Вивчення антимутагенної дії водно-спиртових екстрактів біомаси культивованих клітин лікарських рослин на рівень спонтанного та хімічно індукованого мутагенезу. Використання системи Escherichia coli для вивчення захисної активності рослинних екстрактів.
Аннотация к работе
Вивчити у системі E.coli - бактеріофаг l активність рослинних екстрактів при застосуванні різних варіантів фага l та різних способів їх обробки мутагеном та екстрактами. Систему E.coli - бактеріофаг l можна застосовувати для первинного скринінгу препаратів на антимутагенну активність, аналізуючи їх вплив на рівень інактивації тест-обєкту, обробленого мутагеном за умов in vitro. У дослідах за умов in vitro тест-обєктами слугували фаг l дикого типу та фаг l-4, використані як у нативній формі (необроблений фаг), так і у формі попередньо мутагенізованих фагів. Джерелом біомаси слугували: біомаса культури тканин женьшеня справжнього Panax ginseng C.A. Mey. із родини Araliaceae (штам Panax БІО-2МК, колекційний № 11, ККК ІМБІГ НАН України, Київ) - далі екстракт P.ginseng; полісціасу папоротелистого Polyscias filicifolia Bailey із родини Araliaceae (штам Polyscias F-2, колекційний № 6, ККК ІМБІГ НАН України, Київ) - далі екстракт P.filicifolia; родіоли рожевої Rhodiola rosea L. із родини Crassulaceae (штам ЗК-1, колекційний № 29, ВСКК-ВР, Москва, Росія) - далі екстракт Rh.rosea; унгернії Віктора Ungernia victoris Vved. ex Artjuschenko із родини Amaryllidaceae (штам UV-2, колекційний № 10, ККК ІМБІГ НАН України, Київ) - далі екстракт U.victoris. При цьому ми виходили з припущення, що розширення набору фагових варіантів за рахунок введення поряд з дикою формою фага (фаг l ) делетованої форми фага (фаг l-4) та застосування попередньої мутагенізції тест-обєкту (фаги l ІІІ пас. та l-4 І пас.) дозволить сформувати достатньо чутливу тест-систему, здатну ефективно реагувати на обробку мутагеном та потенційним антимутагеном.Водно-спиртові екстракти біомаси культивованих клітин женьшеня справжнього Panax ginseng, полісціасу папоротелистого Polyscias filicifolia, родіоли рожевої Rhodiola rosea та унгернії Віктора Ungernia victoris не впливали на спонтанний рівень мутантів та пригнічували хімічно індукований мутагенез у тесті Еймса та системі Escherichia coli - бактеріофаг ll. У тесті Еймса найсильніший антимутагенний ефект щодо ряду мутагенів прямої дії виявили екстракти Rh.rosea та P.filicifolia (65-93% пригнічення мутагенності). Дію промутагенів знижували екстракти P.ginseng та Rh.rosea (на 30-50%).
Вывод
1. Водно-спиртові екстракти біомаси культивованих клітин женьшеня справжнього Panax ginseng, полісціасу папоротелистого Polyscias filicifolia, родіоли рожевої Rhodiola rosea та унгернії Віктора Ungernia victoris не впливали на спонтанний рівень мутантів та пригнічували хімічно індукований мутагенез у тесті Еймса та системі Escherichia coli - бактеріофаг ll.
2. У тесті Еймса найсильніший антимутагенний ефект щодо ряду мутагенів прямої дії виявили екстракти Rh.rosea та P.filicifolia (65-93% пригнічення мутагенності). Дію промутагенів знижували екстракти P.ginseng та Rh.rosea (на 30-50%).
3. Показана можливість використання системи E.coli - бактеріофаг ll для вивчення впливу рослинних препаратів на рівень індукованих маркерних та летальних ушкоджень. Найбільш чутливим тест-обєктом був варіант бактеріофага l, отриманий при попередньому вирощуванні його делетованої форми (l-4) на середовищі з мутагеном.
4. Обробка тест-фага мутагеном за умов in vitro (поза клітиною) дає змогу розмежувати протекторну та антимутагенну активності досліджуваних препаратів. Протекторна дія вивчених екстрактів була значно вищою, ніж їх антимутагенна активність. Найвищий протекторний ефект мав екстракт U.victoris, антимутагенний - екстракт Rh.rosea; екстракт натурального кореня Rh.rosea демонстрував антивірусну активність.
5. Для первинного скринінгу препаратів на антимутагенну активність у прокаріотичних системах доцільно обмежитись вивченням їх впливу на інактивацію тест-обєкту, обробленого мутагеном за умов in vitro.
6. Антимутагенна активність екстрактів у використаних системах (тест Еймса та система E.coli - бактеріофаг ll) проявилась різною мірою як у кількісному, так і в якісному відношеннях, причому більш чіткі кількісні результати одержані при використанні системи E.coli - бактеріофаг ll.
Список литературы
1. Дворник А.С., Дуган О.М., Кунах В.А. Антимутагенна дія екстрактів із біомаси культивованих клітин деяких лікарських рослин // Доповіді НАН України. - 1999. - № 7. - С. 166-169.
2. Дуган О.М., Бариляк І.Р., Нестер Т.І., Дворник А.С., Кунах В.А. Дослідження антимутагенної активності екстрактів із біомаси культивованих клітин деяких лікарських рослин у тесті Еймса // Цитология и генетика. - 1999. - 33, № 6. - С. 19-25.
3. Дворник А.С., Перерва Т.П., Мойса Л.М., Кунах В.А. Використання системи Escherichia coli - бактеріофаг l для вивчення антимутагенної дії рослинних екстрактів // Биополимеры и клетка. - 2000. - 16, № 1. - С. 69-74.
4. Дворник А.С., Перерва Т.П., Кунах В.А. Антимутагенна дія рослинних екстрактів у тест-системі Escherichia coli - бактеріофаг l в умовах in vitro // Доповіді НАН України. - 2000. - № 7. - С. 188-190.
5. Дворник А.С. Антимутагенна активність рослинних екстрактів у системі Escherichia coli - бактеріофаг l // Бюлетень інституту сільськогосподарської мікробіології. - 2000. - № 7. - С. 15-16.
6. Можилевская Л.П., Кунах В.А., Дворник А.С., Музыка В.И. Получение и результаты изучения культуры тканей Ungernia victoris // IV Міжнародна конференція з медичної ботаніки. Тези доп. - Вересень, Київ. - 1997. - С. 337-338.
7. Dvornyk A.S., Dugan A.M., Mozhylevska L.P., Kunakh V.A. Estimation of antimutagenic activities of the extracts from the biomass of cultured cells of some medicinal plants // II International Symposium on Plant Biotechnology. Abstracts. - 4-8 October, Kyiv (Ukraine) . - 1998. - P. 35.