Характеристика калієвих іонних струмів плазматичної мембрани гладеньком’язових клітин сім’явивідних протоків щура - Автореферат

НАЦІОНАЛЬНА АКАДЕМІЯ НАУК УКРАЇНИ1991) вказують на те, що і потенціалкерований вхід кальцію через плазматичну мембрану відповідає за активацію скоротливого апарату в гладеньких мязах (Vogalis et al. Проведена робота, присвячена вивченню властивостей калієвої провідності плазматичної мембрани ГМК епідидимальної частини сімявивідних протоків (vas deferens) щура, допомагає глибше зрозуміти механізми та шляхи регуляції скоротливої активності вісцеральних гладеньких мязів. Метою даної роботи було дослідження фармако-біофізичних характеристик складових калієвого струму мембрани поодиноких ГМК vas deferens щура та зясування їх функціональної ролі в регуляції скоротливої активності даного типу гладеньких мязів. KN-93 прискорював інактивацію А-струму та значно уповільнював вихід з інактивації, що свідчило про те, що А-струм ГМК vas deferens щура може модулюватись активністю кальмодулінзалежної протеїнкінази. Отримані дані сприяють більш глибокому розумінню процесів функціонування гладеньких мязів сімявивідних протоків та вказують можливі шляхи регуляції активності цієї тканини за допомогою фармакологічного впливу на окремі компоненти калієвого струму, що може бути використано, наприклад, при розробці нових препаратів для лікування захворювань, повязаних із порушенням функціонування даного типу гладеньких мязів.Струм, отриманий внаслідок віднімання струмів в безкальцієвому розчині від відповідних струмів у контролі, мав досить повільну кінетику активації та інактивації і був ідентифікований як Са2 -залежний К струм. Для порівняння блокуючого ефекту ТЕА і паксиліну криві доза-ефект були побудовані по точках, значення яких являли собою середні значення струмів для кожної з відповідних концентрацій блокаторів наприкінці тестового імпульсу (останні 50 мс деполяризуючого зміщення загальною тривалістю 500 мс), що було зроблено з метою виключити вплив швидкого струму А-типу, оскільки за 450 мс тестового імпульсу цей струм фактично повністю інактивувався. Також, з метою зясування участі Са2 -залежного К струму в регуляції мембранного потенціалу спокою, нами було проведено ряд експериментів з використанням методики “patch clamp” в режимі фіксації струму. Виходячи з відмінностей у фармакологічних властивостях та кінетичних характеристиках, було ідентифіковано дві потенціалкерованих компоненти вихідного калієвого струму ГМК vas deferens щура - струм А-типу (IK,f) , що мав швидку кінетику активації та інактивації і був чутливим до блокуючої дії 4-амінопіридину (4-АП), та ТЕА-чутливий струм затриманого випрямлення (ІК,dr), інактивація якого була значно повільнішою. Пікові значення струмів, отриманих впродовж тестової деполяризації, були нормалізовані відносно пікового значення струму при рівні кондиціонуючого зміщення мембранного потенціалу-120 МВ і представлені як функція потенціалу кондиціонуючого зміщення.Отримані експериментально значення стаціонарної інактивації струму А-типу добре погоджувалися з кривою, побудованою за рівнянням Больцмана.За допомогою методу “patch clamp” у конфігурації перфорування мембрани за допомогою антибіотика амфотеріцину Б досліджено вихідний калієвий трансмембранний іонний струм ізольованих гладенькомязових клітин епідидимального відділу сімявивідних протоків щура. Встановлено, що даний струм, викликаний ступінчатою деполяризацією клітинної мембрани, складається з трьох компонент: Са2 -залежного К струму, який переноситься через ВКСА канали, і потенціалкерованих швидкого А-струму та струму затриманого випрямлення. А-струм має швидку кінетику активації та інактивації, потенціал його половинної стаціонарної інактивації складає близько-70 МВ. Цей струм повністю блокується 4-АП у концентрації 10 ММ і не виявляє чутливості до ТЕА. Також цей струм виявляє чутливість до блокуючої дії клофіліуму; значення ЕС50 складає близько 12 МКМ.