Визначення особливостей перебігу деструктивно-відновних змін у шкірі під дією низьких температур після дозованого застосування озону. Динаміка відновних процесів на моделі кріопошкоджень при місцевому застосуванні озонованого фізіологічного розчину.
Аннотация к работе
Порушення мікроциркуляції в патологічному осередку, набряк тканин утруднюють проникнення антибактеріальних препаратів для профілактики і лікування гнійних ускладнень кріопошкоджень. Виникає необхідність в узагальненні результатів подібних досліджень, в комплексному поєднанні різних методів спостереження за деструктивно-відновними процесами у шкірі для вдосконалення існуючих схем лікування і діагностики кріопошкоджень, у аналізі загальних закономірностей дії різних доз озону на біологічні системи, розгляді можливості використання його для інтенсифікації репараційних процесів в тканинах після дії холоду і порівняння ефективності озонованих розчинів в зіставленні із загальноприйнятими лікувальними засобами. Дисертація виконувалася з 2004 по 2008 рр. в рамках науково-дослідних тем Інституту проблем кріобіології і кріомедицини НАН України “Дослідження впливу і механізму дії кріоконсервованих тканинних препаратів з ксеногенних органів на перебіг ряду патологічних процесів в організмі” (шифр 2.2.6.05, № держреєстрації 0102U002027) і “Підвищення ефективності технологій кріоконсервування біологічних систем шляхом інтенсифікації репараційних процесів після дії холоду і зниження ризику контамінації мікроорганізмів на різних етапах кріоконсервування” (шифр 2.28.7.4, № держреєстрації 0105U03918). Відповідно до встановленої мети передбачалося: Вивчити динаміку деструктивно-відновних процесів на моделі кріопошкоджень при місцевому застосуванні озонованого фізіологічного розчину (ОФР), визначити концентрацію озону в ОФР, що забезпечує лікувальну дію на шкіру. Поставлені задачі розвязувалися за допомогою моделювання кріопошкоджень, морфологічного, гістохімічного аналіза, мікробіологічного дослідження, термографічного методу, вивчення перекисного окислення ліпідів у сироватці крові спектрофотометричним методом, аналізу складу екстракту плаценти офіцинального методом спектральної флуоресценції, вивчення антиоксидантної активності в сироватці крові методом індукованої хемілюмінесценції.Експерименти були проведені на 216 білих статевозрілих щурах-самцях лінії Вістар середньою масою 200-250 г. на підставі «Загальних принципів експериментів на тваринах», схвалених ІІ Національним конгресом з біоетики (Київ, 2004) і узгоджених з положеннями «Європейської конвенції про захист хребетних тварин, які використовуються для експериментальних і інших наукових цілей» (Страсбург, 1985). Перша група - контрольна, в якій досліджували показники, що характеризують запальний процес в шкірі при кріопошкодженнях без лікування на 1, 3, 7 і 14 добу. Для контролю за динамікою змін показників ІЧ-випромінювання і відтворюваністю моделі кріопошкодження, реєстрація потоку випромінювання проводилася в першу хвилину після холодового впливу при відтанні кріопошкодження. Таким чином, для опису змін показників ІЧ-випромінювання, що виникають після холодових впливів, необхідно використовувати два показники: - фонових ІЧ-випромінювань (ФП), як індикатор реакції цілого організму; - різницю показників фонового і раневого ІЧ-випромінювань (“локальні показники” (ЛП)), як індикатор локальних реакцій і змін в тканинах з кріопошкодженням. Після вивчення мікробного пейзажу і оцінки динаміки змін бактеріологічних характеристик кріопошкоджень в різних групах було встановлено, що у всіх групах спостерігалось зростання показників КОЄ від 3 до 7 доби експерименту і зменшення їх до 14 доби (рис.У звязку з необхідністю у поєднанні різних методів спостереження за деструктивно-відновними процесами у шкірі для вдосконалення існуючих схем лікування і діагностики кріопошкоджень та у аналізі впливу різних концентрацій озону в ОФР було проведено дослідження на моделі кріопошкоджень дії ОФР з концентраціями озону 1, 6, 12 мг/л. Біохімічними дослідженнями встановлено, що введення ОФР з концентрацією озону 1 мг/л щурам з кріопошкодженням в динаміці не відбувається виснаження антиоксидантної активності (АОА) сироватки крові. При морфологічному дослідженні встановлено, що стимуляція процесів репарації при використанні ОФР з концентрацією озону (від 12 мг/л до 1 мг/л) підвищується при зниженні концентрації озону. Показано, що в групі з введенням ОФР з концентрацією озону 1 мг/л спостерігаються найвищі абсолютні значення ІЧ-випромінювання з поверхні кріопошкоджень, а в групі з лікуванням маззю «Левомеколь» відзначаються також високі абсолютні значення, проте реєструються вони в пізніші терміни. Влияние озонированных растворов на динамику раневого процесса при холодовых повреждениях кожи / [Сомова Е.В., Кадникова Н.Г., Тыныныка Л.Н., Зинченко В.Д.] // Проблемы криобиологии: НАН Украины.
