Визначення питомої ваги бактерій Haemophilus influenzae в етіологічній структурі гнійних менінгітів та пневмоній у дітей дошкільного віку. Біологічні властивості штамів та їх носійство. Особливості лікувально-профілактичних заходів та вакцинація.
Аннотация к работе
Захворювання, етіологічним чинником яких є Haemophilus influenzae капсульного серотипу b (так звані Hib-інфекції), найбільш притаманні дітям віком від 3 місяців до 5 років і характеризуються тяжкими генералізованими формами з летальністю від 2-6 % до 40-50 %, численними ускладненнями та стійкою інвалідізацією в 10-20 % випадків. До введення вакцинації проти Hib-інфекції частота захворювань цієї етіології у дітей до 5 років в різних країнах була різною і досягала таких показників (на 100 000 дітей): в Англії - 36, Фінляндії - 52, Франції - 21, Німеччині - 40, Швейцарії - 60, в Австралії - 460 серед аборигенів, в Південній Африці - 104, в Південній Америці - 20-43, в країнах Азії - 3-163, в країнах Середнього Сходу - 26-58, в США у загальному вона була - 60 - 100, а серед корінного населення Аляски - до 2960 дітей першого року життя. Враховуючи крапельний механізм поширення інфекції та проблеми в етіотропній терапії, повязані з резистентністю Hib-бактерій до широкого спектру антибіотиків, єдиним надійним засобом боротьби з цією інфекцією і захисту дітей від неї є вакцинопрофілактика. Включення вакцин проти Hib-інфекції в календар щеплень ряду розвинених країн (Фінляндія, Франція, Німеччина, Великобританія) призвело до різкого зниження і навіть ліквідації захворюваності, викликаної цими бактеріями. Згідно результатів проведеної експрес-оцінки тяжкості хвороб, що викликаються H.influenzae типу b, яка була проведена в Україні місією ВООЗ у 2003 році, показник захворюваності на Hib-обумовлений менінгіт складає від 3,7 до 17,7 на 100 000 дітей у віці молодше 5 років (80-240 випадків захворювань на рік).Одночасно з рутинними методами ідентифікації дослідження біохімічних властивостей штамів гемофілів проводили з використанням комерційних тест-систем для ідентифікації бактерій роду Haemophilus API NH (виробництва BIOMERIEUX, Франція). Серологічну ідентифікацію капсульних штамів H.influenzae і серологічне дослідження різних видів клінічного матеріалу (ліквору, сечі) проводили в реакції латекс-аглютинації (ЛА) із застосуванням комерційних тест-систем Directigen Meningitis Individual Tests (виробництва Becton Dickinson, США) і Slidex meningite - Kit 5 (виробництва BIOMERIEUX, Франція), а також в реакції коаглютинації (КОА) за допомогою стафілококових реагентів з використанням чотирьох специфічних неадсорбованих сироваток до типів a, b, d, f H.influenzae, отриманих в лабораторних умовах за методикою Н.І.Храмової (1973). Чутливість бактерій роду Haemophilus до антибіотиків вивчали на шоколадному агарі на основі агару Мюллер-Хінтон та, частково, на шоколадному агарі, приготовленому на основі агару АГВ дискодифузійним методом за Бауер-Кірбі з використанням комерційних дисків (1987). При дослідженні клінічного матеріалу на предмет визначення антигенів H.influenzae з використанням комерційних тест-систем (в реакції ЛА) та реагентів, отриманих в лабораторних умовах для реакції КОА, перевага надається методу КОА як більш доступному в економічному відношенні для практичних лабораторій. При дослідженні матеріалу дітей (сечі) на предмет виявлення антигену Hib з використанням комерційних тест-систем (в реакції ЛА) та реагентів, виготовлених в лабораторних умовах для реакції КОА, не встановлено переваги якогось з цих методів стосовно чутливості і специфічності.В роботі наведено вирішення актуального наукового завдання - за допомогою комплексної лабораторної діагностики, що включає бактеріологічні та серологічні методи досліджень, встановлено значний рівень поширення інфекцій, спричинених бактеріями H.influenzae типу b серед різних вікових груп населення, високий рівень колонізації цим збудником носоглотки здорових дітей дошкільного віку, а також вивчено біологічні особливості виділених штамів. Встановлено, що питома вага H.influenzae типу b в етіологічній структурі бактеріологічно не розшифрованих гнійних бактеріальних менінгітів за даними серологічних досліджень ліквору 20 дітей, складала 10,0 %, а на долю Streptococcus pneumoniae припадало 25,0 %. Встановлено, що питома вага Hib-інфекції дихальних шляхів за даними серологічних досліджень сироватки крові і сечі 65 дітей дошкільного віку, госпіталізованих з підозрою на пневмонію, становила 33,9 %, - з них на долю Hib-пневмоній припадало 26,2 %, а на долю Hib-бронхітів - 7,7 %. При бактеріологічному дослідженні слизу носоглотки 427 дітей дошкільного віку в 11,7 % виявлено носійство H.influenzae серотипу b I - VIII біотипів. Серед 52 штамів гемофільних бактерій, ізольованих від дорослих з гострими та хронічними захворюваннями дихальних шляхів, переважали бактерії H.influenzae - 83,0 %, а штами H.parainfluenzae складали 17,0 %.
