Клинико-диагностическое значение исследования активности 5´-нуклеотидазы, ксантиноксидазы, ксантиндегидрогеназы в лизатах лимфоцитов, эритроцитов и плазме крови больных системной склеродермией - Автореферат

Отработать методы выделения лимфоцитов и эритроцитов из венозной крови и методы определения активности КО, КДГ, 5?-НТ в плазме крови, лизатах лимфоцитов и эритроцитов здоровых людей, установить референтные величины (условную норму) активности этих энзимов и изучить зависимость энзимных показателей от пола и возраста. Изучить активность КО, КДГ и 5?-НТ в лизатах лимфоцитов, эритроцитов и плазме крови больных ССД в процессе стационарного лечения в зависимости от степени активности патологического процесса, характера течения заболевания и стадии болезни. Впервые у больных ССД в лизатах лимфоцитов, эритроцитов и плазме крови было проведено комплексное исследование активности трех энзимов ПМ: ксантиноксидазы, ксантиндегидрогеназы и 5?-нуклеотидазы в процессе стационарного лечения и показано, что изученные энзимные показатели в комплексе с клиническими данными способствуют в уточнении степени активности патологического процесса, характера течения заболевания, стадии болезни и объективизации оценки эффективности проводимой терапии больных ССД. Между всеми вариантами течения заболевания выявлены существенные энзимные различия: у больных с хроническим течением, по сравнению с подострым, в плазме крови ниже активность всех энзимов (р <0,001), в эритроцитах и лимфоцитах выше активность всех энзимов (р <0,001); по сравнению с острым течением, в плазме ниже активность КО, КДГ (все р <0,001) и выше активность 5"-НТ (р <0,01), в лимфоцитах и эритроцитах выше активность всех энзимов (все р <0,001). Оказалось, что у больных ССД с I степенью в плазме крови активность КО была выше, чем у здоровых в 15,8% случаев, КДГ - в 36,8%, 5"-НТ - в 42,1%, в эритроцитах активность КО была выше в 100%, 5"-НТ - в 73,7%, а активность КДГ в 100% случаев ниже, в лимфоцитах активность КО ни у одного больного не выходила за границы референтных величин, а активность КДГ и 5"-НТ у всех больных (100%) была ниже, чем у здоровых.Чем выше активность патологического процесса, тем в лимфоцитах и эритроцитах ниже активность всех энзимов, а в плазме выше активность КО, КДГ и 5?-НТ, но при III степени активность плазменной 5?-НТ опускалась ниже уровня здоровых. У больных с II степенью в плазме выше активность всех энзимов, в лимфоцитах ниже активность всех энзимов, в эритроцитах выше активность КО, 5?-НТ и ниже активность КДГ. У больных ССД с I степенью, по сравнению с II, в плазме и лимфоцитах ниже, а в эритроцитах выше активность всех изученных энзимов, по сравнению с III степенью, в плазме ниже активность КО, КДГ и выше активность 5?-НТ, в эритроцитах и лимфоцитах выше активность всех энзимов. Показатели активности КО, КДГ и 5?-НТ являются более информативными в отражении минимальной активности процесса при ССД, чем общепринятые клинико-иммуно-биохимические показатели: если в эритроцитах активность КО в 100% случаев была выше, а КДГ в 100% случаев ниже уровня здоровых, в лимфоцитах активность КДГ и 5?-НТ также в 100% случаев ниже, чем у здоровых, то общепринятые показатели превышали верхние границы нормы: иммуноглобулины G - в 47,4% случаев, гамма-глобулины и иммуноглобулины М - в 42,1%, АНФ - в 31,6%, СОЭ, фибриноген и ЦИК - в 26,3%, антитела к н-ДНК - в 21,1% случаев. Между всеми вариантами течения выявлены существенные энзимные различия: у больных с хроническим течением, по сравнению с подострым, в лимфоцитах и эритроцитах выше, а в плазме ниже активность всех энзимов; по сравнению с острым течением, в лимфоцитах и эритроцитах выше активность всех энзимов, в плазме ниже активность КО, КДГ и выше 5?-НТ.

1. У больных ССД (всей группы) при поступлении на лечение выявлено в плазме крови повышение активности КО, КДГ, 5?-НТ, в лимфоцитах снижение активности КО, КДГ, 5?-НТ, в эритроцитах повышение активности КО, 5?-НТ и снижение активности КДГ. Чем выше активность патологического процесса, тем в лимфоцитах и эритроцитах ниже активность всех энзимов, а в плазме выше активность КО, КДГ и 5?-НТ, но при III степени активность плазменной 5?-НТ опускалась ниже уровня здоровых.

2. У больных ССД с I степенью активности процесса, по сравнению со здоровыми, в плазме выше активность 5?-НТ, КДГ, в эритроцитах выше активность КО, 5?-НТ и ниже активность КДГ, в лимфоцитах ниже активность всех изученных энзимов. У больных с II степенью в плазме выше активность всех энзимов, в лимфоцитах ниже активность всех энзимов, в эритроцитах выше активность КО, 5?-НТ и ниже активность КДГ. У больных с III степенью в плазме выше активность КО, КДГ, в эритроцитах ниже активность КО, КДГ, в лимфоцитах ниже активность всех энзимов.

