Технология получения протопластов для культурных растений. Анализ применения протопластов в биотехнологии при гибридизации соматических клеток, клеточной селекции и генетической инженерии. Исследование способов культивирования изолированных протопластов.
Аннотация к работе
При использовании каллуса и суспензионной культуры лучшей является поздняя стадия логарифмического роста (клеточные стенки легче разрушаются ферментами, протопласты наиболее жизнеспособны). После обработки ферментным раствором и изоляции протопласты должны быть очищены от остатков ткани и отмыты от ферментов . Протопласты отбирают пипеткой и переносят в среду, содержащую осмотик, в которой их центрифугируют второй раз , отмывая от ферментного раствора. Протопласты фиксируются на крышке чашки Петри, что дает возможность наблюдать развитие каждого протопласта. Механический способ выделения протопластов включает плазмолиз, в результате которого протопласты отходят от клеточных стенок, с последующим разрезанием клеточных оболочек, после чего происходит выход протопластов в среду.