План
2. ОСНОВНИЙ ЗМІСТ РОБОТИ
Вывод
В роботі наведено вирішення актуального наукового завдання - за допомогою комплексної лабораторної діагностики, що включає бактеріологічні та серологічні методи досліджень, встановлено значний рівень поширення інфекцій, спричинених бактеріями H.influenzae типу b серед різних вікових груп населення, високий рівень колонізації цим збудником носоглотки здорових дітей дошкільного віку, а також вивчено біологічні особливості виділених штамів. Одержані дані обґрунтовують необхідність проведення відповідних лікувально-профілактичних заходів, серед яких найбільш важливим є вакцинопрофілактика дітей дошкільного віку.
1. Розроблені та одержані високоефективні лабораторні серії сироваток до різних серотипів H.influenzae, на основі яких створений антитільний діагностикум для реакції коаглютинації. Доведено високу чутливість та специфічність діагностикуму для розробки комерційного вітчизняного препарату.
2. Встановлено, що питома вага H.influenzae типу b в етіологічній структурі бактеріологічно не розшифрованих гнійних бактеріальних менінгітів за даними серологічних досліджень ліквору 20 дітей, складала 10,0 %, а на долю Streptococcus pneumoniae припадало 25,0 %.
3. Встановлено, що питома вага Hib-інфекції дихальних шляхів за даними серологічних досліджень сироватки крові і сечі 65 дітей дошкільного віку, госпіталізованих з підозрою на пневмонію, становила 33,9 %, - з них на долю Hib-пневмоній припадало 26,2 %, а на долю Hib-бронхітів - 7,7 %.
4. При бактеріологічному дослідженні слизу носоглотки 427 дітей дошкільного віку в 11,7 % виявлено носійство H.influenzae серотипу b I - VIII біотипів. Його рівень значно коливався у дітей різних дошкільних закладів (від 21,7 % до 1,9 %). Більшість штамів H.influenzae (56,2 %) виділялися в асоціації з а-гемолітичним стрептококом, і були стійкими до ампіциліну, хлорамфеніколу і тетрацикліну.
5. Серед 52 штамів гемофільних бактерій, ізольованих від дорослих з гострими та хронічними захворюваннями дихальних шляхів, переважали бактерії H.influenzae - 83,0 %, а штами H.parainfluenzae складали 17,0 %. Належність біохімічно інертних штамів (20 ізолятів) до виду H.influenzae доведена складом клітинних жирних кислот - важливої хемотаксономічної ознаки.
6. Гемофільні бактерії, ізольовані від дорослих, хворих на бронхолегеневі захворювання, резистентні до ампіциліну, хлорамфеніколу, тетрацикліну, цефотаксиму, цефтриаксону. Ці дані мають наукову і практичну значущість для моніторингу антибіотикорезистентності регіональних штамів, а також при визначенні переліку препаратів для лікування гострих і хронічних захворювань бронхолегеневої системи, обумовлених гемофільними бактеріями.
7. Відсутність істотних розходжень в значеннях діаметрів зон затримки росту еталонних штамів H.influenzae на середовищах Мюллера-Хінтона та АГВ дає можливість рекомендувати обидва середовища для визначення антибіотикочутливості гемофільних бактерій.
8. Для довготривалого зберігання збудників гемофільної інфекції в музейних колекціях мікроорганізмів доцільно використовувати агаризоване сахарозо-желатинове середовище.
Список литературы
Поліщук О.І., Брич О.І., Погорельчук Л.М. Циркуляція Haemophilus influenzae серед дітей дошкільного віку // Дитячі інфекції. - Укр. міжвідомча збірка. - К.:Знання. - 2002. - С. 238-242. (Здобувачем особисто проведено бактеріологічні та серологічні дослідження матеріалу від дітей, аналіз результатів).
Чернишова Л.І., Винник Н.П., Брич О.І. Клінічні особливості пневмоній у дітей, зумовлених Haemophilus influenzae типу b // Зб. наук. праць співробітників КМАПО ім. П.Л. Шупика. - Вип. 12. - Книга 2. - К., 2003. - С. 670-674. (Здобувачем особисто проведено серологічні дослідження клінічного матеріалу від дітей, обробка та аналіз результатів).
Брич О.І., Рубан Н.М., Головня О.М. Біологічні властивості клінічних штамів бактерій роду Haemophilus, виділених при захворюваннях органів дихання // Зб. наук. праць співробітників КМАПО ім. П.Л. Шупика. - Вип. 13. - К., 2004. - С. 397-402. (Здобувачем особисто досліджені біологічні властивості клінічних штамів гемофільних бактерій).
Поліщук О.І., Брич О.І. Гемофільна інфекція та шляхи її попередження // Современная педиатрия. - К., 2004. - № 4(5). - С.157-160. (Здобувачем зібрано відомості про етіологічну роль Haemophilus influenzae в захворюваннях дітей, світові дані щодо захворюваності Hib-інфекціями).