной селекции при созревании, послеуборочной обработке и хранении. Изучен химический состав белкового и липидного компонентов липопротеинов.
2. Разработан способ получения из семян подсолнечника препарата липопротеинов с высокими поверхностно-активными свойствами. Способ защищен патентом РФ.
3. Определена оптимальная температура послеуборочной обработки свежеубранных семян гибридов и сортов, которая находится на уровне 60ОС. Использование более высоких температур в процессе сушки приводит к нежелательным изменениям в белковом и липидном компонентах липопротеинов: в белковом компоненте снижается количество электрофоретических фракций и их подвижности за счет тепловой денатурации (деструкции); в липидном компоненте уменьшается содержание фосфолипидов и каротиноидов, растет содержание диацилглицеролов.
4. Тепловая сушка семян при рекомендуемых режимах (60ОС) сопровождается возрастанием функционально - технологических свойств липопротеинов - жироудерживающей (ЖУС) и жироэмульгирующей (ЖЭС) способностей. Повышение температуры приводит к глубокой денатурации белковых молекул, что сопровождается снижением поверхностно-активных свойств липопротеинов.
5. При хранении семян происходит изменение активности гидролитических ферментов: кислых и щелочных липаз и протеаз. При этом поверхностно-активные свойства липопротеинов возрастают.
6. Установлено, что изменение липопротеинового комплекса семян при созревании, послеуборочной обработке и хранении коррелирует с изменениями активности гидролитических ферментов, образованием в клетках семян продуктов гидролиза и накоплением токсичных продуктов окисления, нарушающих нативную структуру биомембран клеток. Изменение структуры биомембран клеток продуктами гидролиза белков и липидов, а также продуктами окисления липидов сопровождается нарушением работы ферментов и потерей жизнеспособности семян.
7. На основании проведенных исследований теоретически и экспериментально обоснована возможность получения подсолнечных липопротеиновых продуктов. Экспериментально обоснованы рекомендации по их использованию в качестве поверхностно-активных веществ в технологии жировых продуктов эмульсионной природы и хлебопекарном производстве. Апробация ПАВ, на основе липопротеинов полученных из семян подсолнечника по разработанному нами способу, подтвердила их эффективность.
2. Бердина А.Н. Накопление сухой массы семенами гибрида Юпитер при созревании и перестое / Бердина А.Н., Ильчишина Н.В. // Известия ВУЗА. Пищевая технология - 2007. - № 5-6. - С. 111.
3. Бердина А.Н. Аминокислотный состав липоротеинов подсолнечника и пшеницы / Бердина А.Н., Ильчишина Н.В., Безверхая Н.С. // Известия ВУЗА. Пищевая технология - 2008. - № 2-3. - С. 26-28.
4. Бердина А.Н. Биологическая ценность семян подсолнечника и продуктов их переработки / Бердина А.Н., Ильчишина Н.В., Безверхая Н.С. // Известия ВУЗА. Пищевая технология - 2008. - № 5-6. - С. 44-45
5. Бердина А.Н. Перспективные исследования гибридных и сортовых семян подсолнечника новой селекции / Щербаков В.Г., Лобанов В.Г., Францева Т.П., Бердина А.Н., Прудникова Т.Н., Ильчишина Н.В., Зыкина А.М. // Материалы международных научных конференций «Фундаментальные исследования» - 2006. - № 6. - С. 63
6. Бердина А.Н. Биологическая ценность масел из новых сортов и гибридов семян подсолнечника / Бердина А.Н., Ильчишина Н.В., Прудникова Т.Н., Безверхая Н.С. // Сборник тезисов VIII всероссийской конференции молодых ученых с международным участием «Пищевые технологии» в Казане, 9-10 апреля 2007г. - Казань - 2007. - С. 53
7. Бердина А.Н. Активность липазы при созревании и ускоренном старении гибридного подсолнечника / Бердина А.Н., Ильчишина Н.В., Безверхая Н.С. // Научное обеспечение агропромышленного комплекса: Материалы 1-ой всероссийской науч.-практ. конф. молод. ученых. - Краснодар: КУБГАУ. - 2007. - С. 150-151.
8. Бердина А.Н. Аминокислотный и жирнокислотный состав липопротеинов подсолнечника / Бердина А.Н. // Материалы всероссийской научно-практической конференции аспирантов, соискателей и докторантов. - Майкоп: Изд-во ООО «Аякс». - 2008. - С. 87-89.
9. Бердина А.Н. Активность липаз и протеиназ семян подсолнечника гибрида Юпитер при созревании на растении и после тепловой сушки / Бердина А.Н., Ильчишина Н.В., Безверхая Н.С. // Материалы IV съезда Российского общества биохимиков и молекулярных биологов. Новосибирск: издательство «Арта». - 2008. - С. 370.
10. Бердина А.Н. Жироудерживающая и жироэмульгирующая способность липопротеинов подсолнечника / Бердина А.Н., Ильчишина Н.В., Безверхая Н.С. // «Пища. Экология. Качество». Труды V Международной научно-практической конференции / РАСХН. Сибирское отделение ГНУ СИБНИПТИП. - Новосибирск, 2008. - С. 243-244.
11. Бердина А.Н. Исследование биохимического состава липопротеинов семян подсолнечника / Бердина А.Н., Ильчишина Н.В., Ефименко С.Г. // Масличные культуры. Научно-технический бюллетень Всероссийского научно-исследовательского института масличных культур - 2008. - Вып. 2 (139). - С. 15-18.
12. Патент РФ № 2340625 Способ получения липопротеинов из семян подсолнечника / Бердина А.Н., Ильчишина Н.В. (РФ). - Заявка № 2007122517 от 15.06.2007 г.