3. Выявлены существенные энзимные различия между всеми степенями активности процесса. У больных ССД с I степенью, по сравнению с II, в плазме и лимфоцитах ниже, а в эритроцитах выше активность всех изученных энзимов, по сравнению с III степенью, в плазме ниже активность КО, КДГ и выше активность 5?-НТ, в эритроцитах и лимфоцитах выше активность всех энзимов. У больных ССД с II степенью, по сравнению с III, ниже активность КО и выше 5?-НТ, в эритроцитах и лимфоцитах выше активность всех энзимов.

4. Показатели активности КО, КДГ и 5?-НТ являются более информативными в отражении минимальной активности процесса при ССД, чем общепринятые клинико-иммуно-биохимические показатели: если в эритроцитах активность КО в 100% случаев была выше, а КДГ в 100% случаев ниже уровня здоровых, в лимфоцитах активность КДГ и 5?-НТ также в 100% случаев ниже, чем у здоровых, то общепринятые показатели превышали верхние границы нормы: иммуноглобулины G - в 47,4% случаев, гамма-глобулины и иммуноглобулины М - в 42,1%, АНФ - в 31,6%, СОЭ, фибриноген и ЦИК - в 26,3%, антитела к н-ДНК - в 21,1% случаев.

5. У больных ССД с хроническим течением заболевания, по сравнению со здоровыми, в плазме крови выше активность КДГ и 5?-НТ, в эритроцитах выше активность КО, 5?-НТ и ниже КДГ, в лимфоцитах ниже активность всех энзимов. У больных с подострым течением в плазме выше, а в лимфоцитах ниже активность всех энзимов, в эритроцитах выше активность КО, 5?-НТ и ниже КДГ. У больных с острым течением в плазме выше, а в эритроцитах ниже активность КО и КДГ, в лимфоцитах ниже активность всех энзимов.

6. Между всеми вариантами течения выявлены существенные энзимные различия: у больных с хроническим течением, по сравнению с подострым, в лимфоцитах и эритроцитах выше, а в плазме ниже активность всех энзимов; по сравнению с острым течением, в лимфоцитах и эритроцитах выше активность всех энзимов, в плазме ниже активность КО, КДГ и выше 5?-НТ. У больных с подострым, по сравнению с острым течением, в лимфоцитах и эритроцитах выше активность всех энзимов, а в плазме ниже активность КДГ и выше 5?-НТ.

7. У больных ССД с I стадией болезни, по сравнению с больными с II стадией, в плазме ниже активность КО, в лимфоцитах выше активность КО и 5?-НТ, в эритроцитах выше активность всех энзимов.

8. Наибольшее влияние на активность КО, КДГ и 5?-НТ во всех трех средах исследований оказывает активность патологического процесса, меньшее - стадия болезни и характер течения заболевания.

9. Анализ корреляционных связей между активностью энзимов при I степени активности процесса выявил в плазме крови малозначащие связи между всеми энзимами, в лимфоцитах прямые средней силы связи между всеми энзимами, в эритроцитах прямые умеренные связи между КО и 5?-НТ и обратные сильные связи между КО и КДГ, КДГ и 5?-НТ; при II степени - в плазме наличие прямых умеренных и сильных связей между всеми энзимами, в эритроцитах - обратные умеренные и сильные связи между всеми энзимами, в лимфоцитах - прямые умеренные и сильные связи между всеми энзимами.

10. В процессе лечения больных ССД активность всех энзимов менялась уже в первые 10-12 дней в соответствии с меняющимся клиническим состоянием больных, а период наступающей клинической ремиссии чаще всего сопровождался нормализацией активности всех энзимов в плазме, 5?-НТ в эритроцитах на фоне остающейся сниженной активности всех энзимов в лимфоцитах.

11. Исследования активности КО, КДГ и 5?-НТ в лизатах лимфоцитов, эритроцитов и плазме крови больных ССД в комплексе с клиническими данными способствуют улучшению диагностики степени активности патологического процесса при ССД, характера течения, стадии заболевания, уточнению роли энзимов пуринового метаболизма в патогенезе ССД и объективизации оценки эффективности проводимой терапии больных ССД.

Практические рекомендации

1. При определении границ условной нормы (референтных пределов) активности энзимов в крови здоровых людей использовалась формула: М±2s, исходя из которой 95% возможных результатов не должны выходить за эти границы. Исходя из этого, референтные величины активности энзимов в плазме крови (нмоль/мл/мин) здоровых людей составили для КО - 2,26-4,61, КДГ - 3,8-6,6, 5?-НТ - 6,7-10,8; в лизатах эритроцитов (нмоль/мл/мин - 109 эритроцитов) для КО - 18,5-26,1, КДГ - 42,4-55,2, 5?-НТ - 28,7-51,5; в лизатах лимфоцитов (нмоль/мл/мин - 107 лимф.) для КО - 12,1-27,7, КДГ - 27,6-38,0, 5?-НТ - 29,0-48,8.

