Вивчення стану клітинного та гуморального імунітету у дітей та підлітків з вперше виявленим цукровим діабетом 1 типу імунологічними та цитологічними методами дослідження, включаючи FACS аналіз та електронну мікроскопію в динаміці лікування інсуліном.
Аннотация к работе
За даними багатоцентрової дослідницької групи “Eurodiab” у всіх регіонах Європи з 1989 по 1998 р. відзначається швидкий ріст кількості дітей, хворих на вперше виявлений ЦД-1. Неухильне зростання числа хворих на ЦД-1, особливо дітей та підлітків, важкі судинні ускладнення, рання інвалідизація пацієнтів змушують розглядати цукровий діабет як одну з найбільш важливих медико-соціальних проблем. У звязку з цим є актуальним вивчення стану імунітету з використанням сучасних методів дослідження кількості й функції лімфоцитів різного імунофенотипу, що включають проточну цитометрію й електронну мікроскопію клітин крові, проведених у одних і тих же дітей та підлітків з вперше виявленим ЦД-1, до початку лікування інсуліном, а потім у динаміці - через 3, 6, 12, 18 і 24 міс. Оцінити стан клітинного і гуморального імунітету у дітей і підлітків з вперше виявленим ЦД-1 до початку лікування інсуліном, а потім у тих же хворих в динаміці протягом двох років спостереження, при постійному контролі показників вуглеводного обміну, стану інсулінпродукуючої функції підшлункової залози, клінічного плину захворювання. Дослідити вміст у крові лімфоцитів різного імунологічного фенотипу (CD3 -, CD4 -, CD8 -, CD20 -, CD56 -клітин) за допомогою моноклональних антитіл і методу проточної цитометрії у дітей та підлітків з вперше виявленим ЦД-1 і в динаміці лікування інсуліном.Обстежено 114 дітей та підлітків у віці від 7 до 15 років (середній вік складав 10,74±0,22 років); з них: 61 хворий з вперше виявленим ЦД-1; 23 хворих на ЦД-1 із тривалістю захворювання від 5 до 10 років і 30 практично здорових дітей того ж віку (середній вік - 11,2±0,27 років), що складали контрольну групу. Для вивчення зазначених гематологічних та імунологічних показників кров брали до початку інсулінотерапії і через 3, 6, 12, 18 і 24 міс після її початку. З усіх обстежених нами дітей з вперше виявленим ЦД-1 була ретельно відібрана група пацієнтів, що складалася з 35 дітей, які, відповідно до анамнезу, ще не приймали ніяких цукрознижующих засобів і у яких при ретельному інструментальному обстеженні не було виявлено ускладнень, особливо запальних. У хворих цієї групи паралельно з традиційними клініко-лабораторними дослідженнями було проведене вивчення гематологічних та імунологічних показників ПК у динаміці (до лікування і через 3, 6, 12, 18 і 24 міс після його початку). Навпаки, через 24 міс після початку інсулінотерапії відносний і абсолютний вміст CD3 -клітин у середньому став ще нижчим у порівнянні з групою здорових дітей; відносний і абсолютний вміст CD4 -клітин залишається низьким на протязі всього періоду спостереження у порівнянні з групою здорових дітей.При дослідженні імунологічного стану дітей та підлітків з вперше виявленим ЦД-1 встановлені виразні зміни показників клітинного і гуморального імунітету, що утримуються, незважаючи на традиційну інсулінотерапію. У дітей та підлітків з вперше виявленим ЦД-1 до початку лікування інсуліном виявлено: зниження вмісту в крові CD3 -клітин (загальної кількості Т-клітин), CD4 -клітин (Т-індукторів/хелперів) і CD56 -клітин (природних клітин-кілерів), виразність змін яких у значній мірі залежить від швидкості клінічної маніфестації. Традиційна інсулінотерапія у дітей та підлітків з вперше виявленим ЦД-1 в динаміці спостереження протягом двох років не призводить до нормалізації показників Т-і ПК-клітинного імунітету крові. Серед дітей та підлітків з вперше виявленим ЦД-1 виділена група (40%), де спостерігається стабільно низька кількість CD56 -клітин та ВГЛ. У таких дітей один з родичів першого ступеня споріднення був також хворий на ЦД-1, і в нього спостерігався низький вміст ПК-клітин.
План
ОСНОВНИЙ ЗМІСТ РОБОТИ
Вывод
При дослідженні імунологічного стану дітей та підлітків з вперше виявленим ЦД-1 встановлені виразні зміни показників клітинного і гуморального імунітету, що утримуються, незважаючи на традиційну інсулінотерапію. У дітей та підлітків, що хворіють тривалий час на ЦД-1, ці зміни стають ще виразнішими.
У дітей та підлітків з вперше виявленим ЦД-1 до початку лікування інсуліном виявлено: зниження вмісту в крові CD3 -клітин (загальної кількості Т-клітин), CD4 -клітин (Т-індукторів/хелперів) і CD56 -клітин (природних клітин-кілерів), виразність змін яких у значній мірі залежить від швидкості клінічної маніфестації.
Традиційна інсулінотерапія у дітей та підлітків з вперше виявленим ЦД-1 в динаміці спостереження протягом двох років не призводить до нормалізації показників Т- і ПК-клітинного імунітету крові.
Серед дітей та підлітків з вперше виявленим ЦД-1 виділена група (40%), де спостерігається стабільно низька кількість CD56 -клітин та ВГЛ. У таких дітей один з родичів першого ступеня споріднення був також хворий на ЦД-1, і в нього спостерігався низький вміст ПК-клітин. Це дозволяє припустити, що дана група дітей відноситься до особливого підвиду ЦД-1 з генетично зумовленим дефектом ПК-клітин.
