Фізіологічні закономірності впливу окремих параметрів процесу кріоконсервації на запліднюючу здатність сперміїв кнура іn vivo - Автореферат

УКРАЇНСЬКА АКАДЕМІЯ АГРАРНИХ НАУК ФІЗІОЛОГІЧНІ ЗАКОНОМІРНОСТІ ВПЛИВУ ОКРЕМИХ ПАРАМЕТРІВ ПРОЦЕСУ КРІОКОНСЕРВАЦІЇ НА ЗАПЛІДНЮЮЧУ ЗДАТНІСТЬ СПЕРМІЇВ КНУРА IN VIVO Науковий керівник: доктор біологічних наук, академік УААН, професор Коваленко Віктор Федорович Інститут свинарства ім. Офіційні опоненти: доктор біологічних наук, Бусенко Олександр Трохимович, Національний університет біоресурсів і природокористування України Кабінету Міністрів України, професор кафедри виробництва молока та яловичини кандидат сільськогосподарських наук, Бондаренко Олена Миколаївна, Полтавська державна аграрна академія, доцент кафедри технології виробництва продукції тваринництва З дисертацією можна ознайомитись у бібліотеці Інституту свинарства ім.У розвитку галузі свинарства найбільше значення має інтенсивність відтворення поголівя, що неможливо вирішити без широкого застосування штучного осіменіння, у тім числі кріоконсервації сперми. Сучасний стан кріоконсервації сперми кнура не сягає комерційного рівня, оскільки стандартне застосування 5-6 млрд. розморожених сперміїв не забезпечує такого багатопліддя свиноматок, як осіменіння нативною спермою, а після відтавання менше 40 % сперміїв зберігають інтактну мембрану, структурна і функціональна цілісність якої визначає результати заморожування (Pena F.J et al., 2005). Квасницького УААН (ІСВ УААН); ”Розробити нові фізіолого-біохімічні методи підвищення конверсії корму та репродуктивної здатності свиней“ (№ держреєстрації 0101U003259); „Вивчити фізіологічні та біохімічні особливості харчотравлення та репродукції у свиней і розробити нові способи підвищення їх репродуктивності” (№ держреєстрації 0197U003277); „Розробити і впровадити новітні способи технології штучного осіменіння свиней та трансплантації ембріонів в умовах промислової технології” (№ держреєстрації 0106U004221). Для досягнення поставленої мети необхідно було вирішити такі завдання: кріоконсервація кнур сперма запліднюючий на підставі одержаних параметрів розробити схему спрощеної технології кріоконсервації сперми кнура і визначити її зоотехнічну ефективність за результатами осіменіння свиноматок;Застосування ТР-тесту виявило вірогідне зниження цього показника у зразках, витриманих лише 1 год. при 5 ОС, і відсутність різниці у межах 2-5 год. еквілібрації (Табл. Це свідчило про доцільність її обмеження 2-3 год., але застосування розробленого нами методу неінвазійного визначення терміну виживаності сперміїв у репродуктивному тракті свиноматки in vivo виявило тенденцію до негативного впливу скороченої до 2-х год. фази еквілібрації. Вплив швидкості заморожування, ступеня розбавлення сперми і концентрації сперміїв на їх ФА було визначено за трьох режимів швидкості зниження температури від 5 ОС до-196 ОС: повільний-50,25 ОС/хв., помірний 100,5 ?С/хв. і швидкий 301,5 ОС/хв. Виявлено, по-перше, різко негативний вплив повільного темпу заморожування і сприятливий - найбільш швидкого; по-друге - істотне зниження ФА сперміїв із збільшенням ступеня розбавлення сперми, незалежно від темпу зниження температури. Дослідження ФА сперміїв, заморожених у гранулах обємом 0,5 см? і брикетах різного обєму і товщини показало, що незалежно від обєму заморожуваної порції еякуляту, ФА сперміїв зменшується паралельно зі збільшенням товщини шару сперми (Табл.У дисертації наведено теоретичне узагальнення і нове вирішення проблеми застосування у свинарстві кріоконсервованої сперми на підставі розкритих фізіологічних закономірностей впливу окремих параметрів технології кріоконсервації на функціональну активність і запліднюючу здатність сперміїв кнура у сезонному і породному аспектах у комплексі з розробленим режимом штучного осіменіння свиноматок. Провідну роль у негативному впливі процесу кріоконсервації на функціональну активність і, в цілому, виживаність сперміїв кнура відіграє не так рівень температурного параметру, як термін тривалості, у фазах заморожування і розморожування сперми. Функціональна активність сперміїв, експульсованих маткою свині після осіменіння кріоконсервованою спермою прямо корелює з результатом запліднення за показником опоросів (r=0,69; P<0,05), що дає змогу провести оцінку in vivo шляхом підрахунку відсотка поступально-рухливих сперміїв протягом 3 год. після осіменіння з метою прогнозування одержання опоросів. При використанні розробленої спрощеної технології кріоконсервації цільної сперми кнурів необхідно дотримуватись таких параметрів: ступінь розбавлення 1:1, кінцева концентрація сперміїв 0,1 млрд./см? тривалість фази еквілібрації три години, швидкість заморожування 305,1 ОС/хв. товщина замороженого шару сперми не більше 3мм, незалежно від її об?єму. Для створення запасів кріоконсервованої сперми цінних плідників одержувати еякуляти в сезон максимальної кріостійкості сперміїв з урахуванням генотипу кнура.