2. Для выявления минимальной активности патологического процесса при ССД и ее разграничения с периодом клинической ремиссии рекомендуется определять в эритроцитах активность КО и КДГ, которые в случае активации процесса в 100% случаев выходят за границы нормы (КО - выше, а КДГ - ниже), а также активности КДГ и 5?-НТ, которые в 100% случаев ниже, чем у здоровых.

3. Для контроля эффективности проводимой терапии в первые 10 дней лечения целесообразно ориентироваться на динамику активности энзимов КО, КДГ, 5?-НТ в лимфоцитах, активность которых в случаях улучшения клинического состояния больных повышается, а период наступающей клинической ремиссии чаще всего сопровождается нормализацией активности КО, 5?-НТ в плазме крови.

Карпова О.В., Левкина М.В., Стажаров М.Ю., Мартемьянов В.Ф. Клинико-диагностическое значение исследования активности 5?-нуклеотидазы в лимфоцитах крови больных системной склеродермией // Актуальные проблемы современной ревматологии. Сб. науч. работ / Под ред. акад. РАМН А.Б. Зборовского. - Вып. XXII. - Волгоград, 2005. - С. 70-71.

Карпова О.В., Мартемьянов В.Ф., Стажаров М.Ю., Мякишев М.В. Активность ксантиндегидрогеназы в лимфоцитах крови больных системной склеродермией // Актуальные проблемы современной ревматологии. Сб. науч. работ / Под ред. акад. РАМН А.Б. Зборовского. - Вып. XXII. - Волгоград, 2005. - С. 71-72.

Стажаров М.Ю., Карпова О.В., Трубенко Ю.А., Мартемьянов В.Ф. Клинико-диагностическое значение исследования активности ксантиноксидазы в клетках крови у больных системной склеродермией // Актуальные проблемы современной ревматологии. Сб. науч. работ / Под ред. акад. РАМН А.Б. Зборовского. - Вып. XXII. - Волгоград, 2005. - С. 129-130.

Карпова О.В., Мозговая Е.Э., Зборовская И.А., Мартемьянов В.Ф., Бедина С.А. Активность ксантиноксидазы, ксантиндегидрогеназы, 5?-нуклеотидазы при системной склеродермии // Состояние здоровья населения Волгоградской области и современные медицинские технологии его коррекции : Мат. науч-практич. конф.. - Волгоград, 2005. - С. 192-193.

Зборовский А.Б., Карпова О.В., Емельянов Н.И., Стажаров М.Ю. Клинико-диагностическое значение исследования активности ксантиндегидрогеназы в лизатах эритроцитов больных системной склеродермией // Актуальные проблемы современной ревматологии. Сб. науч. работ / Под ред. акад. РАМН А.Б. Зборовского. - Вып. XXIII. - Волгоград, 2006. - С. 52-53.

Карпова О.В., Емельянов Н.И., Стажаров М.Ю., Мартемьянов В.Ф. Активность ксантиноксидазы в эритроцитах крови больных системной склеродермией // Актуальные проблемы современной ревматологии. Сб. науч. работ / Под ред. акад. РАМН А.Б. Зборовского. - Вып. XXIII. - Волгоград, 2006. - С. 64-65.

Карпова О.В., Фофанова Н.А., Мартемьянов В.Ф. Клинико-диагностическое значение исследования активности ксантиноксидазы (КО), ксантиндегидрогеназы (КДГ) и 5?-нуклеотидазы (5?-НТ) в плазме крови больных системной склеродермией (ССД) // Актуальные проблемы современной ревматологии. Сб. науч. работ / Под ред. акад. РАМН А.Б. Зборовского. - Вып. XXIII. - Волгоград, 2006. - С. 65-66.

Мартемьянов В.Ф., Карпова О.В., Емельянов Н.И., Бедина С.А. Активность 5?-нуклеотидазы в эритроцитах крови больных системной склеродермией // Актуальные проблемы современной ревматологии. Сб. науч. работ / Под ред. акад. РАМН А.Б. Зборовского. - Вып. XXIII. - Волгоград, 2006. - С. 91-92.

Карпова О.В., Бедина С.А. Активность ксантиноксидазы, ксантиндегидрогеназы, 5?-нуклеотидазы крови больных системной склеродермией // Актуальные проблемы экспериментальной и клинической медицины: Мат. 64-й открытой итоговой науч. конф. молодых ученых и студентов ВОЛГМУ / Под ред. акад. РАМН В.И. Петрова. - Волгоград, 2006. - С. 100.

Карпова О.В., Рыбак В.Л. Клинико-диагностическое значение определения активности ксантиноксидазы, ксантиндегидрогеназы, 5?-нуклеотидазы в лизатах лимфоцитов и плазме крови больных системной склеродермией // Вестник ВОЛГМУ - 2006. - № 1. - С. 62-66.

Размещено на .ru