Фармакогностическое исследование по обоснованию целесообразности использования травы гречихи посевной как потенциального сырьевого источника флавоноидных отечественных лекарственных препаратов. Анализ показателей качества рутина как стандартного образца.
Аннотация к работе
АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата фармацевтических наук ФАРМАКОГНОСТИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ ТРАВЫ ГРЕЧИХИ ПОСЕВНОЙ (FAGOPYRUM SAGITTATUM GILIB.)Диссертационная работа выполнена в Государственном бюджетном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Самарский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации (ГБОУ ВПО САМГМУ Минздравсоцразвития России) Ведущая организация: Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Курский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения и социального развития Российской ФедерацииНа наш взгляд, перспективным отечественным источником рутина и других флавоноидов может являться трава гречихи посевной (Fagopyrum sagittatum Gilib.), широко культивируемая как ценная пищевая культура в РФ, в том числе и в Самарской области. Таким образом, представляется актуальным фитохимическое исследование травы гречихи посевной в рамках разработки отечественного стандартного образца и современных подходов к химическому анализу ЛРС, а также создание новых флавоноидных отечественных средств на основе комплексного использования данного растения. Обоснована необходимость использования ГСО рутина в методиках качественного и количественного анализа травы гречихи посевной и препаратов на основе рутина. Изучены показатели качества травы гречихи посевной и новых лекарственных препаратов «Гречихи экстракт жидкий», «Гречихи экстракт густой», которые нашли свое отражение в соответствующих проектах ФСП. Оформлены проекты ФС «Гречихи посевной трава», ФСП на лекарственные препараты «Гречихи экстракт жидкий», «Гречихи экстракт густой», направленные на экспертизу в ФГБУ «Научный центр экспертизы средств медицинского назначения» Минздравсоцразвития РФ (входящий № 07а - ЦФМС от 19.01.11).Исследования морфолого-анатомического строения изучаемого сырья гречихи (лист, стебель, цветок, плод) и его порошка проводили с использованием цифрового микроскопа Motic DM111 (с кратностью увеличения 4х10; 10х10; 40х10; 100х10) и цифрового стереоскопического микроскопа Motic DM-39С-N9GO-A (возможность увеличения: х 20; х 40). Микроскопический анализ травы гречихи позволил выявить диагностические признаки сырья, заключающиеся в наличии сосочковидных выростов по краю и по жилкам листа (рис. В результате изучения химического состава травы гречихи посевной (Fagopyrum sagittatum Gilib.), культивируемой в Самарской области, выделены и идентифицированы 5 индивидуальных соединений, относящихся к флавоноидам (рутин, кверцетин, изокверцитрин) и фенилпропаноидам (хлорогеновая, кофейная кислоты) (табл. Для определения подлинности травы гречихи посевной разработана методика тонкослойной хроматографии (ТСХ). На хроматограмме обнаруживается доминирующее пятно с величиной Rf около 0,4 (рутин), а также проявляются другие пятна, в частности, пятно фиолетового цвета с величиной Rf - 0,2 (хлорогеновая кислота), с Rf - 0,45 (никотифлорин), Rf - 0,8 (кверцетин) и с Rf - 0,6 (изокверцитрин) (рис.17 августа 7 массовое цветение - начало плодоношения 5,67 0,04 Проведенные исследования образцов, собранных в разные фазы вегетации, свидетельствуют о том, что по мере роста гречихи концентрация БАС в вегетативной массе вначале возрастает, достигая максимума во время полного (массового) цветения - начала плодоношения (в возрасте 30-40 дней), а далее постепенно уменьшается во время завязывания плодов (табл. Наибольшее содержание флавоноидов выявлено в образцах, собранных в фазу массового цветения - начала плодоношения, при этом трава гречихи после обмолота представляет собой не менее интересное сырье в качестве источника флавоноидов (2,51 0,04%). В связи с тем, что спектрофотометрическая методика не позволяет избирательно определить целевое вещество (рутин) в смеси флавоноидных соединений, изучена возможность определения данного флавоноида методом хроматоспектрофотометрии. Для оценки количественного содержания рутина в траве гречихи посевной был предложен метод хроматоспектрофотометрии с использованием ГСО рутина.Содержание рутина в траве гречихе посевной, культивируемой в Самарской области, находится в диапазоне 2,50-3,70 %. Анализ водно-спиртовых извлечений из травы гречихи посевной проводили методом обращенно-фазовой ВЭЖХ на хроматографе «Милихром-5» в изократическом режиме (колонка КАХ 6-80-4 № 6 25.01.99, стационарная фаза - «Separon C18», подвижная фаза - смесь ацетонитрила и воды в соотношении 30:70 с добавлением 1% ледяной уксусной кислоты, скорость потока - 0,1 мл/мин). 5А) пик № 3 соответствует по времени удерживания пику ГСО рутина, анализ которого проводился в тех же условиях, что и проба водно-спиртового извлечения травы гречихи посевной (рис. Содержание рутина в траве гречихе посевной, культивируемой в Самарской области, находится в диапазоне 2,50-3,70 %.
План
ОСНОВНОЕ СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫСодержание суммы флавоноидов в пересчете на рутин в зависимости от фазы вегетацииСодержание рутина в траве гречихи посевной в процентах (X) на абсолютно сухое сырье вычисляли по формуле: