Изучение устойчивости насекомых к патогенным микроорганизмам. Анализ онтогенетических особенностей формирования биохимических защитных реакций при действии битоксибациллина. Исследование применения хитозана в качестве адаптогена для медоносной пчелы.
Аннотация к работе
На правах рукописи АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени доктора биологических наук Биохимические механизмы адаптации к битоксибациллину в онтогенезе насекомых holometabola 03.00.04 - биохимия Салтыкова Елена Станиславовна Уфа 2009 Работа выполнена в Учреждении Российской Академии наук Институт биохимии и генетики Уфимского научного центра РАН Научный консультант: доктор биологических наук, профессор Николенко Алексей Геннадьевич Официальные оппоненты: доктор биологических наук, профессор Анисимов Анатолий Иванович, Санкт-Петербургский государственный аграрный университет доктор биологических наук, профессор, Ибрагимов Ринат Исмагилович, Башкирский государственный университет доктор биологических наук, доцент Князева Ольга Александровна, Башкирский государственный медицинский университет Ведущая организация: Санкт-Петербургский государственный университет Защита состоится «___» __________200__ г. в _______ часов на заседании Объединенного Диссертационного совета ДМ 002.133.01 при ИБГ УНЦ РАН. Устойчивость насекомых к патогенным микроорганизмам и продуктам их жизнедеятельности обусловлена хитинизированными покровами, скоординированным взаимодействием биохимических механизмов с деятельностью клеточных структур гемолимфы, жирового тела и кишечника, выстланного перитрофической мембраной, а также особенностями структуры и функционированием генома. Защитная система, опосредованная клетками гемолимфы, участвует совместно с гуморальными факторами в фагоцитозе, синтезе антимикробных пептидов, а также в гистолизе и гистогенезе в процессе метаморфоза (Глупов, 2001; Гайфуллина и др., 2004). Таким образом, данные биохимические системы насекомых принимают участие не только в защитных процессах, но и регуляции онтогенеза, что, как считает ряд исследователей, обусловлено сугубо врожденными факторами (Leclerc, Reicchart, 2004). В то же время наличие адаптивного ответа у насекомых допускает возможность существования специфичных и долговременных биохимических защитных реакций. Эти процессы должны быть связаны с онтогенетическими особенностями насекомых, поскольку личинка кардинально отличается от взрослой особи. Она должна базироваться на изучении динамики общих биохимических и клеточных защитных реакций насекомых на начальном этапе инфекционного процесса, использовании патогенного препарата общего типа действия (для чего был использован битоксибациллин), естественном способе заражения насекомых, применении патогена в дозировках и степени вирулентности, не вызывающих глубоких патологических изменений в организме насекомого, а также с учетом стадий онтогенеза. Не менее важны онтогенетические и другие условия функционирования биохимических защитных механизмов и для прикладных исследований. В процессе поиска и практического применения, биологически активных в отношении насекомых веществ, часто не учитываются условия формирования защитных реакций, предшествующие контролируемой стадии эксперимента. Это замечание можно отнести к изучению южных подвидов медоносной пчелы, интродуцированных в климатические условия средней полосы России. Роль иммунизации при этом считается несущественной, в том числе в силу малой продолжительности жизни насекомых. пчела битоксибациллин патогенный адаптоген Результаты отдельных исследований можно рассматривать как принцип формирования адаптивного ответа к конкретному патогену (Kurtz, 2005; Gaifullina et al., 2005). Таким образом, изучение вопросов онтогенетических и внутривидовых особенностей реализации биохимических защитных реакций, метаболической взаимозависимости компонентов данных систем, возможности преадаптации насекомых, условий формирования долговременных биохимических защитных реакций и возможности их трансгенерации может изменить общее представление о механизмах биохимической устойчивости насекомых к неблагоприятным факторам среды, обеспечивающих адаптивную пластичность видов класса Insecta. Оценить возможность иммунизации насекомых и их способность к развитию долговременной иммунной памяти на основе биохимических защитных механизмов, особенностей их онтогенетического формирования. 5. Получены данные по высокой биологической активности хитозана в отношении хозяйственно значимых насекомых, которая выражается в преадаптивном действии и во влиянии на скорость морфогенетических процессов, что было показано на медоносной пчеле и колорадском жуке. Обработка биологических объектов адаптогенами (хитозан и аскорбиновая кислота), а также модельное воздействие в лабораторных условиях на насекомых битоксибациллином (БТБ), представляющим спорокристаллический препарат на основе Bacillus thuringiensis var. thuringiensis, проводили по методикам, разработанным Е.С. Салтыковой (2000), Л.Р. Гайфуллиной (2004). Активность глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы (Г6ФДГ) измеряли по Н.В. Алексахиной (1979), удельную активность выражали в мкМ/мин/мг белка. Изменение активности ферментов антиоксидантной и фенолоксидазной систем в гемолимфе и кишечнике у личинок 3 возраста колорадского жука при действии БТБ (данн