Характеристика изменений патогенного потенциала микроорганизмов-симбионтов в протозойно-бактериальных ассоциациях - Автореферат

Автореферат диссертации на соискание ученой степени доктора биологических наукРабота выполнена в ГОУ ВПО «Ульяновский государственный университет» Вавилова», профессор Щербаков Анатолий Анисимович доктор медицинских наук, старший научный сотрудник, зав. лабораторией коллекционных штаммов отдела Государственной коллекции патогенных бактерий ФГУЗ РОСНИПЧИ «Микроб» Плотников Олег Петрович доктор медицинских наук, профессор, заведующий кафедрой инфекционных болезней ФППС ГОУ ВПО Оренбургской государственной медицинской академии Каган Юда Давидович Защита состоится на заседании диссертационного совета Д.208.066.03 при Оренбургской государственной медицинской академии по адресу: 460000, г.Оренбург, ул.В последние годы появились данные о важной роли в формировании патобиоценозов кишечника, помимо бактерий и грибов, таких простейших как Entamoeba hystolytica, Giardia lamblia и Criptosporidium (Воробьев и др., 2001; Плотников, 2002; Крылов, 2004). (1989, 1990, 1996, 2003) показано, что бактерии, находясь в клетке простейших, избегают массовой гибели, а их хозяева - простейшие поддерживают их численность и вирулентность. Проводимые исследования по характеристике ассоциативного симбиоза простейших с другими микроорганизмами ограничиваются изучением механизмов выживания и их взаимодействия вне макроорганизма, который также представляет собой среду обитания для огромного количества видов микробов (Несвижский, Воробьев, Белоносов, 1997; Шендеров, 1998, 1999; Ардатская, Дубинин, Минушкин, 2001). Раскрытие механизмов межмикробных взаимодействий, определяющих формирование и поддержание ассоциативных симбиозов организма хозяина в норме и при патологических состояниях, открывает перспективы решения фундаментальных проблем микробиологии - выявления причинно-следственных связей формирования патогенных вариантов микросимбионтов. По материалам диссертационной работы написаны монографии «Бластоцистная инвазия и дисбактериоз кишечника», «Экологические параметры микробиоты кишечника при протозойных инвазиях» «Простейшие Blastocystis hominis и их влияние на макроорганизм»; практические рекомендации: «Экологическая характеристика микробиоценоза кишечника», «Особенности микроэкологии кишечника больных псориазом», «Биологические свойства микробов-симбионтов в условиях протозойно-бактериальных ассоциаций макроорганизма», «Дисбиоз кишечника и методы его диагностики».Это может свидетельствовать в пользу того, что вирулентность микроорганизма усиливается вследствие укрепления клеточной оболочки бластоцист целлюлозой и другими полимерами, что придает микробу конкурентные преимущества в условиях кишечного биотопа и может служить лигандами при взаимодействии с пили бактерий. Исследования также выявили, что вегетирование в кишечном биотопе вирулентных Blastocystis hominis, сопровождалось не только резким уменьшением общего содержания микросимбионтов Escherichia coli с нормальной ферментативной активностью, но и появлением большого количества штаммов, обладающих гемолитической и лактозонегативной активностями. Исследования изменения вирулентности эшерихий, как механизма адаптации к ассоциативному симбиотическому взаимодействию с простейшими B.hominis, выявили увеличение данного показателя у штаммов в сообществе с высоковирулентными бластоцистами по сравнению с умеренновирулентными, который составил LD50/lg 3,7 и 3,1 ед соответственно (рис. К 21 суткам численность E.coli возросла до значений 2,2х104±2,3 при взаимодействии с высоковирулентными B.hominis и до 3,9х103±1,5 КОЕ/мл при взаимодействии с умеренновирулентными бластоцистами (в контроле плотность популяции E.coli составляла 8,4±0,2 и 1,8±0,1 КОЕ/мл соответственно, р?0,001). Тестирование микросимбионтов E.coli, выделенных из ассоциации с авирулентными бластоцистами, показали, что чаще всего, независимо от периода исследования и изучаемой фенотипической группы бактерий, искомые ампликоны выявлялись при использовании праймеров к РАРС, РАРН и SFAA генам.Литическую активность по отношению к B.hominis различной вирулентности проявляли ферменты протеаза, хитиназа, глюканаза, липаза и целлюлаза. Выявлена прямая взаимосвязь между нарушениями микробиоценоза кишечника и вирулентностью B.hominis, сопровождающимися снижением высеваемости бифидобактерий и лактобацилл, а также увеличением количества микробов родов: Proteus, Klebsiella, Staphylococcus, Clostridium, Candida, Enterococcus. Установлено, что вегетирование в микробиоценозе кишечника вирулентных бластоцист сопровождалось накоплением атипичных штаммов и повышением показателя вирулентности одного из основных микросимбионтов - E.coli с LD50/lg 1,1±0,4 до 3,7±0,3 ед.