У дітей та підлітків з вперше виявленим ЦД-1 виявлені зміни ультраструктури ВГЛ, характерні для ослабленої цитолітичної й секреторної функції ПК-клітин. Інсулінотерапія на протязі 24 міс не призводила до нормалізації ультраструктури ВГЛ.
У дітей та підлітків з вперше виявленим ЦД-1 відзначається підвищення вмісту IGG, IGA і IGM у сироватці крові при нормальному рівні CD20 -клітин. У динаміці лікування інсуліном відзначається тенденція до нормалізації IGA і Ig M. Рівень IGG наприкінці другого року спостереження знижений.
У дітей та підлітків, що хворіють на ЦД-1 на протязі 5-10 років поряд зі зниженням показників Т- і ПК-клітинного імунітету спостерігається паралельне зниження рівня С-пептиду.
Практичні рекомендації
На підставі проведених досліджень встановлено, що традиційна інсулінотерапія не призводить до нормалізації імунологічних показників у дітей та підлітків з вперше виявленим ЦД-1, а, навпаки, при тривалості захворювання 5-10 років виявлені зміни стають більш виразними. Рекомендується проводити в усіх хворих на ЦД-1 імунологічне обстеження 1 раз на рік.
Отримані дані дозволили нам виокремити й описати особливий підвид ЦД-1 у дітей, який характеризується стабільно низьким вмістом ПК-клітин та ВГЛ у крові. Родичів таких хворих у віці до 16 років рекомендовано виділити в групу ризику щодо ЦД-1 й проводити в них дослідження вмісту ПК-клітин та ВГЛ у крові 1 раз на рік.
Список литературы
Зак К.П., Малиновская Т.Н., Тронько Н.Д. Иммунитет у детей, больных сахарным диабетом. - К: Книга плюс, 2002. - 112 с. (Автором самостійно здійснювався пошук літератури за темою, проведено підбір, обстеження, лікування хворих, узагальнення отриманих результатів. Імунологічне обстеження проведено в лабораторії гормональної регуляції кровотворення під керівництвом проф. Зака К.П.)
Зак К.П., Малиновська Т.М. Динаміка показників гуморального імунітету у дітей з вперше виявленим цукровим діабетом 1 типу // ПАГ. - 2001. - №1. - С. 29-31. (Автором самостійно проведено підбір, обстеження, лікування хворих, аналіз та узагальнення змін в імунограмах пацієнтів, оцінку динаміки рівня імуноглобулінів в процесі лікування, написання статті).
Зак К.П., Малиновська Т.М., Грузов М.А. Імунофенотип лімфоцитів крові дітей з цукровим діабетом 1 типу в динаміці тривалої інсулінотерапії // Лік. справа. - 2001. - №3. - С. 44-47. (Автором самостійно проведено підбір, обстеження, лікування хворих, оцінку динаміки отриманих даних імунологічного дослідження, написання статті).
Зак К.П., Малиновская Т.Н., Большова-Зубковская Е.В. Состояние иммунной системы у детей, больных сахарным диабетом 1 типа // Ендокринологія. - 2001. - 6, №2. - С. 191-203. (Автором самостійно здійснювався пошук літератури за темою, проведено підбір, обстеження, лікування хворих, узагальнення отриманих результатів).
Малиновская Т.Н., Зак К.П. Особенности иммунофенотипа лимфоцитов крови у детей, больных сахарным диабетом 1 типа, в зависимости от длительности заболевания и уровня С-пептида // Доповіді НАН України. - 2002. - №2. - С. 192-195. (Автором самостійно проведено підбір, обстеження, лікування хворих, аналіз та узагальнення отриманих даних імунологічного та гормонального досліджень, написання статті).
Малиновська Т.М. Імунітет у дітей та підлітків з різною тривалістю цукрового діабету 1 типу // Ендокринологія. - 2002. - 7, №1. - С. 117-121. (Автором самостійно проведено підбір, обстеження, лікування хворих, аналіз та узагальнення отриманих даних, написання статті).
Афанасьева В.В., Грузов М.А., Малиновская Т.Н., Большова Е.В., Зак К.П. Гематологический и иммунологический мониторинг у детей, больных инсулинзависимым сахарным диабетом в течение инсулинотерапии // Тез. докл. ІІІ межд. симпозиума, Ново-Нордиск, 17-19.09.1998, Крым. - С. 3-4.
Грузов М.А., Малиновская Т.Н. Динамика гематологических и иммунологических показателей у детей с впервые выявленным инсулинзависимым сахарным диабетом (ИЗСД) // Акт. вопросы эндокринол. Тез. докл. Минск. - 1999. - С. 45-46.
Грузов М.А., Афанасьєва В.В., Малиновська Т.М., Зак К.П. Проточно-цитометричний аналіз лімфоцитів різного імунофенотипу та ультраструктури великих грануловмісних лімфоцитів крові у дітей з цукровим діабетом 1 типу // Тез. VI зїзду ендокринологів України, Київ, 23-25 травня, 2001. - С. 74.
Zak K.P., Gruzov M.A., Afanasyeva V.V., Malinovskaya T.N. Subtype of IDDM in newly diagnosed type 1 diabetics, characterised by low number and activity of NK cells in the peripheral blood // The 4th Immunology of Diabetes Society Congress. November. 10-15. 1999, Finggy (Rome), Italy. - P. 84.