План
2. Основний зміст роботи
Вывод
У звязку з необхідністю у поєднанні різних методів спостереження за деструктивно-відновними процесами у шкірі для вдосконалення існуючих схем лікування і діагностики кріопошкоджень та у аналізі впливу різних концентрацій озону в ОФР було проведено дослідження на моделі кріопошкоджень дії ОФР з концентраціями озону 1, 6, 12 мг/л. У роботі представлено теоретичне і експериментальне обгрунтування застосування реєстрації інфрачервоного випромінювання, як діагностичного методу для контролю процесу загоєння кріопошкоджень. З використанням цього методу проведений порівняльний аналіз результатів лікування кріопошкоджень із застосуванням ОФР, ЕПЛ «офіцинального», мазі «Левомеколь» за допомогою оригінального безконтактного пристрою вимірювання теплового (інфрачервоного) потоку (Патент на к. м. №23521, Україна, 2006).
Встановлено, що озоновані фізіологічні розчини (ОФР) забезпечують лікувальну дію на шкіру, пошкоджену холодом. Кращий лікувальний ефект спостерігається при введенні ОФР з концентрацією 1 мг/л. Біохімічними дослідженнями встановлено, що введення ОФР з концентрацією озону 1 мг/л щурам з кріопошкодженням в динаміці не відбувається виснаження антиоксидантної активності (АОА) сироватки крові. До 16 доби спостерігається вірогідне (Р<0,05) підвищення АОА у порівнянні з групою інтактних тварин. Виявлені спільні риси дії ОФР різних концентрацій на мікроорганізми в осередку кріопошкоджень: застосування ОФР сприяло ерадикації кріопошкоджень від анаеробних мікроорганізмів і грибів.
При морфологічному дослідженні встановлено, що стимуляція процесів репарації при використанні ОФР з концентрацією озону (від 12 мг/л до 1 мг/л) підвищується при зниженні концентрації озону. Виявлено, що характерною особливістю архітектоніки раневого дефекту в групі тварин, що лікуються ОФР з концентрацією озону 1 мг/л, є орієнтоване розташування колагену, що має особливе значення для утворення косметичного рубця і збереження функції шкірного покриву. ОФР із концентрацією озону 1 мг/л, значно зменшує прояви запальної реакції, прискорює епітелізацію раневого дефекту і сприяє формуванню тонкої і ніжної рубцюватої тканини. При щоденному введенні під струп ОФР із концентрацією озону 12 мг/л спостерігається уповільнення процесів репарації тканин після холодових впливів. Встановлено, що при аналізі змін потоку ІЧ-випромінювання (?= Ірани - Ішкіри) після нанесення кріопошкоджень можна виділити загальні риси: значне зростання показників в першу добу, наявність локального максимуму на 7-8-у добу в більшості випадків у тварин різних груп експерименту. Встановлені відмінності в термінах повернення до початкових значень показників ІЧ-випромінювання.
Показано, що в групі з введенням ОФР з концентрацією озону 1 мг/л спостерігаються найвищі абсолютні значення ІЧ-випромінювання з поверхні кріопошкоджень, а в групі з лікуванням маззю «Левомеколь» відзначаються також високі абсолютні значення, проте реєструються вони в пізніші терміни. При проведенні дослідження складу екстракту плаценти «офіцинального», з яким порівнювали дію ОФР, в результаті аналізу трьохмірних спектрів флуоресценції, підтверджено наявність вільного, не повязаного з білками триптофану, що може забезпечити антиоксидантну дію екстракту.
