Получение клеточных фракций: понятие и содержание данного процесса, подходы и методы его реализации. Необходимость и этапы общего разрушения клетки, ее гомогенизации. Получение отдельных клеточных компонентов. Анализируемые параметры исследуемой клетки.
Аннотация к работе
Фракционирование клеток клетка фракция гомогенизацияТак, в настоящее время в виде чистых фракций получают практически любые клеточные органеллы и структуры: ядра, ядрышки, хроматин, ядерные оболочки, плазматическую мембрану, вакуоли эндоплазматического ретикулума, его рибосомы, рибосомы гиалоплазмы, аппарат Гольджи, митохондрии, их мембраны, пластиды, пероксисомы, микротрубочки и др. При центрифугировании раньше всего и при небольших ускорениях осядут ядра и неразрушенные клетки, при 15-30 тыс. g осядут крупные частицы, макросомы, состоящие из митохондрий, мелких пластид, пероксисом, лизосом и др., при 50 тыс. g осядут микросомы, фрагменты вакуолярной системы клетки. Так, используя очищенные от гранул желтка экстракты цитоплазмы яиц земноводных или яиц морских ежей, можно получить ядра с ядерной оболочкой из введенной в эту бесклеточную систему чужеродной ДНК (например, ДНК бактериофага). После разделения такой клетки получится истинно гибридная клетка. Так, разрушив актиновый компонент цитоскелета и подвергнув клетки центрифугированию, клетку можно разделить на две части: ядро с узким ободком цитоплазмы - кариопласт и на оставшуюся часть цитоплазмы - цитопласт.