Исследование ионобменной хроматографии (разделения молекул на основании ионных взаимодействий). Подвижная и неподвижная фазы. Катионная и анионная ионообменная хроматография. Хроматографическое фракционирование белков. Выбор условий хроматографии.
Аннотация к работе
Реферат на тему: ИОНООБМЕННАЯ ХРОМАТОГРАФИЯ Подвижная и неподвижная фазы Переходя к рассмотрению вариантов истинной хроматографии, полезно ввести понятия «подвижной» и «неподвижной» фаз. Подвижную фазу, естественно, составляют молекулы, находящиеся вне гранул. Между тем, гибкость и эффективность метода ионообменной хроматографии опирается как раз на возможность управления этой ситуацией, а вместе с ней и силой связи молекул фракционируемого вещества с матрицей гранул - характером сорбции этих молекул. Ионогенные группы Вместо неизменных ионов на нитях матрицы и на поверхностях макромолекул (например белков) располагаются «ионогенные группы», которые в зависимости от условий в окружающей их водной среде (рН, наличие солей) могут проявлять себя либо как открытые, несущие электрический заряд ионы, либо быть нейтрализованными за счет сближения с ними несущих противоположный заряд ионов, например Na или С1-, а иногда за счет диссоциации или присоединения протонов Н . Вместо химической модификации, каковой являются оба названных явления, нейтрализация заряда ионогенной группы может происходить и за счет его экранизации противоположно заряженным ионом, подходящим под действием кулоновской силы вплотную к ионогенной группе из окружающей среды. Фирма Pharmacia для своей системы быстрой хроматографии белков разработала на основе исключительно однородных по размерам гранул два типа сильных ионообменников: анионообменник под торговым названием «Моно Ф» - активная группа триметиламинометил и катионообменик «Моно S» - активная группа сульфометил .