Перелік праць за темою дисертації
1. Влияние озонированных растворов на динамику раневого процесса при холодовых повреждениях кожи / [Сомова Е.В., Кадникова Н.Г., Тыныныка Л.Н., Зинченко В.Д.] // Проблемы криобиологии: НАН Украины. - 2006. - Т. 16, № 2. - С. 217-222.
2. Сомова К.В. Вплив озонованих розчинів на деструктивно - відновлювальні процеси у шкірі після кріопошкоджень / К.В. Сомова, Н.Г. Каднікова // Світ медицини та біології. - 2007. - № 1. - С. 65-69.
3. Сомова Е.В. Восстановительные процессы в коже после криоповреждения под влиянием озонированных растворов / Е.В. Сомова, В.В. Волина, В.Д. Зинченко. // Проблеми медичної науки та освіти. - 2007. - № 4. - С. 51-55.
4. Сомова К.В. Вплив озонотерапії на показники антиоксидантної активності та перекісного окислення ліпідів сироватки крові / К.В. Сомова, О.Д. Рошаль, Б.П. Сандомирський // Світ медицини та біології. - 2008. - Ч. 2, № 2. - С. 89-93.
5. Микробиологические и биофизические показатели кожи крыс при моделировании холодовых повреждений кожи и использовании озонированных растворов / Е.В.Сомова, Н.Г. Кадникова, Л.Н. Тыныныка, Б.ПСАНДОМИРСКИЙ, В. Д. Зинченко // Вестник физиотерапии и курортологии. - 2005. - Т. 11. - С. 32-34.
6 . Патент на корисну модель № 23521 Україна, МПК (2006) А 61В 10/00 G01K 7/00, Пристрій для вимірювання потоку випромінювання нагрітої поверхні в інфрачервоній області спектра / Сомова К.В., Сомов В.Г., Зінченко В.Д., Сандомирський Б.П., Грищенко В.І. // заяв. ІПКІК НАН України. - № u 2007 00834 заявл. 26. 01. 07; опубл. 25. 05. 07. Бюл. № 7.
7. Використання теплового випромінювання з поверхні рани для контролю динаміки загоєння кріотравм у експерименті на щурах / Сомова К.В., Сомов В.Г., Зінченко В.Д., Сандомирський Б.П., Каднікова Н.Г. // Матеріали 4 зїзду Українського біофізичного товариства. - Біофізика. - Донецьк. - 2006. - С. 233-234.
8. Сомова Е.В. Влияние различных концентраций озонированных растворов на динамику раневого процесса при холодовых повреждениях кожи крыс / Е.В. Сомова // Проблемы криобиологии. - 2006. - Т. 16, № 4.- С. 429.
9. Контроль динамики раневого процесса при холодовых повреждениях кожи крыс с помощью ИК - термометрии / Сомова Е.В., Сомов В.Г., Кадникова Н.Г., Зинченко В.Д., Сандомирский Б.П. // Матеріали 5 міжнародного симпозіума. «Актуальні проблеми біофізичної медицини». - К.: НАНУ , 2007. - С. 172-173.
10. Сомова Е.В. Влияние озонированного раствора на восстановительные процессы в коже после криоповреждения / Е.В. Сомова // Проблемы криобиологии. - 2007. - Т. 17, № 2. - С. 201.
11. Сомова Е.В. Влияние различных методов лечения на динамику раневого процесса при холодовых повреждениях кожи крыс / Е.В. Сомова, В.Д. Зинченко, Б.П. Сандомирский // Казанский медицинский журнал. - Казань. - 2007. - С. 37-38.
12. Сомова К.В. Вплив озонованих розчинів на відновлювальні процеси у шкірі після кріоушкоджень / К.В. Сомова, В.В. Волина, В.Д. Зінченко // Харківська хірургічна школа. - 2007. - № 3. - С. 52-53.
13. Сомова Е.В. Влияние озонотерапии на показатели антиоксидантной активности и перекисного окисления липидов / Е.В. Сомова, А.Д. Рошаль, Б.П. Сандомирский // Проблемы криобиологии. - 2008. - т. 18, № 2. - С. 239.